国产膜片钳放大器
2020年注定是一个会被很多人牢记的一年,突如其来的新冠病毒在中国成为众人皆知的生物体,随着抗击疫情的中国力在国际社会被广泛认可,也招来了中美对抗的多事之秋,金字塔里的学生和科研人员,发现Matlab被断供、不能用了,一片哗然,声讨美国后,也不禁开始反省我们的国产软件,国产芯片和国产仪器。从飞机到手机各种国产化的产品在公众号,微博和B站上纷纷展现在我们的视野中。一向喜欢凑热闹的我,也忍不住想到了我们的国产膜片钳放大器。 膜片钳可谓是对大多数人非常遥远陌生的一个专业技术词汇,1976年德国科学家Erwin Neher和Bert Sakmann在改进前人工作的基础上,使用尖端光滑的玻璃电极吸紧一小片细胞膜,使此检测区域与玻璃电极形成高阻封接(G欧电阻),与周围形成绝缘,从而得以固定电位, 极大的降低了背景噪声并记录到了皮安级(pA,10-12安培)的单通道电流。从此便开始了电生理膜片钳(Patch-Clamp)的时代,Sakm......阅读全文
膜片钳技术在神经药理方面的应用(1)
1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术(Patch clamp technique),这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多数的离子通道分子活动的技术。1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验方法和电子线路进行了改进,形成了当今广泛应用
膜片钳技术在神经药理方面的应用(2)
二 操作步骤 1. 膜片钳微电极制作 (1) 玻璃毛细管的选择:有二种玻璃类型,一是软质的苏打玻璃,另一是硬质的硼硅酸盐玻璃。软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直,可降低电极的串联电阻,对膜片钳的全细胞记录模式很有利;硬质玻璃的噪声低,在单通道记录时多选用。玻璃毛细管的直径应符合电极支
膜片钳创新药物研究与高通量筛选
在离子通道高通量筛选中主要是进行样品量大、筛选速度占优势、信息量要求不太高的初级筛选。最近几年,分别形成了以膜片钳和荧光探针为基础的两大主流技术市场。将电生理研究信息量大、灵敏度高等特点与自动化、微量化技术相结合,产生了自动化膜片钳等一些新技术。
膜片钳技术中高阻封接什么意思?
电极尖端与细胞膜接触后,电极与其对应的以小片膜之间形成的电阻。电阻越大,漏电流越小,说明封接的越成功。一般到G欧姆(好的到10几G欧姆)就形成高阻封接。然后就可以选择记录模式了(全细胞、内面向外等)。
膜片钳技术在神经药理方面的应用(3)
2. 溶液的组成 (1) 电极液:根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液,Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8),pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时,通过改变保持电位,能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/
膜片钳在通道研究中的重要作用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细
膜片钳在心血管药理研究中的应用
随着膜片钳技术在心血管方面的广泛应用,对血管疾病和药物作用的认识不仅得到了不断更新,而且在其病因学与药理学方面还形成了许多新的观点。正如诺贝尔基金会在颁奖时所说:“Neher和Sadmann的贡献有利于了解不同疾病机理,为研制新的更为特效的药物开辟了道路”。
膜片钳对创新药物研究与高通量筛选
创新药物研究与高通量筛选在离子通道高通量筛选中主要是进行样品量大、筛选速度占优势、信息量要求不太高的初级筛选。最近几年,分别形成了以膜片钳和荧光探针为基础的两大主流技术市场。将电生理研究信息量大、灵敏度高等特点与自动化、微量化技术相结合,产生了自动化膜片钳等一些新技术。
膜片钳的在离子通道技术中的应用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分
膜片钳在通道研究中的重要作用介绍
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分
膜片钳技术在通道研究中的重要作用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细
膜片钳对单细胞形态与功能关系的研究
将膜片钳技术与单细胞逆转录多聚酶链是反应技术结合,在全细胞膜片钳记录下,将单细胞内容物或整个细胞(包括细胞膜)吸入电极中,将细胞内存在的各种mRNA全部快速逆转录成cDNA,再经常规PCR扩增及待检的特异mRNA的检测,借此可对形态相似而电活动不同的结果做出分子水平的解释或为单细胞逆转录多聚酶链式反
膜片钳与药物作用有关的心肌离子通道介绍
心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。
膜片钳对在心血管药理研究中的应用
在心血管药理研究中的应用随着膜片钳技术在心血管方面的广泛应用,对血管疾病和药物作用的认识不仅得到了不断更新,而且在其病因学与药理学方面还形成了许多新的观点。正如诺贝尔基金会在颁奖时所说:“Neher和Sadmann的贡献有利于了解不同疾病机理,为研制新的更为特效的药物开辟了道路”。
膜片钳在在心血管药理研究中的应用
随着膜片钳技术在心血管方面的广泛应用,对血管疾病和药物作用的认识不仅得到了不断更新,而且在其病因学与药理学方面还形成了许多新的观点。正如诺贝尔基金会在颁奖时所说:“Neher和Sadmann的贡献有利于了解不同疾病机理,为研制新的更为特效的药物开辟了道路”。
从PC膜片钳到NMT非损伤微测技术(3)
活体研究智能传感技术的演进(3)现状与未来作者:许越 PC膜片钳与NMT非损伤微测技术虽然几乎诞生在同一历史时期,但是它们的发展和普及过程却大相径庭。1)NMT的中国特色大家知道,各个国家对动物医学研究的投入通常要远远高于对其它研究领域的投入。下图是美国在医疗健康上面的投入是其它领域的5-10倍
从PC膜片钳到NMT非损伤微测技术--(1)
活体研究智能传感技术的演进(1)愿望与挑战作者:许越 “点击查看作者自传”在活体状态下进行研究,是生命科学家追求的最佳方法和始终不渝的愿望。能够检测到活体细胞单离子通道电信号的膜片钳(PC :Patch Clamp)技术,于1990年获得诺贝尔奖之后,迅速传入中国(周专等1990,许越等1993
从PC膜片钳到NMT非损伤微测技术(2)
活体研究智能传感技术的演进(2)时间与空间作者:许越 时间分辨率和空间分辨率,指的是一个检测技术能够在时间和空间上提供的最小分辨单位或数值。列文虎克(Anthony Von Leeuwenhoek)发明的能够看到活细胞的显微镜,就是在人类观察世界的空间分辨率上的一次大的提升。 膜片钳技术之所以能够
膜片钳对单细胞形态与功能关系的研究作用
将膜片钳技术与单细胞逆转录多聚酶链是反应技术结合,在全细胞膜片钳记录下,将单细胞内容物或整个细胞(包括细胞膜)吸入电极中,将细胞内存在的各种mRNA全部快速逆转录成cDNA,再经常规PCR扩增及待检的特异mRNA的检测,借此可对形态相似而电活动不同的结果做出分子水平的解释或为单细胞逆转录多聚酶链式反
全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用
一:全自动膜片钳技术介绍:膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。传统
电生理专题——膜片钳技术基本原理与特点
膜片钳技术本质上也属于电压钳范畴,两者的区别关键在于:①膜电位固定的方法不同;②电位固定的细胞膜面积不同,进而所研究的离子通道数目不同。电压钳技术主要是通过保持细胞跨膜电位不变,并迅速控制其数值,以观察在不同膜电位条件下膜电流情况。因此只能用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道活动。目前
什么是电压钳与膜片钳,有什么区别?
电压钳技术是通过向细胞内注射一定的电流,抵消离子通道开放时所产生的离子流,从而将细胞膜电位固定在某一数值。由于注射电流的大小与离子流的大小相等、方向相反,因此它可以反映离子流的大小和方向。膜片钳技术钳制的是膜片,是指采用尖端经过处理的微电极与细胞膜发生紧密接触,使尖端下的这片细胞膜在电学上与其它
膜片钳对创新药物研究与高通量筛选的应用
在离子通道高通量筛选中主要是进行样品量大、筛选速度占优势、信息量要求不太高的初级筛选。最近几年,分别形成了以膜片钳和荧光探针为基础的两大主流技术市场。将电生理研究信息量大、灵敏度高等特点与自动化、微量化技术相结合,产生了自动化膜片钳等一些新技术。
膜片钳对创新药物研究与高通量筛选的应用
在离子通道高通量筛选中主要是进行样品量大、筛选速度占优势、信息量要求不太高的初级筛选。最近几年,分别形成了以膜片钳和荧光探针为基础的两大主流技术市场。将电生理研究信息量大、灵敏度高等特点与自动化、微量化技术相结合,产生了自动化膜片钳等一些新技术。
膜片钳的在与药物作用有关的心肌离子通道
心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。
膜片钳系统的电学噪声、机械震动、机械漂移的分...(四)
3.2.2 检查所有的机械连接。我们可以抓住探头轻微尝试在所有方向上来回快速移动。如果手指感觉到细微的卡拉声,说明系统某处有松动。另一个测试是轻轻敲打显微镜并观察电极尖端,如果电极过分颤动,表明问题来自固定微操的平台。3.2.3 检查探头和电极夹持器。我们卸下探头,将玻璃电极直接固定在微操上,可检查
非损伤微测技术与膜片钳技术的主要区别
1976年膜片钳技术的诞生是现代生命科学研究史上的重要事件,两位德国科学家因应用膜片钳技术进行离子通道研究所取得的成就而荣获1991年诺贝尔生理学或医学奖。膜片钳技术对离子通道开闭情况的研究,成为连接生物分子和生物功能研究的重要桥梁,催生了大量高水平研究成果。 但随着膜片钳技术的广泛应
膜片钳系统的电学噪声、机械震动、机械漂移的分...(二)
1.3 磁感应噪声及其处理措施 当一个变化的磁通量切割一个环路线圈时,就会发生磁感应,并在线路中产生电流。这最有可能在电源的电磁铁的附近发生,并可以通过其波形来识别,其波形有非正弦的形状,频率是工频(50Hz)的高次谐波。将电源远离敏感电路可以削减这种噪声。如果这不可能,尝试使用双绞线以削减磁通量
膜片钳系统的电学噪声、机械震动、机械漂移的分...(三)
2.4 讨论在做局部屏蔽时,要注意避免出现多点接地。但在实际操作中,常常由于不清楚仪器内部的接地电路而导致多点接地。例如BNC的屏蔽层通常和仪器信号地互通,而不同仪器的信号地可能被连接在分离的电源地上。如果断开BNC屏蔽层或者断开某些电源地线,就可能消除环路。在膜片钳系统中“接地端子”可以分成两种:
膜片钳系统的电学噪声、机械震动、机械漂移的分...(一)
摘 要: 膜片钳单通道记录系统是电生理研究的重要工具,目前已经发展成为复杂的光机电联合应用系统。在应用过程中普遍存在着电学噪声干扰(膜片钳系统各个环节的噪声)、机械干扰(记录电极尖端的震颤或缓慢漂移)。本文详细讨论并分析了这些问题,并给出有效的解决方案,对整个系统进行了优化。关键词: 膜片钳