WesternBlot化学发光(ECL)为什么会“淬灭”

做Western Blot 化学发光(ECL)实验经常会有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。这种情况发生的原因是什么?要解释这种情况发生的原因,必须先了解ECL化学发光的原理。一般的发光试剂含鲁米诺和H2O2、发光增强剂等物质。发光试剂中的鲁米诺被HRP和H2O2氧化,产生荧光,这个过程被发光增强剂加强,增强剂在HRP-鲁米诺-H2O2体系中扮演着核心角色,决定着ECL化学发光的发展。理想的发光增强剂是:1.发光灵敏,目前一般的发光增强剂都可以将发光灵敏度提高1000倍至100000倍以上,可以检测pmol甚至fmol级别的HRP,发光的灵敏度实际上已不是问题。2.发光稳定,这是目前研究的重点之一,发光不稳定的增强剂,容易在一些情况下发生“淬灭”,即快速消耗发光试剂,在几秒钟内发强光,又在几秒钟内迅速消逝,不容易被检测的现象。3.本......阅读全文

荧光淬灭原理

荧光淬灭原理如下:①因荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量;②荧光物质的分子与熄灭剂分子作用生成了本身不发光的的配位化合物;③溶解氧的存在,使得荧光物质氧化,或是由于氧分子的顺磁性,促进了体系间跨越,使得激发单重态的荧光分子转变至三重态;④当荧光物质浓度过大时,会产生自淬灭现象.又称荧光熄灭或萃

荧光释放淬灭原理

常见类型有:6-羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、CY3、6-羧基四甲基若丹明、ROX、LC RED640等。原理:当荧光物质浓度过大,荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量,二者相互作用生成了本身不发光的的配位化合物。而且溶解氧

什么叫浓度淬灭

淬灭 淬灭的英文词是quenching,源于金属学中的淬火,原意是指快速冷却,用来防止低温相变、提高金属硬度等,还可以用于制备金属玻璃。在这里,淬灭表明在荧光过程中,光子产生的数量在很短的时间内衰减或者消失。

淬灭和猝灭有什么区别

因为有的化学反应某一反应物是过量的,当反应进行到一定程度,目标产物已经获得,该过量反应物继续存在的话会进一步反应生成不希望的产物,所以需要淬灭。淬灭的原理是用另一种更易与该过量化合物反应的化合物与之反应,从而将其从体系中除去。猝灭的意思是反应不会继续发生了或者反应速率低。因为底物浓度下降,反应速率降

淬灭是什么意思

分为荧光淬灭和化学淬灭荧光淬灭是指指荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象.如,卤素离子、重金属离子、氧分子以及硝基化合物、重氮化合物、羧基和羰基化合物均为常见的荧光熄灭剂.化学淬灭就是用一些处理方法将化学物质消耗掉.

双氧水怎么淬灭

1.源于金属学中的淬火  原意是指快速冷却,用来防止低温相变、提高金属硬度等,还可以用于制备金属玻璃。在这里,淬灭表明在荧光过程中,光子产生的数量在很短的时间内衰减或者消失。编辑本段2.在生理生态学中  淬灭可分为化学淬灭和颜色淬灭(光淬灭)。化学淬灭是指溶液中的某些化学物质影响闪烁液把放射性粒子转

聚集诱导荧光淬灭原理

当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光。聚集诱导荧光淬灭现象的原理是,当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光;但当分子浓度增加时,它们可能会发生聚集或堆积,这导致分子间的距离变小并且彼此之间受到相互作用力的影响。聚集诱导荧光淬灭(Aggregation-induced

聚集诱导荧光淬灭原理

当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光。聚集诱导荧光淬灭现象的原理是,当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光;但当分子浓度增加时,它们可能会发生聚集或堆积,这导致分子间的距离变小并且彼此之间受到相互作用力的影响。聚集诱导荧光淬灭(Aggregation-induced

聚集诱导荧光淬灭原理

当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光。聚集诱导荧光淬灭现象的原理是,当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光;但当分子浓度增加时,它们可能会发生聚集或堆积,这导致分子间的距离变小并且彼此之间受到相互作用力的影响。聚集诱导荧光淬灭(Aggregation-induced

聚集诱导荧光淬灭原理

当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光。聚集诱导荧光淬灭现象的原理是,当分子在低浓度状态下时,它们之间相互独立并能够发射荧光;但当分子浓度增加时,它们可能会发生聚集或堆积,这导致分子间的距离变小并且彼此之间受到相互作用力的影响。聚集诱导荧光淬灭(Aggregation-induced

荧光淬灭是什么什么原理?

荧光猝灭是荧光物质分子与溶剂分子之间发生猝灭,荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧

荧光基团淬灭基团的类型

常见类型有:6-羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、CY3、6-羧基四甲基若丹明、ROX、LC RED640等。原理:当荧光物质浓度过大,荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量,二者相互作用生成了本身不发光的的配位化合物。而且溶解氧

荧光淬灭是什么什么原理?

荧光猝灭是荧光物质分子与溶剂分子之间发生猝灭,荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧

荧光淬灭是什么什么原理?

荧光猝灭是荧光物质分子与溶剂分子之间发生猝灭,荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧

引物中淬灭基因的工作原理

荧光探针与荧光引物要提到荧光探针或者荧光引物,有一个基础概念需要首先明确,那就是荧光共振能量转移(fluorescenceresonance energy transfer, FRET):一对合适的荧光物质可以构成一个能量供体(donor) 和能量受体 (acceptor) 对, 其中供体的发射光谱

引物中淬灭基因的工作原理

荧光探针与荧光引物要提到荧光探针或者荧光引物,有一个基础概念需要首先明确,那就是荧光共振能量转移(fluorescenceresonance energy transfer, FRET):一对合适的荧光物质可以构成一个能量供体(donor) 和能量受体 (acceptor) 对, 其中供体的发射光谱

概述液体闪烁计数中的淬灭作用

  放射能量在测量瓶内的传递和转换过程越顺利,测量效率越高。但事实上,影响能量传递过程顺序进行的因素很多,它的每一环节都存在着对能量的争夺过程,使得放射能减少,甚至发生能量传递的中断,导致测量效率下降,这种现象称为液体闪烁计数的淬灭。造成淬灭的因素很多,按淬灭性质归纳起来,有下列三种类型。  ⑴化学

氢化钠的制备和淬灭方法

制备在高温下氢气直接和金属钠反应虽可制取氢化钠,但在工业上是用像煤油那样的矿物油,添加像蒽那样的分散剂,将金属钠悬浮于其中,和高压氢气反应制成氢化钠。生成物用己烷洗涤,在氮气流中干燥后,密封于惰性气体中贮存,或就在石蜡油中原封不动地进行处理。淬灭方法氢化钠一般为60%(油中保存),需要除油的话Che

什么是荧光寿命?什么是荧光的淬灭

荧光寿命是由电子在与基态自旋多重度相同的稳定激发态的寿命决定的。有很多机理可以改变这个寿命---系统间穿跃(intersystem crossing), 淬灭(quench),热驰豫(thermal relaxation), 等。

常用有机化合物的淬灭

  碱金属氢化物,氨化物(NaH,NaNH2,CaH2)  氢化钠一般为60%(油中保存),需要除油的话可以用正己烷洗涤,然后倾倒出正己烷(一定要避免倒干)。一般情况下不用清洗太多次处理,除非油影响反应(比如体系太粘稠,有油再加上有气泡产生的话,容易冲料。后处理是如果量不大的话,可直接用水直接淬灭,

生物(植物生理)-什么是非光化学淬灭

由热耗散引起的荧光淬灭称之为非光化学淬灭(non-photochemical quenching,qN或NPQ),它是植物或藻类在光照过强时用来保护自己而应用的一种机制,反映了植物耗散过剩光能为热的能力,也就是光保护能力.当叶绿素分子吸收光以后,它会由基态变为第一重激发态.这个激发态的能量有三个去向

Western-Blot-化学发光(ECL)为什么会“淬灭”

做Western Blot 化学发光(ECL)实验经常会有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。这种情况发生的原因是什么?要解释这种情况发生的原因,必须先了解ECL化学发光的原理。一般的发光试剂含鲁米诺和H

Western-Blot-化学发光(ECL)为什么会“淬灭”

做Western Blot 化学发光(ECL)实验经常会有“淬灭”的情况发生,经常有朋友反映,加发光试剂后立刻可以看到很明显的亮光,可亮光很快就消逝了,压完片后,条带却很弱,甚至什么也没有。这种情况发生的原因是什么?要解释这种情况发生的原因,必须先了解ECL化学发光的原理。一般的发光试剂含鲁米诺和H

DSF群体淬灭及调控机制研究获新进展

  近日,华南农业大学群体微生物研究中心教授张炼辉团队在DSF(diffusible signal factor)群体淬灭及调控机制方面取得新进展。他们报道了一个关键的调控因子RdmA及其调控的代谢基因簇dmgA-H在DSF群体淬灭过程中的重要作用。相关研究发表于mBio。博士后研究员王惠杉为该论文

怎么理解当荧光物质浓度过大时,会产生自淬灭现象

浓度较高时,荧光分子间的距离变小,一些分子间作用力强的化合物甚至发生二聚或多聚。在这种情况下,激发态分子很容易将它的能量交给临邻近的分子,造成能量耗散最后变成分子的动能,也就是热。

24孔板一个孔加多少抗荧光淬灭剂

24孔板一个孔加1ml抗荧光淬灭剂。因为24孔板一个孔底面积是2cm,通用容积是1ml,“在丁香园论坛中可查询到”实验员在日常实验中使用的24孔板一个孔加入的液量为1ml,所以24孔板一个孔加1ml抗荧光淬灭剂。孔板是测量流量的差压发生装置,配合各种差压计或差压变送器可测量管道中各种流体的流量。

探针分子上连有什么样的基团可以起到淬灭的作用

是RNA探针.TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端.PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧

免疫荧光必备ProLong-Gold--SlowFade-Gold抗淬灭效果比照明细

如果荧光染色的目标分子丰度比较低或者样本在强激发光下长时间放置,很容易出现明显的光漂白作用,即荧光淬灭作用。Life Technologies公司专门开发了 ProLong 和 SlowFade 两个系列抵抗荧光信号淬灭的试剂。其主要原理是可以有效避免荧光染色后的固定细胞或组织等样品不被氧化,从而防

淬冷膨胀仪介绍

一、概述材料相变分析仪采用膨胀法是用于测定金属材料、陶瓷、耐火材料以及其它固体材料,特别是刚玉、耐火材料、精铸用型壳及型芯材料的热膨胀系数,临界温度以及相变分析。为工厂、科研院校检测金属材料、陶瓷、釉料及无机材料制品的性能及科研教学提供必备的测试手段。 二、技术参数1、使用炉温:1400℃,冷却曲线

淬冷膨胀仪器操作

仪器操作1、 仪器上电在仪器外部各线缆接好确认无误后,合上电源开关总闸,旋动仪器上的“电源开关”,此时仪器上电源指示灯点亮(红色指示灯),各仪表上电自检。仪表自检完成后温度控制表PV区会显示室温,SV区会显示设定值;而位移表PV区则会显示当前位移量,当试样架上没有放试样时,PV区可能会显示跳动的“O