液相色谱进行制备有什么优点
以液相色谱进行制备时,分离条件温和,分离检测中 不会导致试样被破坏,且易于回收原物。液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相(或在惰性载体表面涂上一层液膜)、离子交换树脂或多孔性凝胶;流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子(溶质)与溶剂(即流动相或洗脱液)以及固定相分子间的作用,作用力的大小,决定色谱过程的保留行为。根据分离机制不同,液相色谱可分为:液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。......阅读全文
高效液相色谱定性方法
与气相色谱相比,高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此,在高效液相色谱分析过程中,对定性分析方法提出了更高的要求。 (1)利用检测器的选择性进
怎样修理液相色谱柱子
液相色谱柱是液相色谱仪分离系统的“核心”。对于我们需要检测的样品物质有着不可忽视的作用。 我们在用高效液相色谱法对样品进行分析的时候,样品一般都会含有很多的各种杂质。其中样品杂质性能较弱的会快速的从色谱柱里面冲洗出来,对我们分析的结果影响比较小。但是中等的杂质虽然也会被冲洗出来,但是会有一定的干扰了
气液相色谱的原理
高效液相色谱法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气相色谱在基本理论
气相与液相色谱区别
气相与液相色谱有什么区别流动相:gc为气体hplc为液体柱子:气相柱效高液相柱效较低检测器不一样气相是柱子多流动相少;液相是流动相种类多柱子少气相主要分析低沸点化合物液相分析高沸点化合物一般来说气相检测破坏样品液相检测很少破坏样品样品在气相中不纯在二次分配样品在液相中分别在流动相固定相中存在二次分配
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用
液相色谱柱的使用
色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。1、样品的前处理a、最好
如何安装液相色谱柱
对,一般是这个样子安装的。不过平放也可以。出口高的意思是这样:液相仪器特别害怕气泡,气泡进入仪器之后,可能会堵住柱子。那么气泡也是比较轻的,一般来说会往上浮。所以色谱柱的出口在高处。一旦气泡进入色谱柱,还有可能被流动相推出来。不过现在的低压四元泵都带有在线脱气的装置,所以色谱柱平放也没什么关系。
LUMTECH液相色谱维护技巧
一、溶剂输送系统的维护 1.所有的流动相(水相,有机相,盐溶液等),必须用0.45um的滤膜过滤,否则可能导致单向阀堵塞和泵头活塞杆及密封装置磨损; 2.使用缓冲液和盐溶液时,使用10%异丙醇溶液,在线冲洗柱塞,分析结束后要用水相冲洗脱气机相应的管路,防止结晶。 3.仪器不使用时,需将溶剂滤头从
液相色谱柱使用误区
色谱柱在色谱仪分析系统中起着分离作用,是色谱分析的核心部件。正确使用和维护色谱柱尤为重要,使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。以下从几个方面简答介绍液相色谱柱在使用过程中应当着重注意的问题。一、避免压力和温度的急剧变化 温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;
液相色谱基线漂移
为何会基线漂移 1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器) 2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移) 3、流通池被污染或有气体。 4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破
反相高效液相色谱5
方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈(HPLC级)2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱( SEC),分子筛色谱,凝胶过滤等,生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法,填料具有一定范围的孔尺寸,大分子进不去而先流出色谱柱,小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶,只能在低压下作慢速分
多维液相色谱的优势
一、操作简单一步上样,有多功能处理模式可供选择,采用独特专利处理技术,系统自动化多模式前处理,实现目标物在线去杂质、净化、富集、检测;二、多维色谱操作模式,拥有独家阀控制专利技术,实现全自动多目标物在线分析检测;三、超高灵敏度能力,通过独特的富集技术,分子识别定量检测专利技术可让灵敏度提高20-10
液相色谱柱使用问题
在液相色谱分析过程中,我们经常遇到的问题主要有二种,一种与液相色谱仪器本身因素有关,如液相色谱的阀门、混合器、检测器的光源以及其它的一些硬件设备。出现这类问题后,如果能找出问题根源,解决起来一般很简单,而且这类问题可以通过对仪器的精心维护来避免;而另一类问题则是分析方法本身造成的问题,如出现色谱峰形
液相色谱负峰问题
如果用紫外检测器,负峰表明出峰的地方吸收值低于流动相,所以考虑两个方面:一是流动相吸收值大,很可能被污染了,二是质量不好的溶剂,尤其是甲醇,产生这种问题。如果做正相,要充分考虑流动相溶剂的截止波长。
液相色谱要操作要点
高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获
液相色谱柱怎么换
先用95%乙腈+5%水冲洗旧柱子(冲去柱子中残留的缓冲盐和之前难以洗脱的组分),关掉流速,待流速降至0后,把柱子两边的PEAK头拧下来,用配套的塞子将换下的柱子两头堵上,密封保存更换新的色谱柱时,应先将需换上的柱子两边的塞子旋开。确定好柱子标示的方向后,先接柱子入口端,并使柱子出口端略高于入口端,这
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用
怎样修理液相色谱柱子
液相色谱柱是液相色谱仪分离系统的“核心”。对于我们需要检测的样品物质有着不可忽视的作用。 我们在用高效液相色谱法对样品进行分析的时候,样品一般都会含有很多的各种杂质。其中样品杂质性能较弱的会快速的从色谱柱里面冲洗出来,对我们分析的结果影响比较小。但是中等的杂质虽然也会被冲洗出来,但是会有一定的干扰了
高效液相色谱的应用
高效液相色谱仪是用来检测分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物。HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点。因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪
高效液相色谱的优势
高效液相色谱(High Pe-rformance Liauid Chromatography,HPLC)的主要优点是:⑴分辩率高于其它色谱法;⑵速度快,十几分钟到几十分钟可完成;⑶重复性高;⑷高效相色谱柱可反复使用;⑸自动化操作,分析精确度高。根据分离过程中溶质分子与固定相相互作用的差别,高效液相色
高效液相色谱如何工作
一个储液瓶装有溶剂[称为流动相,因为溶剂是流动的]。一个高压泵[溶剂传输系统或称溶剂管理器]用来产生和计量流动相的流速,一般是毫升/分钟。一个进样器[样品管理器或自动进样器]可以将样品导入[注射]连续的流动相,并由流动相携带样品进入高效液相色谱柱。色谱柱装有能获得分离效果的填料。这种填料称为固
液相色谱最全故障总结
高效液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确操作的话,就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 今天泰坦
液相色谱(HPLC)入门(二)
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计
液相色谱柱怎么换
先用95%乙腈+5%水冲洗旧柱子(冲去柱子中残留的缓冲盐和之前难以洗脱的组分),关掉流速,待流速降至0后,把柱子两边的PEAK头拧下来,用配套的塞子将换下的柱子两头堵上,密封保存更换新的色谱柱时,应先将需换上的柱子两边的塞子旋开。确定好柱子标示的方向后,先接柱子入口端,并使柱子出口端略高于入口端,这
高压液相色谱的概念
高压液相色谱又叫高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是利用更细的高效填料进行分离的,具有高柱效、高流速、分离时间短的特点。与经典液相色谱相比,高效液相色谱有很大不同,表1列出了一些不同之处。
高效液相色谱怎么分析
计算含量的方法很多:面积归一化法,外标法,内标法常用的:面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质.杂质(%)=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%(这个数值在你的分析报告中应该可以看到)如果是外标法或者内标法,你需要有对照品.
液相色谱(HPLC)入门(三)
高效液相色谱量级 [分析,制备和工程]我们已经讨论了高效液相色谱如何提供分析数据,用于定性和定量样品中的化合物。然而,高效液相色谱也可以用来纯化和收集所需的每一个化合物,在流通池下游使用组分收集器。这个过程被称为制备液相[如图 K].在制备液相中,科学家可以收集每个流出色谱柱的组分[例如:在本例中,
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用
液相色谱柱使用误区
色谱柱在色谱仪分析系统中起着分离作用,是色谱分析的核心部件。正确使用和维护色谱柱尤为重要,使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。以下从几个方面简答介绍液相色谱柱在使用过程中应当着重注意的问题。 一、避免压力和温度的急剧变化 温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况