高效液相色谱仪的工作原理
高效液相色谱仪的工作原理：储液器中的流动相被高压泵打入检测系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样本浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式输出检测结果。......阅读全文
高效液相色谱仪的用途有哪些？
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生
高效液相色谱仪的几个使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗？ 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？ 事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱
高效液相色谱仪最重要的部件
泵 进样器 检测器 一个都不能少泵考查保留时间稳定性 进样器和检测器保证峰面积重现性 色谱柱温也会影响保留时间稳定
简述高效液相色谱仪的发展历史
1960年代，由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性，为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯（Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪，开启了高效液相色谱的时代。
高效液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下，高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用 3～6 个月，能完成数百次分离。但若操作不慎，将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性，必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护：1、流动相和样液都需用 0.45um 孔径的滤膜过滤。2、加 3～5 cm 保护柱。3、进样阀进样。
高效液相色谱仪流动相的要求
高效液相色谱流动相是液体，对组分有亲合力，并参与固定相对组分的竞争，正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。二、溶剂与检测器匹配：对于紫外吸收检测器，不能用对紫外光有吸收的溶剂。对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，
高效液相色谱仪的几个使用问题
1. 色谱柱中的流动相会排干吗？不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使
高效液相色谱仪流动相的处理
高效液相色谱仪流动相的处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等。一、水的处理：水的等级分纯化水、蒸馏水和去离子水等。将一般的蒸馏水加入少许高锰酸钾，消耗水中的氧气，在 PH=9～10 的条件蒸馏，可用于梯度洗脱。二、溶剂的提纯：通常用蒸馏法可除去大部分有紫外吸收的杂质。三、溶剂的过滤与脱气：
高效液相色谱仪色谱柱的结构
色谱柱由柱节点、柱管和过滤器组成。柱节点是低死体积结构的螺纹组件。一端为7/16英寸外螺纹，另一端为3/16英寸内螺纹（国内外已标准化）7×16英寸外螺纹连接到1×4英寸圆筒管(Φ6.35mm)，并在中间放置一个压力环进行密封3/16英寸的内螺纹与1/16英寸（1.57mm）的连接管连接，中间放置一
高效液相色谱仪的局限性
高效液相色谱仪的局限性：1、高效液相色谱仪的溶剂成本高于气相色谱仪，易污染环境。2、高效液相色谱仪的梯度洗脱操作比气相色谱仪复杂。3、高效液相色谱仪的检测器不如气相色谱仪的检测器。4、高效液相色谱仪不能替代气相色谱仪分离组成十分复杂的物质。5、高效液相色谱仪不能替代中、低压柱色谱仪分离受压易分解、变
高效液相色谱仪的局限性
高效液相色谱仪（高效液相色谱法）的溶剂成本高于气相色谱法，容易污染环境。高效液相色谱的梯度洗脱比气相色谱复杂高效液相色谱检测器不如气相色谱检测器好。高效液相色谱法（hplc）不能代替气相色谱法分离一种非常复杂的物质。高效液相色谱法不能代替中低压柱相色谱法分离易分解和经压力变性的生物活性生化样品。气相
高效液相色谱仪分析的定性方法
高效液相色谱仪分析过程中影响溶质迁移的因素较多，同一组分在不同色谱条件下的保留值相差很大，即便在相同的操作条件下，同一组分在不同色谱柱上的保留也可能差别很大，因此，高效液相色谱与气相色谱相比，定性的难度更大。 高效液相色谱仪分析中常用的定性方法有利用已知标准样品定性、利用检测器的选择性
高效液相色谱仪分析样品的制备
高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变，对分析结果的干扰因素很多，为达到分析目的，样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。一、预处理：1、固体样品：含水较低，粉碎过筛。含水量较高，取使用部分烘干后，粉碎过筛。2、液体样品：搅
高效液相色谱仪的维护保养要点
一、高效液相色谱仪的维护要点1、手动进样器：平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗；如果出现漏液现象，原因极可能为转子密封垫磨损或污染，一般要申请维修或更换配件。2、排液阀：此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损，可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。3、
简介高效液相色谱仪泵的冲洗
千万不要一分析完冲几分钟后就停泵，特别是当流动相中含有难挥发的缓冲液（如磷酸盐）时。如果仪器不是连续使用，当流动相蒸发时，难挥发物就会粘在活塞密封垫的表面，难挥发物将形成固形物沉淀。这是泵密封垫磨损和单向阀渗漏的主要原因之一。所以，无论使用长短，在停泵以前一定要用非缓冲液流动相冲洗泵在半个小时以
关于高效液相色谱仪的延伸介绍
在同一色谱条件下，样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；K值小的组分则滞留时间短，先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大，越容易分离，因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。 在HPLC中，固定相确定后，K主要受流动相的性质影响。实践中主要靠调整流动相的组成配
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时，经常会碰到前面的一些成分分离不完全，后面的一些成分分离度太大，且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离，往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速（压力）梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大，而且会带来一些不利影响
高效液相色谱仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统（色谱柱）、检测系统和数据处理与记录系统组成，具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分 [1] 。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 [2] 。 1. 溶剂输送系统 储液器：用来贮存数量足够、符合
高效液相色谱仪的衍生化技术
高效液相色谱仪(HPLC)衍生化技术是指普通检测方法不能直接检测或检测低灵敏度物质，并与某些试剂(即衍生试剂)反应，使其形成易于检测的化合物的过程。根据派生方法，可分为柱前派生和柱后派生。一、柱前衍生化：柱前衍生化是指将被测物体转换为可验证的导数，然后用色谱柱分离。这种衍生化可以在线衍生化，即被测物
高效液相色谱仪的维护保养要点
一、高效液相色谱仪的维护要点 1、手动进样器： 平时应该注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗；如果出现漏液现象，原因极可能为转子密封垫磨损或污染，一般要申请维修或更换配件。 2、排液阀： 此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损，可卸下后取出其
关于高效液相色谱仪的应用介绍
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合，HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复
高效液相色谱仪的分离系统简介
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm(需要两根连用时，可在二者之间加一连接管)，内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性
高效液相色谱仪的操作注意要点
1)． 首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直
高效液相色谱仪的特点及用途
根据固定相是液相还是固相，液相色谱法采用液-液相色谱法（LC）和液-固色谱法（LSC）。现在高效液相液相色谱仪是由高压泵,进样系统,温度控制系统,高效液相色谱柱,检测器,信号记录系统等组成。与传统的液相色谱仪相比高效液相色谱仪,具有高效,快速、灵敏的特点。对于高沸点，难降解化合物的混合物用柱核洗脱剂
高效液相色谱仪的检定规程
1.适用范围适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的检定。2.职责检验员：严格按照检定规程进行周期检定。QC主管：监督检查检定规程执行情况。3.检定项目和技术要求3.1.输液系统3.1.1.泵流量设定值误差：Ss＜±2%；流量稳定性误差：＜±2%3.1.2.定性测量重复性误差（5次定量管进样）：R
高效液相色谱仪分离条件的选择
高效液相色谱仪分离条件的选择包括减小柱内和柱外展宽等条件。一、 减小柱内展宽： 1、固定相： 选用粒径小、分布均匀的球形固定相。 首选化学键合相，匀浆法装柱。 2、流动相： 选用低粘度的流动相，有利于增大组分在溶剂中的扩散系数，减少传质阻力。 3、
高效液相色谱仪色谱柱的保养
正常情况下，高效液相色谱仪色谱柱至少可以使用3～6个月，能完成数百次分离。但若操作不慎，将很容易损坏色谱柱而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量和渗透性，必须对色谱柱进行仔细保养。一、色谱柱的保护： 1、流动相和样液都需用0.45um孔径的滤膜过滤。 2、加3～5cm保护柱。 3、
高效液相色谱仪常见的符合术语
高效液相色谱仪常见的符号术语；acetonitrile全范围吸收单位，全尺度As 峰不对称因子B二元流动相强溶剂，如甲醇/水混合物反相高效液相色谱法BSA牛血清白蛋白（一种蛋白质）牛血清白蛋白咖啡因（中性溶质）咖啡因色谱反应因子色谱法反射作用.色谱总分离的定量指数直流柱内径DMOA二甲基辛胺二甲基辛
高效液相色谱仪的色谱柱简介
色谱柱是高效液相色谱仪的核心部件，由柱管和固定相等组成。一、柱管材质：柱管材料有玻璃、不锈钢、铝、铜和内衬光滑聚合材料的其它金属。玻璃管耐压有限，金属管使用较多。二、色谱柱描述方式：如 ODS（Φ4.6×150mm，5um）。三、色谱柱规格：色谱内径为 4～5mm，柱长为 50～300mm，凝胶色谱
高效液相色谱仪的梯度洗脱技术
高效液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时，经常会碰到前面的一些成分分离不完全，后面的一些成分分离度太大，且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离，往往要用到梯度洗脱技术。在高效液相色谱仪中流速（压力）梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大，而且会带来一些不利影响