哪些情况会造成细胞污染
细胞培养中zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理(只有扔)。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?现在我们一起来看看!一、违规操作:1. 为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验。2. 器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用。3. 超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验。4. 不带手套,徒手操作。 5. 细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等仪器设备以及的实验服和拖鞋,未定期消毒。物品被带出细胞房使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。二、超净台和桌面,东西太多太乱超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外......阅读全文
细胞成团和细胞出芽实验
近几年来,3D(three dimensional)细胞培养系统开始成为生物学研究新的研究方法。使用3D系统培养系统能更好的模拟生物体内的真实生理环境,而2D(传统的贴壁培养)细胞培养系统不能有效的模拟细胞在生物体内的生理环境。3D细胞技术有很多种方法,使用多细胞形成的细胞团是其中主要的研究应用之一
免疫细胞抗原提呈细胞
(一)抗原提呈细胞的概念 抗原提呈细胞(APC)指能够摄取、加工处理抗原,并将抗原信息以和MHC分子结合形式提呈给T细胞的一类细胞。T细胞不能识别游离抗原,只能识别被APC加工提呈并与MHC分子结合的抗原肽。树突细胞和单核-巨噬细胞能够通过MHC Ⅱ分子提呈外源性抗原肽,被称为专职APC,所有有
细胞计数实验——细胞计数实验
实验方法原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞牛长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不易
细胞计数板怎么数细胞
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流
巨噬细胞和粒细胞区别
中性粒细胞和巨噬细胞之间的主要区别在于中性粒细胞不是抗原呈递细胞,而巨噬细胞是抗原呈递细胞。 中性粒细胞和巨噬细胞是属于先天免疫系统的白细胞,它们是抵抗病原体的主要初始防御者。 这些专门的细胞可以在称为“diapedesis(渗出)”的过程中通过血管的小孔挤压,终使它们能够轻松到达感染区域。 通常,
悬浮细胞如何去除死细胞
将培养瓶竖立放一段时间(50min左右),然后用吸管轻轻吸取上面1ml的细胞悬液,移入另一个新的已加培基的培养瓶中。或者ficoll分离,就像分离PBMC一样,先把细胞混匀,然后小心缓慢地把细胞加入到ficol中,1000g离心20分钟,收集位于ficoll和培养基之间的透明层,即为你的活细胞,这是
细胞周期的细胞分类
在体内根据细胞的分裂能力可把它们分为三类:①周期性细胞,如造血干细胞,表皮与胃肠粘膜上皮的干细胞。这类细胞始终保持活跃的分裂能力,连续进入细胞周期循环;②终端分化细胞,如哺乳动物成熟的红细胞、神经细胞等高度分化的细胞,它们丧失了分裂能力,又称终末细胞(end cell);③暂不增殖细胞群(G0期细胞
脱落细胞单细胞悬液的制备——食管拉网细胞
实验方法原理 在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 尼龙滤网 实验步骤
细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验过程
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床前评
细胞凋亡和上皮细胞向间质细胞的转变
细胞凋亡和上皮细胞向间质细胞的转变 (Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT) 在多种生理和病理过程中起到了重要的作用。细胞凋亡和EMT的失调会导致一些疾病的发生,例如肿瘤的形成和转移、肝脏和肾脏纤维化和胚胎发育的异常等。中国科学院上海生命科学研究院生物化
脱落细胞单细胞悬液的制备——尿液脱落细胞
实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料尿液试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用一清洁器皿收集 24 h 尿液,置 4℃ 冰箱中自然沉淀 2
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。细胞系(cell strain):原代培养物经传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所
促进细胞毒性T细胞识别并破坏癌细胞
通过利用机体自身的免疫细胞来开发的特定抗癌疗法如今已经发生了革命性的变化,诸如此类免疫疗法能够让恶性阶段血液癌症或实体瘤患者产生持久的抗癌反应,但并不是每个人都会产生反应,对于很多种癌症而言,肿瘤中细胞毒性T细胞(杀灭癌细胞的免疫细胞)的存在往往与个体的抗癌反应和生存直接相关,但却并不能预测患者
什么是粒细胞、红细胞、巨核细胞的病态造血?
“病态造血”(dysplasis)一词是在1982年FAB协作组对“骨髓增生异常综合征”(MDS)这组疾病的异常血细胞作出的具体形态描述,包括粒细胞、红细胞及巨核细胞3系的形态改变。它们在光学显微镜下的改变:(1)红细胞的病态造血:①红细胞系统过多或过少。②各阶段有核细胞明显大小不均,较早期的红细胞
外周血单个核细胞淋巴细胞和单个核细胞
1、淋巴细胞 淋巴细胞来源于造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)。造血干细胞可分化成多能前体细胞( multipotent progenitor cell,MPC),继而分化为淋巴样干细胞和髓样干细胞。淋巴样干细胞可继续发育为成熟的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。 细胞系(cell strain):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系,由原先存
PBMC的流式细胞图上几群细胞是哪些细胞
这个看你是怎么准备样本的了,如果没有任何染色,在FSC和SSC散点图上一般可看出如下的结果图中右上方的细胞群是粒细胞,偏下一点的是单核细胞,在下方偏左是淋巴细胞,最角落的是细胞碎片。但是临床上是不会这样做的,一般都是用CD45染色,以区别有核细胞,再辅以其他标记来鉴定细胞,比如下图蓝色区域是粒细胞,
用细胞染色技术分选细胞造血干细胞(HSC)和髓系祖细胞
实验概要识别/分离骨髓祖细胞技术和定量RT-PCR技术的结合将是理解造血分子机制基础的一个功能强大的工具。本实验,我们描述了用于荧光激活细胞分类(FACS)技术的的小鼠骨髓祖细胞标准染色程序。主要试剂1. 1×的PBS/2%胎牛血清(FCS,无菌)2. ACK缓冲液(41.45克NH4Cl,5克KH
强荧光载体在肿瘤细胞、神经细胞、干细胞等细胞中的应...
强荧光载体在肿瘤细胞、神经细胞、干细胞等细胞中的应用实例我们在细胞、动物实验操作时,常常都需要依赖荧光标记。如果能让这荧光亮一点,再亮一点,会带来什么样的改变呢~有图有真相!这画面太美我不敢看哦~大家找到自己的细胞了吗?A549 人肺癌细胞RKO 人结肠癌细胞Hela 人宫颈癌细胞MDA-MB-23
强荧光载体在肿瘤细胞神经细胞干细胞等细胞中应用实例
我们在细胞、动物实验操作时,常常都需要依赖荧光标记。如果能让这荧光亮一点,再亮一点,会带来什么样的改变呢~ 有图有真相!这画面太美我不敢看哦~大家找到自己的细胞了吗? A549 人肺癌细胞 RKO 人结肠癌细胞 Hela 人宫颈癌细胞 MDA-MB-231 人乳腺癌
关于细胞毒性T淋巴细胞的细胞试验介绍
该试验测定被特定抗原攻击后抗原特异性CD8+T淋巴细胞的裂解或者引起的炎症反应。用细胞毒性T淋巴细胞(CTL)测试细胞介导免疫需要成功的抗原呈递,以及随之产生的细胞因子、细胞接触依赖的信号转导来产生记忆T淋巴细胞,这是T细胞应答的基础。CTL试验曾用于小鼠和大鼠,也用于大型动物模型,但标准的临床
全面统计血细胞!揭示红细胞和白细胞的来源
健康的成年人每秒产生大约200万个血细胞,其中99%是携带氧气的红细胞,另外1%是血小板和免疫系统中的各种白细胞。关于所有不同种类的成熟血细胞是如何从骨髓中同一种“造血”干细胞中提分化出来的这个问题一直是研究的重点,但大多数研究都集中在1%的免疫细胞上。 “这有点奇怪,但因为红细胞无细胞核,因
人神经母细胞瘤细胞-SHSY5Y细胞
人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y细胞 通派(上海)生物细胞库主要从事提供细胞和细胞相关的产品,可提供耐药株筛选、基因敲除株筛选、荧光标记、STR鉴定等服务细胞库特点:来源可靠、状态稳定、污染率低等。售前可提供细胞说明书、细胞培养条件等资料更多细胞信息、细胞优惠活动请细胞库管理员人神经母细胞瘤细胞
细胞壁是植物细胞和原核细胞的边界吗
不是,两者都有细胞壁的。植物细胞和原核细胞的最大区别在核膜的有无,植物细胞有核膜及完整的核,原核则没有核膜,只有核区。
活细胞提取及应用——单个细胞级别的活细胞提取
由于细胞异质性的存在,单细胞层面的分析就变得十分重要。目前对于单细胞分析的方法主要还是通过化学、生物学的方法进行裂解后,提取内容物进行分析,然而这种方法往往会对样本造成一些损伤。直接提取活细胞具有诸多优点,但是操作苦难。如今一种全新使用FluidFM科技的技术新报道有望提供一种活细胞提取新型的简易方
冻存细胞复苏有很多死细胞如何去除死细胞
冻存细胞复苏有很多死细胞,如果去除死细胞的话可以养一天倒掉培养液,贴壁的细胞是活的。在细胞复苏操作时,应注意融化冻存细胞速度要快,可不时摇动安瓿或冷冻管,使之尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高,生长及形态良好。然而,由于冻存的细胞还受其他因素的影响,有时也会有部分细胞
细胞冷冻保存、冷冻细胞活化以及细胞计数与存活测试
一、细胞冷冻保存 1、材料: 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等
区分细胞周期中的细胞与凋亡中的细胞
很多时候,我的体会,我们会分不清浓缩核,比如分裂后期、分裂末期的核。有时候会误认为是凋亡,所以有必要分清楚。一般认为最大的区别是分裂后期的核是浓染的,但是通常都是成对的或对称的。我用hoechst,AO/EB染色均能明显显示这个特征,。下面是一些细胞周期的片子吧,hoechst染色中也能看到。Sub
干细胞的分类——多能干细胞、但能干细胞
1、多能干细胞:即能产生多种类型的细胞但失去了发育成完整个体能力的一类干细胞。如间充质干细胞,其不仅存在于骨髓中,在脂肪、骨骼、肝脏、脊髓、肺以及脐带中都能分离和制备间充质干细胞。间充质干细胞具有能支持造血和促进造血干细胞植入、调节免疫以及分离培养操作简便等特点,正日益受到人们的关注。随着间充质干细
细胞培养为什么细胞计数多天,细胞数反而削减?
一般细胞传代后,会有一个成长缓慢的潜伏期,细胞不增殖,而细胞会有正常的逝世,故细胞数不添加反而削减。