高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。......阅读全文
高效液相色谱仪发展历史
1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。
高效液相色谱仪组成结构
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。1.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa流速可调
生物高效液相色谱仪分类
生物高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:生物高效液相化验室色谱仪和生物高效液相工业色谱仪。2、按色谱柱形状可分:生物高效液相填充柱色谱仪和生物高效液相毛细管色谱仪。3、按分离规模可分:小型生物高效液相色谱仪和大型生物高效液相色谱仪。4、按结构可分:台式生物高效液相色谱仪和落地式生物高效液相
高效液相色谱仪操作步骤
高效液相色谱仪操作步骤:1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4).进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5).有一段时间没用,或者换了新的
安捷伦高效液相色谱仪概述
安捷伦高效液相色谱仪是一种用于化学、畜牧、兽医科学、化学工程、食品科学技术领域的分析仪器,于2017年5月18日启用。 技术指标 1、泵流量:设定值误差:-0.1%,稳定性误差:0.0%;2、紫外-可见光检测器性能:基线噪声:1.2×10-5AU,基线漂移:1.3×10-4AU/30min,
如何选择高效液相色谱仪?
高效液相色谱仪可以分为5大部分:高压输液泵单元、进样器单元、分离单元、检测器单元、色谱数据处理单元,下面我们来逐一分析,谈谈高效液相色谱仪的选型细则。 1、高压输液泵单元的配置选型: 高效液相色谱仪的高压输液方式分为等度方式、梯度方式两大类别。 等度方式:在色谱分析过程中,流动相中各个组分的比
如何保养高效液相色谱仪
1.最主要的还是要好好保养柱子,不能有气泡或干掉,每次用后及时清洗干净2.仪器主要是紫外灯,要记得适时点检、更换
高效液相色谱仪选型原则
高效液相色谱仪有液液分配色谱仪、液固吸附色谱仪、离子交换色谱仪、离子对色谱仪、凝胶色谱仪和生物亲和色谱仪等类型,选型原则如下:一、样品相对分子量<2000:1、不溶于水:(1)同系物:液液分配色谱仪。(2)异构体:液固吸附色谱仪。(3)分子大小差异:凝胶色谱仪。2、溶于水:(1)不离解:反相液液分配
高效液相色谱仪色谱特点
高压——压力可达150~300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。 高速——流速为0.1~10.0 mL/min。 高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相
高效液相色谱仪操作步骤
1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3、打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗
大型高效液相色谱仪分类
大型高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:大型高效液相化验室色谱仪和大型高效液相工业色谱仪。2、按功能可分:大型高效液相分析色谱仪和大型高效液相制备色谱仪。3、按色谱柱形状可分:大型高效液相填充柱色谱仪和大型高效液相毛细管色谱仪。4、按分离模型可分:大型高效液相线性色谱仪和大型高效液相非线性
高效液相色谱仪操作步骤
1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。 2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3). 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。 4). 进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。 5). 有一段时间没用,或者换
高效液相色谱仪操作流程
高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱损害色谱柱
高效液相色谱仪操作流程
高效液相色谱仪操作流程如下:工具/原料:电脑、安装调试完的液相色谱系统。1、首先把连接液相系统的电脑打开,接着长按泵系统上面的开关5秒左右。2、接着长按柱温箱系统上的开关5秒左右。3、然后长按检测器系统上的开关5秒左右。4、在自动进样器中放入待测样品,系统可以完成自动进样。5、自动完成分析过程,最后
高效液相色谱仪检测系统
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。(1)紫外检测器 该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广(如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/ml);线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;
高效液相色谱仪操作流程
高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱损害色谱柱
液相色谱仪蒸发光散射检测器工作原理
液相色谱仪蒸发光散射检测器(ELSD)由雾化器、加热漂移管(溶剂蒸发室)、激光光源和光检测器(光电转换器)等组成。液相色谱仪色谱柱流出液进入ELSD后,首先被高压气流雾化,雾化形成的小液滴进入漂移管,流动相和低沸点的组分被蒸发,剩下高沸点组分的小液滴进入散射池,光束穿过散射池时被散射,散射光被光电
用高效液相色谱仪测定三聚氰胺的原理有那些?
首先,高效液相色谱仪测定任何样品的原理都是基于样品中各组分的良好分离,主要是基于流动相中样品组分通过液相色谱仪的色谱柱的电阻差异,导致要进入列的样本。最初,它是样本的混合物。当流出塔时,组分顺序排出,然后由流动相携带到检测器。三聚氰胺使用紫外线可见光探测器。原理是当样品通过紫外检测器时,样品对检测器
高效液相色谱仪的组成部分
它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
高效液相色谱仪最重要的部件
泵 进样器 检测器 一个都不能少 泵考查保留时间稳定性 进样器和检测器保证峰面积重现性 色谱柱温也会影响保留时间稳定
高效液相色谱仪的应用相关介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复
高效液相色谱仪的过滤相关介绍
任何颗粒物进入HPLC系统后都会在柱子入口端被筛板挡住,zui后的结果是将柱子堵塞,表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此,要采取各种预防措施,包括操作步骤和商品仪器自身的各种过滤设计,努力防止或减少颗粒物进入HPLC系统中,从而延长仪器和色谱柱的使用寿命,并提高数据的可靠性。在HPLC
关于高效液相色谱仪的延伸介绍
在同一色谱条件下,样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长,后流出色谱柱;K值小的组分则滞留时间短,先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大,越容易分离,因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。 在HPLC中,固定相确定后,K主要受流动相的性质影响。实践中主要靠调整流动相的组成配
高效液相色谱仪的几个使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗? 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗? 事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱
高效液相色谱仪的几个使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗?不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使
高效液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下,高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用3~6个月,能完成数百次分离。但若操作不慎,将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性,必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护: 1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。 2、加3~5cm保护柱。 3、
高效液相色谱仪的局限性
高效液相色谱仪的局限性:1、高效液相色谱仪的溶剂成本高于气相色谱仪,易污染环境。2、高效液相色谱仪的梯度洗脱操作比气相色谱仪复杂。3、高效液相色谱仪的检测器不如气相色谱仪的检测器。4、高效液相色谱仪不能替代气相色谱仪分离组成十分复杂的物质。5、高效液相色谱仪不能替代中、低压柱色谱仪分离受压易分解、变
高效液相色谱仪使用试管的问题
1、试管的洁净问题。高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法,如果因使用不洁净的试管,便会影响试验结果的准确性。例如,在用甲醇作溶剂来溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的,因此,在每次进样时,都有一个保留时间固定的干扰峰存在,后经证实,此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生,换用玻
高效液相色谱仪的维护保养要点
一、高效液相色谱仪的维护要点1、手动进样器:平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗;如果出现漏液现象,原因极可能为转子密封垫磨损或污染,一般要申请维修或更换配件。2、排液阀:此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损,可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、
高效液相色谱仪分析样品的制备
高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变,对分析结果的干扰因素很多,为达到分析目的,样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。一、预处理:1、固体样品:含水较低,粉碎过筛。含水量较高,取使用部分烘干后,粉碎过筛。2、液体样品:搅