单细胞分离使工艺过程更加简单

单细胞分离法是一种从待分离的材料中直接分离单个细胞进行培养获得纯培养的方法。该法在显微镜下操作,对于体积较大的微生物,可以用毛细管提取微生物个体;对较小的细胞或孢子,可以用显微针、钩、环等挑取以获得单细胞;也可将适当稀释后的样品制成小液滴,在显微镜下选取只含有一个细胞的液滴培养。 细胞分离的手段主要是通过将细胞悬浮后做高通量筛选,其中主要使用的是流式细胞荧光分选技术(FACS)或者免疫磁性细胞分选法(MACS),这两种方法在临床上目前均广泛应于细胞筛选。然而这两种方法均需要使用相当大量数量的细胞,一般在105-106数量级上,然而很多研究中,培养出的细胞不太容易达到这个数量级。而在少量细胞分选中,这两种方法均面临着挑战。 微流控芯片技术的出现让少量细胞分选有了新的选择,该方法主要通过荧光、磁力、流体动力流、声光电泳、介电泳粘附等性质进行分离,这种方法往往需要较低的细胞浓度来实现单细胞分离,因此在分离过程中需要严格控制进入微......阅读全文

什么是浆细胞?浆细胞是B细胞吗?

  浆细胞又称效应B细胞。浆细胞大多见于消化管和呼吸道固有膜的结缔组织内。细胞较小,圆形或卵圆形,核圆但偏于细胞一侧,染色质粗,沿核膜呈辐射状排列成车轮状。细胞质呈嗜碱性,染为蓝色。在靠近核处,有一着色浅的区域。近细胞核处有一色较浅而透明的区域。电镜下可见细胞质内含大量密集的粗面内质网,浅染区是高尔

设计“杀手细胞”消灭癌细胞

  最近,康奈尔大学的生物医学工程师,开发出一种专门的白细胞——被称为“超级自然杀伤细胞”,能够在淋巴结中找到癌细胞,并只有一个目的:摧毁它们。这一突破可停止癌症转移的发生,相关研究结果发表在本月的《Biomaterials》。本文资深作者、生物医学工程教授Michael R. King说:“我们希

CHL细胞,正常仓鼠肺细胞

污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。2.如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。3.购买之细胞冷冻管经解冻后

裸细胞的细胞功能简介

  NK细胞能通过ADCC效应定向杀伤与IgG抗体结合的靶细胞,在机体的抗病毒感染和抗肿瘤免疫方面起着较重要的作用。在病毒感染的早期就能杀伤被病毒感染的靶细胞,在抗原特异性Tc细胞尚未形成前就能清除病毒。已发现T细胞和B细胞正常而NK细胞缺陷的个体,对病毒感染特别敏感,易患威胁生命的病毒感染。已知体

细胞诊断、肿瘤细胞分类要诀

细胞诊断要诀 镜下观察要周到,每个视野不漏掉; 看完背景看细胞,低倍高倍仔细瞧; 先看形态和大小,核浆比例有多少; 核的结构最重要,核质又多又粗糙; 核膜核仁均异常,病理分裂偶见到; 单个细胞不能断,足量细胞方有效; 只有成堆无分散,重复检查再报告。

按细胞比重分离B细胞

按细胞比重分离B细胞1.将2~3ml含3×107纯化的B细胞(B细胞>90%)的细胞悬液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平离心1000×g 20分钟。2.吸去无细胞上清液,交界面的低密度B细胞和大部分Percoll溶液。由于此时细胞沉淀非常松散,需留下约0.2ml Percol

细胞活性检测Orangu™细胞计数

Orangu™计数法Orangu™ solution(Cell Guidance,货号:OR01-500)是一种无细胞毒性、高灵敏度、比色法,用于测定细胞增殖和细胞毒性的细胞活性试剂。利用WST-8(细胞代谢的一种水溶性的四唑盐)在细胞内线粒体脱氢酶作为电子介质的情况下,它被还原为橙色的甲瓒染料,且

自然杀伤细胞的细胞来源

NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴结和骨髓中也有NK

《细胞》:细胞坏死能够被控制

美国科学家近日研究发现,破坏一种蠕虫的SRP-6蛋白能加速其细胞的坏死过程。这一发现有助于科学家更好地理解坏死(necrosis)——细胞死亡的方式之一,并找到对抗相关疾病的方法。相关论文发表在9月21日的《细胞》上。 细胞死亡的方式有多种,细胞凋亡(apoptosis)和坏死是比较典型的两种。细胞

细胞因子活化免疫细胞

  细胞因子肿瘤治疗中的另一种方法是通过体外与免疫细胞共育,以使这些细胞活化,然后再回输入患者体内,进行过继免疫细胞疗法。在这方面研究得最多的是淋巴细胞激活的杀伤细胞(lymphokine activated killercell,LAK)和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating l

免疫细胞的免疫细胞种类

T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞(thymus dependent lymphocyte)。亦可简称T细胞。来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。目前认为,在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细

自然杀伤细胞的细胞表型

人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1(见表7-10)。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子,1

细胞因子活化免疫细胞

  细胞因子肿瘤治疗中的另一种方法是通过体外与免疫细胞共育,以使这些细胞活化,然后再回输入患者体内,进行过继免疫细胞疗法。在这方面研究得最多的是淋巴细胞激活的杀伤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞。LAK是从肿瘤患者外周血中分离的单个核细胞,在体与IL-2共育,使之活化并增殖后,回输入病人体内,可抑制肿瘤生长。

细胞技术专题:细胞传代实验

根据细胞生长的恃点,传代方法有3种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代

细胞凋亡的细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

自然杀伤细胞的细胞来源

  NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5~10%,淋巴结和骨髓中也有

单细胞研究指南:细胞分离

  多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过,近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们,每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制,即使是同类型细胞,基因表达也会出现差异。  那么,细胞之间的哪些差异有生物学意义,哪些差异来自于技术偏好呢?要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢?这

细胞凋亡的细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

巨噬细胞和粒细胞区别

中性粒细胞和巨噬细胞之间的主要区别在于中性粒细胞不是抗原呈递细胞,而巨噬细胞是抗原呈递细胞。 中性粒细胞和巨噬细胞是属于先天免疫系统的白细胞,它们是抵抗病原体的主要初始防御者。 这些专门的细胞可以在称为“diapedesis(渗出)”的过程中通过血管的小孔挤压,终使它们能够轻松到达感染区域。 通常,

巨噬细胞和单核白细胞

·         Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab)Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from antico

白细胞是免疫细胞吗?

所有的白细胞均参与免疫应答,它们包括:T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、粒细胞、肥大细胞,以及它们的前体细胞(例如胸腺细胞)、祖细胞、干细胞等,是免疫系统的功能单元。根据功能,免疫细胞可分为非特异性免疫细胞、特异性免疫细胞和抗原呈递细胞。非特异性免疫细胞包括巨噬细胞、中性

组织细胞包括什么细胞?

  构成机体的细胞均可以称之为组织细胞。如表皮细胞、肝脏细胞。朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)是原因未明的单克隆CD1a组织细胞增生性疾病。临床特点是:发热,皮疹,齿龈肿胀,咳嗽,喘憋,肝脾淋巴结肿大,或伴有贫血,有的病变侵犯到中枢神经系统,胃肠道系统引起各种症状。

细胞计数实验——细胞计数实验

实验方法原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞牛长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不易

关于宿主细胞的细胞介绍

  受体细胞也叫宿主细胞。受体细胞有原核受体细胞(最主要是大肠杆菌)、真核受体细胞(最主要是酵母菌)、动物细胞和昆虫细胞(其实也是真核受体细胞)。原核受体细胞中,最常用的宿主细胞是大肠杆菌。

细胞成团和细胞出芽实验

近几年来,3D(three dimensional)细胞培养系统开始成为生物学研究新的研究方法。使用3D系统培养系统能更好的模拟生物体内的真实生理环境,而2D(传统的贴壁培养)细胞培养系统不能有效的模拟细胞在生物体内的生理环境。3D细胞技术有很多种方法,使用多细胞形成的细胞团是其中主要的研究应用之一

细胞计数板怎么数细胞

实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流

细胞毒性T细胞简介

  细胞毒性T淋巴细胞(CTL),是白细胞的亚部,为一种特异T细胞,专门分泌各种细胞因子参与免疫作用。对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用,与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。  细胞毒性T淋巴细胞又称杀伤性T淋巴细胞,是机体抗肿瘤机制的重要环节,也是肿瘤免疫过继疗法主要效应细

细胞周期的细胞分类

在体内根据细胞的分裂能力可把它们分为三类:①周期性细胞,如造血干细胞,表皮与胃肠粘膜上皮的干细胞。这类细胞始终保持活跃的分裂能力,连续进入细胞周期循环;②终端分化细胞,如哺乳动物成熟的红细胞、神经细胞等高度分化的细胞,它们丧失了分裂能力,又称终末细胞(end cell);③暂不增殖细胞群(G0期细胞

免疫细胞抗原提呈细胞

  (一)抗原提呈细胞的概念 抗原提呈细胞(APC)指能够摄取、加工处理抗原,并将抗原信息以和MHC分子结合形式提呈给T细胞的一类细胞。T细胞不能识别游离抗原,只能识别被APC加工提呈并与MHC分子结合的抗原肽。树突细胞和单核-巨噬细胞能够通过MHC Ⅱ分子提呈外源性抗原肽,被称为专职APC,所有有

细胞生长检测——直接计数细胞

1、如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。2、如果靶细胞是悬浮细胞,则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞,活细胞可以排除进入细胞的台盼