挑战生物学以往观点哺乳动物细胞可将RNA序列写入DNA
美国费城托马斯杰斐逊大学的研究人员首次发现,哺乳动物细胞可以将RNA序列转换回DNA,这在病毒中比真核细胞更常见。这一发现可能会挑战生物学长期以来的观点,并可能对生物学的众多领域产生广泛影响。相关研究发表在6月11日的《科学进展》杂志上。 细胞含有一种机制,它可以将DNA复制成一组新的DNA,然后进入一个新形成的细胞。完成该机制的被称为聚合酶的机器也可以构建RNA信息,这些信息就像从食谱中心——DNA储存库复制的笔记,这样它们就可以被更有效地读入蛋白质中。但此前普遍认为,聚合酶只能从DNA单向复制到DNA或RNA。这可以防止RNA信息被重写回基因组DNA的“主配方书”中。 研究团队首先研究了一种被称为聚合酶θ的聚合酶。在哺乳动物细胞中的14种DNA聚合酶中,只有3种负责复制整个基因组以准备细胞分裂的大部分工作。剩下的11种主要参与DNA链断裂或错误的检测和修复。聚合酶θ可以修复DNA,但很容易出错,会造成许多错误或突变。......阅读全文
RNA和DNA病毒的共同点
RNA和DNA病毒都能引发肝炎,丙肝由RNA病毒引起,而乙肝由DNA病毒引起。丙肝病毒疫苗的研制“瓶颈”出现在RNA病毒的形态上面。DNA形态通常比较稳定,因此,DNA病毒的复制,都与“原版”DNA高度一致,因此可以研制出许多用于预防乙肝病毒疫苗。与此相反,RNA病毒在复制过程中会发生错误的“拼写检
提取RNA时如何去除DNA的污染
提取RNA时如何去除DNA的污染的方法:注意实验室的标准化问题,注意污染的存在,同时严格按照说明书上的操作应该没有问题。发现DNA污染,用DNAse I 消化1小时,37度离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于
核酸提取——RNA提取与DNA的提取
核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓
教科书改写!人类细胞可将RNA写入DNA!
现代生命科学的基本定律“中心法则”,指明了遗传信息的流动方向,除了极少数的逆转录病毒外,遗传信息从 DNA 到 RNA ,RNA 再到蛋白质。负责这种遗传信息单向流动的 DNA 聚合酶无法将 RNA 逆向写回 DNA ,然而,一项最新研究首次发现了人类 DNA 聚合酶将 RNA 逆向写回 DNA
DNA和RNA的主要碱基区别
DNA和RNA的主要碱基略有不同,其重要区别是:胸腺嘧啶是DNA的主要嘧啶碱,在RNA中极少见;
DNA和RNA的主要碱基区别
DNA和RNA的主要碱基略有不同,其重要区别是:胸腺嘧啶是DNA的主要嘧啶碱,在RNA中极少见;
核酸提取——RNA提取与DNA的提取
核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DNA)。核酸的分子量极大,从数万到亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中 的溶解度有显著区别,在一定浓
提取RNA中老混有DNA怎样去除
先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验.在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了.还有最好在抽提之前要把DNA样品
如何检测、评价提取的DNA、RNA质量
4.如何检测、评价提取的DNA、RNA质量,计算提取的DNA、RNA浓度:一般通过OD260/OD280来判断他们的含量,纯DNA的比值一般在1.8,大于1.8,小于2时可能有RNA污染,在1.9到2.0时RNA纯度高,小于1.8时可能有蛋白质污染,大于2.0时可能在提取过程中的化学物质残留。提取原
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质
TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA
提取RNA的时候总是有DNA污染
不管RNA还是RT之后做pcr,RNA都要变成cDNA之后才能做pcr。确定用DNase I处理过,电泳没有DNA条带了。一般RT用oligo dt或者随机引物做扩增。也有用你想的目的片段的扩增引物做RT的。你看看你现在用的是什么引物,换oligo试试,不行换成你的基因特异性引物做了RT之后,再来p
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质
TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA
RNA提取过程中如何去除DNA污染
方法:1、使用DNA酶DNAse I 消化1小时,恒温37度。2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。3、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。
DNA与RNA能协同互补调控基因表达
比利时布鲁塞尔自由大学主导的一项研究揭示,DNA和RNA的表观遗传学协同调控比过去想象的更加紧密。这项发表在最新一期《细胞》杂志上的研究,结合了DNA和RNA研究结果,指出这两种调控方式共同作用,形成一个互补系统:DNA表观遗传学决定了哪些基因可以被激活,而RNA表观遗传学则动态调整这些基因的表达水
DNA芯片技术和RNA测序有啥不同?
日本推理小说家东野圭吾的作品《白金数据》中描述了这样一个未来世界:日本政府秘密建立名为“白金数据”的数据库。该库搜集了全国人民的DNA数据,通过对犯罪分子留在现场的毛发、体液等证物进行比对,警方可以高效、快速、准确锁定真凶。借助“白金数据”的帮助,一个检举率100%、冤案率0%的理想法制社会构建完
高通量RNA干扰技术筛选DNA损伤实验
目前,将RNAi库和基于细胞水平的高通量分析技术相结合对于我们鉴定药物敏感性和抵抗性的新机制有非常广阔的前景。举例来说,已有研究者对全基因组进行RNAi筛选找出了导致非小细胞肺癌对紫杉醇敏感的基因。这项研究也证实了RNAi技术在发现影响癌症细胞细胞有丝分裂的靶点上具有很大潜力。 Molecular
RNA-和-DNA-提取的纯度低的原因
如果提取的 DNA 被蛋白质污染(低 260/280),那么您可能开始时样品过多,而蛋白质没有完全去除或溶解。如果 DNA 的 260/230 比率不佳,则问题通常是结合或洗涤缓冲液中的盐分。确保使用最高质量的乙醇来制备洗涤缓冲液,如果问题仍然存在,请再次洗涤色谱柱。与其他样品相比,一些样品含有更多
荧光定量pcr仪是怎样测试dna,rna的
荧光定量pcr仪是怎样测试dna,rna的普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果,还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病,品种分子标记筛选,甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。但是,某些需要定量的实验就必须用
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质3
DNA污染:A. 样品匀浆时加的试剂量太少。B.样品中含有有机溶剂(如乙醇,DMSO等),强缓冲液或碱性溶液。蛋白聚糖和多糖污染:沉淀RNA的过程中作以下改进可去除这些污染,步骤7中,每使用1ml TRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2MNaCl)混
从总-RNA-中除去基因组-DNA-实验
试剂、试剂盒 变性(甲醛)琼脂糖凝胶琼脂糖蒸馏水甲醛蒸馏水乙醇 甲醛MOPS 缓冲液乙二胺四乙酸MOPS乙酸钠酚 氯仿(3:1) 溶液氯仿液体酚Tris-HCl电泳缓冲液仪器、耗材 离心机和转头离心管配胶板微波炉实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂变性(甲醛)琼脂糖凝胶(配制过程见第 18步)
借助于噬菌体ELISA的DNA/RNA...
实验概要本实验从含有源自文库筛选的噬菌体克隆制备了噬菌体上清液,通过噬菌体ELISA,评估筛选出DNA/RNA结合区域的特异性序列的结合活性。实验步骤1. 噬菌体的制备 1) 挑取含有源自文库筛选的噬菌体克隆的单菌落。用灭菌牙签挑取单菌落接种于灭菌圆底培养板的微孔内,其中加有150ul含15
DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验
实验材料 样品试剂、试剂盒 双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪器、耗材 加湿盒热循环仪实验步骤 1. 将载有固定样品的载玻片置105℃加热块上5~120 s。 2. 载玻片放入含0.3%H2O2中,于37℃或室温温育过夜,以灭活内源性过氧化物酶活性,然后以
从总-RNA-中除去基因组-DNA-实验
为了进行 FDD 基因表达的分析,以及使用任何其他基于 RNA 的基因表达技术,在反转录合成单链 cDNA 和后续的 PCR 操作之前,必须除掉污染的基因组 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒变性(甲醛)琼脂糖凝胶琼脂糖蒸馏水甲醛蒸馏水乙醇甲醛MOPS
霍尼韦尔推出Burdick--Jackson-DNA/RNA高纯试剂
中国北京2011年 4月27日讯 ― 在第九届中国国际科学仪器及实验室装备展览会上,霍尼韦尔特殊材料集团举办了Burdick & Jackson®高纯溶剂技术交流会,并和业务伙伴合作向中国客户介绍其B&J BioSynTM DNA/RNA合成试剂。B&J BioSynTM DNA/RNA
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质(一)
TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质.TRIzol使样品匀浆化,细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质2
5. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。6. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1mlTRIzol加入0
福尔马林:保存标本-帮助DNA和RNA的提取
在历史上人们使用了各种固定液(各种浓度的乙醇和福尔马林,目前公认的固定液是10%的中性福尔马林溶液)。马尔福林基本的固定能力是通过蛋白质交联,从而使固定物质更加牢固。福尔马林还可以作为适合基因组研究的培养基,比如DNA和RNA的提取研究。 DNA和RNA的恢复,对于许多科学领域和医学专业都非常
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质(二)
DNA的分离准备试剂:乙醇0.1M柠檬酸钠(含10%乙醇)、 75%乙醇、8mM NaOH操作步骤:1. 样品加氯仿分层后,移去上层水相,用乙醇沉淀中间层和有机相中的DNA。每使用1mlTRIzol加0.3ml无水乙醇混匀,室温放置3分钟,2~8℃不超过2000×g离心5分钟。2. 移去上清,(如需
TRIzol法同时提取RNA、DNA、蛋白质4
注意事项:1. DNA在中间层和有机相中时可在2~8℃保存过夜。2.DNA沉淀在75%乙醇中2~8℃可保存几个月。3.DNA在8mM NaOH溶液中4℃可放置过夜,如长期保存需用HEPES调节pH至7~8并且加EDTA至1mM,可置于4℃或-20℃长期保存。常见问题分析:得率低:A.样品匀浆和裂解的
如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法?
从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了,提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析,可供选择的方法非常多,乱花渐欲迷人眼,如何选择最适合的方法,成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面,层层剥茧,分析最佳的实验方法。 1、全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝