膜片钳的在离子通道技术中的应用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分泌机制。结合分子克隆和定点突变技术,膜片钳技术可用于离子通道分子结构与生物学功能关系的研究。利用膜片钳技术还可以用于药物在其靶受体上作用位点的分析。如神经元烟碱受体为配体门控性离子通道,膜片钳全细胞记录技术通过记录烟碱诱发电流,可直观地反映出神经元烟碱受体活动的全过程,包括受体与其激动剂和拮抗剂的亲和力,离子通道开放、关闭的动力学特征及受体的失敏等活动。使用膜片钳全细胞记录技术观察拮抗剂对烟碱受体激动剂量效曲线的影响,来确定其作用的动力学特征。然后根据分析拮抗剂对受体失敏的影响,拮抗剂的作用是否有电压依赖性、使用依赖性等特点,可从功能......阅读全文
膜片钳的在离子通道技术中的应用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分
膜片钳的在与药物作用有关的心肌离子通道
心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。
膜片钳技术在通道研究中的重要作用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细
膜片钳技术在神经药理方面的应用(1)
1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术(Patch clamp technique),这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多数的离子通道分子活动的技术。1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验方法和电子线路进行了改进,形成了当今广泛应用
膜片钳技术在神经药理方面的应用(3)
2. 溶液的组成 (1) 电极液:根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液,Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8),pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时,通过改变保持电位,能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/
膜片钳技术在神经药理方面的应用(2)
二 操作步骤 1. 膜片钳微电极制作 (1) 玻璃毛细管的选择:有二种玻璃类型,一是软质的苏打玻璃,另一是硬质的硼硅酸盐玻璃。软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直,可降低电极的串联电阻,对膜片钳的全细胞记录模式很有利;硬质玻璃的噪声低,在单通道记录时多选用。玻璃毛细管的直径应符合电极支
全自动膜片钳技术及其在药物筛选中的应用
一:全自动膜片钳技术介绍:膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。传统
膜片钳技术的应用进展(二)
2.3 实验的一般操作步骤 ①拉制微电极和充灌微电极;②将预先处理的实验标本置于显微镜载物台上的灌流槽内;③于显微镜低倍镜下,用微操纵器将电极移动到浴液上方,换用高倍镜按一 定标准选择合适的细胞,然后接近靶细胞或组织,完成电极与标本的封接;④给予钳位电压或电流等指令条件并分别记
关于膜片钳技术的应用介绍
(1)与药物作用有关的心肌离子通道 心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来,国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。 (2)对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究 通过对各种生理
膜片钳技术的应用进展(一)
【摘要】 膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”,应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在,并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】 膜片钳技术 离子通道 进展 1976年由德国马普生物物理化学研究所的Neher和Sakamann首次报道了应用膜片钳技术在蛙胸
膜片钳技术的应用进展(三)
4 膜片钳技术的主要用途 膜片钳技术广泛用于研究细胞离子通道,已经成为研究细胞水平生理功能的常用技术。归纳其主要用途包括[4] :1)可分辨单通道电流,直接观察通道开启和关 闭的全过程。通过测得的单通道特征参数可鉴别通道类型,同时可验证和研究通道的开关动力学模型。2)单通道记录可以解释
电生理专题——膜片钳技术的应用
膜片钳技术发展至今,已经成为现代细胞电生理的常规方法,它不仅可以作为基础生物医学研究的工具,而且直接或间接为临床医学研究服务。 目前膜片钳技术广泛应用于神经(脑)科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。 随着全自动膜片钳技术(Au
膜片钳技术的应用学科相关介绍
膜片钳技术发展至今,已经成为现代细胞电生理的常规方法,它不仅可以作为基础生物医学研究的工具,而且直接或间接为临床医学研究服务, 目前膜片钳技术广泛应用于神经(脑)科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。 随着全自动膜片钳技术(Au
膜片钳与药物作用有关的心肌离子通道介绍
心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。
膜片钳在通道研究中的重要作用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细
水质分析技术在实际中的应用
水资源是人类赖以生存的宝贵财富,而随着世界人口的增长及工农业生产的发展,水污染问题逐渐加剧。因此,水质检测是关乎民生的大事。小编精选了一些水质分析的技术实例,如分光光度法、共振散射光谱法、气相色谱-质谱法、流动注射化学发光法和全自动红外测油仪等方法,在饮用水、废水、地下水和地表水等水源分析检测
质谱技术在临床中的应用
来自SDi的最新报告指出,未来五年临床质谱市场将以7.6%的速度增长。根据美国临床实验室协会的数据,美国临床实验室每年对血液、尿液和其他患者样品检测次数超过70亿次。免疫分析一直是临床诊断中应用最广泛的技术,但出于对检测结果精准性等需求,越来越多的实验室开始将质谱作为首选的检测工具。另外,相比于测序
AFM在薄膜技术中的应用
在薄膜技术中的应用随着膜技术的蓬勃发展,人们力图通过控制膜的表面形态结构,改进制膜的方法,进而提高膜的性能。在过去的多年的研究中,关于膜的制备、形态与性能之间的关系已经做了多方面的尝试和研究,而且这些尝试和研究对于膜的形成与透过机理都十分有价值,然而由于过程相当复杂,对其中的理解仍然是不够充分的。1
电泳技术在医学中的应用
目前,该技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、有机物、无机离子等的分离和鉴定,甚至病毒与细胞的研究。特别是电泳所用支持介质由流动相改为固相支持物后,各种各样的电泳分析装置不断推出以适应不同教学、临床和科研工作的需要。当今,电泳技术与质谱技术联用在后基因组学研究中,正发挥者着巨大的作用,为临床检
渗透技术在无损检测中的应用
渗透检测(PT)是对视觉检测的一种补强,主要适用于检测无孔金属材料的表面缺陷。关于这种技术的一个早期说法是该技术在1800年就结合重油、煤油石灰等被用于检测机车部件上的裂纹。在20世纪40年代,荧光染料开始被加入到渗透检测技术中,在紫外光的照射下能够大大提高金属制件表面缺陷的能见度。 渗
质谱技术在临床中的应用
来自SDi的最新报告指出,未来五年临床质谱市场将以7.6%的速度增长。根据美国临床实验室协会的数据,美国临床实验室每年对血液、尿液和其他患者样品检测次数超过70亿次。免疫分析一直是临床诊断中应用最广泛的技术,但出于对检测结果精准性等需求,越来越多的实验室开始将质谱作为首选的检测工具。另外,相比于测序
生物技术在漂白中的应用
生物酶促漂白技术,主要是利用半纤维素酶部分酶解纤维细胞中的半纤维素,使木素更容易与漂剂反应而溶出,从而提高漂后浆的白度。半纤维素酶有助于硫酸盐纸浆的漂白技术,可以实现经济的生物技术应用于纸浆的漂白,其基本原理是根据半纤维素酶(木聚糖酶和甘露糖酶)能引起纸浆中碳水化合物结构的改性而提高脱木素作用。这种
膜片钳的应用举例
(1).膜片钳技术在通道研究中的重要作用 应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流
膜片钳在通道研究中的重要作用介绍
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型,并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率,还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分
膜片钳在心血管药理研究中的应用
随着膜片钳技术在心血管方面的广泛应用,对血管疾病和药物作用的认识不仅得到了不断更新,而且在其病因学与药理学方面还形成了许多新的观点。正如诺贝尔基金会在颁奖时所说:“Neher和Sadmann的贡献有利于了解不同疾病机理,为研制新的更为特效的药物开辟了道路”。
离心技术种类及在检验中的应用
离心技术在生化检验中的应用主要有两方面:①对悬浮液中颗粒的分离,如从全血中分离血清、血浆等;②分离两种密度不同液相,如从有机溶剂和水的混合物中分离出有机相等。1.普通离心法可用来分离细胞、细胞膜或细胞碎片。2.差速离心法(差级离心法)其原理是交替使用低速或高速离心,也可采用逐渐增加离心速度的办法,通
光散射技术及其在GPC中的应用
光散射发展史 当一束光通过一不均匀介质时,不仅可以在沿着入射光方向观察到透射光强,在入射方向以外的各个方向也能够观察到光强,这种光我们称之为散射光。1802年, Ritcher观察到了光照射金溶胶所形成的的散射光;1869年,丁达尔(Tyndall)发现当一束光通过透明的胶体是,从侧面可看到一条光柱
电泳技术在医学中的应用(二)
6. 高效毛细管电泳及高效毛细管电泳2质谱联用:高效毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为推动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。利用毛细管代替平板凝胶,分离效率得以提高。高效毛细管电泳的应用范围从小分子、无机离子到生物大分子,甚至整个细