层析的概念
小编为广大考生整理了生物化学名词解释,希望对大家考博复习有所帮助,下面是层析(chromatography)相关名词解释以及试题范例。层析是什么(概念)(chromatography)层析,即色层分析,利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法,有吸附层析、分配层析两种,一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析的类别◆按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。◆按流动相与固定相的不同划分:气相层析、液相层析。◆按操作形式划分:柱层析、纸层析、薄层层析、高效液相层析等。以上划分无严格界限,有些名称相互交叉,如亲和层析应属于一种特殊的吸附层析,纸层析是一种分配层析,柱层析可做各种层析。色层分析法层析(色层分析法)即色谱法。起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。1952年英国科学家阿切尔·马丁(Archer JohnPorter ......阅读全文
同系层析的基本概念
在核酸分析中,将样品经核酸酶部分裂解成不同长度的核苷酸片段,用同位素标记后,在DEAE纤维素薄层上分离,用含有未标记的相同的核苷酸片段作展层溶剂,这样,未标记的核苷酸把标记过的核苷酸推进,使按分子量大小不同把标记核苷酸片段,按由小到大的次序排列,达到分离的目的。于是把这种层析法称为同系层析。同系层析
柱层析法的技术介绍
柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。
DNA亲和层析的过程
DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步,即:一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱,用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白,用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。二、将第一步得到的能与DNA相
凝胶过滤层析的技术特点
凝胶过滤层析是利用具有多孔网状结构的颗粒的分子筛作用,根据被分离样品中各组分相对分子质量大小的差异进行洗脱分离的一项技术。 凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)法又称为排阻层析或分子筛方法,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的
柱层析分离技术简述
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所
薄层层析分离原理
薄层层析分离是把支持剂均匀涂布于支持板(常用玻璃板和涤纶布等)上形成薄层,待分离样品点在支持板上,然后用相应的溶剂进行展开,使样品中各组分得到分离的过程。薄层层析分离根据固定相支持剂的不同,分薄层吸附层析分离、薄层分配层析分离、薄层离子交换层析分离和薄层凝胶层析分离等。一般实验中应用较多的是薄层吸附
亲和层析技术介绍
在一对有专一的相互作用的物质中,把其中之一联结在支持物上,用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如:酶和抑制剂,抗原和抗体,激素和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。
概述几种典型层析方法概念
吸附层析 利用吸附层析介质表面的活性分子或活性基团,对流动相中不同溶质产生吸附作用,利用其对不同溶质吸附能力的强弱而进行分离的一种方法,称之为吸附层析。 分配层析 被分离组分在固定相和流动相中不断发生吸附和解吸附的作用,在移动的过程中物质在两相之间进行分配。利用被分离物质在两相中分配系数的
金标免疫层析法简介
金标免疫层析法(goldimmunochromatographicas say,GICA)是20世纪90年代初发展起来的快速免疫分析技术,是一种建立在免疫层析技术、单克隆抗体技术和金纳米晶标记技术基础上的一种固相检测技术。 金纳米晶标记技术是以金纳米晶作为示踪标记物或显色剂,应用于抗原抗体反应
免疫亲和层析的原理
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混
常用色层分析分配层析
分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。一般是水相和有机溶剂相。常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等,这些亲水物质能储留相当量的水。被分离物质在两相中都能溶解,但分配比率不同,展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。
批量层析方法筛选-poly-(A)+-RNA
当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时(
常见色层分析反相层析
反相层析在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析
离子交换层析的发展
1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换现象。上世纪40年代,出现了具有稳定交换特性的聚苯乙烯离子交换树脂。50年代,离子交换层析进入生物化学领域,应用于氨基酸的分析。离子交换层析是生物化学领域中常用的一种层析方法,广泛的应用于各种生化物质如氨基酸、蛋白、糖类、核
气相色谱层析技术
(一)基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强,能够分离和检测到毫微克的水平。它具有快速的特点,常在数十分钟甚至数小时就可以对传染病做出早期诊断。其结果稳定,重复性好
亲和层析法生化检验
亲和层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离的目的。将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含混合组分的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异亲和力的
免疫亲和层析的原理
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混
免疫亲和层析的原理
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。 通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。 首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间
亲和层析的操作实验
亲和层析的操作实验 试剂、试剂盒 非特异性竞争 DNA 液氮 缓冲液 Z
常用的层析填料有哪些
常用液相色谱填料的粒径有:1.8um、3um、5um,这些一般是用在分析柱上的。还有:10um、15um、20um、40um这些一般是用在制备色谱柱上的。
正相层析的基本定义
中文名称正相层析英文名称normal-phase chromatography定 义固定相的极性大于流动相的一种液相层析类型。流动相极性越低,被分离的化合物在层析系统中的保留时间越长。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
什么叫薄层层析法
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度
凝胶过滤层析的实验步骤
1. 如果凝胶过滤的介质是干粉,则需在凝胶过滤缓冲液中完全溶胀。 2. 在远离过往通道及直接光照的恒温环境,将层折柱垂直安装在稳固的实验室支架上。 3. 用一注射器将凝胶过滤缓冲液从柱子的输出管注入柱子,至缓冲液达到柱子支持体平面之上,注射器留在输出端以堵住柱子。 4. 沿着一根顺柱子内壁
薄层层析的定量测定
薄层层析的定量测定: 1)直接测定法:色谱分离后,直接用肉眼观察比较或用仪器扫描斑点而测定其含量。 a.目测法样品经色谱分离后,直接观察所得斑点的大小和颜色的深浅,并与标准品在相同条件下展开所得到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较,而近似地判断样品中所测成分的含量。 b.测面积法
亲和层析法生化检验
亲和层析法是生化检验考试复习需要了解的知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享。 亲和层析利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离的目的。将可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含混合组分的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异
吸附层析的苯信息介绍
吸附色谱,文献中也称之为液固色谱或正相色谱。吸附一词可能更准确地反映这类分离过程的本质,并与液相色谱的其他技术相区别。吸附色谱是吸附色谱系色谱法的一种,利用固定相吸附中对物质分子吸附能力的差异实现对混合物的分离,吸附色谱的色谱过程是流动相分子与物质分子竞争固定相吸附中心的过程。
层析技术的应用(二)
(一)凝胶层析法 凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析等。它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂,并且对分离成分理化性质的保持有独到之处。对于高分子物质有很好的分离效果。 ⒈凝胶的选择 根据实验目的不同选择不
气相色谱层析技术
气相色谱层析 (一)基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。 利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强,能够分离和检测到毫微克的水平。它具有快速的特点,常在数十分钟甚至数小时就可以对传染
离子交换层析的应用
离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、