层析的概念
小编为广大考生整理了生物化学名词解释,希望对大家考博复习有所帮助,下面是层析(chromatography)相关名词解释以及试题范例。层析是什么(概念)(chromatography)层析,即色层分析,利用各组分物理性质的不同,将多组分混合物进行分离及测定的方法,有吸附层析、分配层析两种,一般用于有机化合物、金属离子、氨基酸等的分析。层析的类别◆按层析的机理划分:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。◆按流动相与固定相的不同划分:气相层析、液相层析。◆按操作形式划分:柱层析、纸层析、薄层层析、高效液相层析等。以上划分无严格界限,有些名称相互交叉,如亲和层析应属于一种特殊的吸附层析,纸层析是一种分配层析,柱层析可做各种层析。色层分析法层析(色层分析法)即色谱法。起源于20世纪初,1950年代之后飞速发展,并发展出一个独立的三级学科-色谱学。1952年英国科学家阿切尔·马丁(Archer JohnPorter ......阅读全文
层析技术概述(四)
⑷ 洗脱当我们选定好洗脱液后,洗脱的方式可分为简单洗脱、分步洗脱和梯度洗脱三种。简单洗脱:柱子始终用同样的一种溶剂洗脱,直到层析分离过程结束为止。如果被分离物质对固定相的亲合力差异不大,其区带的洗脱时间间隔(或洗脱体积间隔)也不长,采用这种方法是适宜的。但选择的溶剂必须很合适方能使各组分的分配系数较
层析技术的分类
分类1. 按两相所处物理状态分类气相层析:气液层析(固定相为液体)和气固层析(固定相为固体),流动相为气体。液相层析:液液层析(固定相为液体)和液固层析(固定相为固体),流动相为液体。2. 按层析方式分类柱层析:固定相装于柱内,使样品沿着一个方向移动而分离。薄层层析:将适当粘度的固定相均匀铺在薄
层析技术的背景
层析技术早在1903年就应用于植物色素的分离提取,各种颜色的色素从上到下在吸附柱上排列成色谱,也称色谱分离法。1931年有人用氧化铝柱分离了胡萝卜素的两种同分异构体,显示了这一分离技术的高度分辨力,从此引起了人们的广泛注意。随着人们认识和实践的提高以及物理化学技术的发展,应用范围更加广泛,没有颜
免疫亲和层析简介
免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。
现代层析法技术特点
色谱法或是层析法是简单点说,就是依据被分离物的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。
非传统层析的生物分离方法以吸附剂替代传统层析
目前已有使用整体柱,纳米纤维以及膜吸附替代传统的填料颗粒的方案。对流装置的一个明显优势在于其独立性和对流量的控制能力,传质不像传统层析柱受到孔隙扩散的限制。薄膜扩散比孔隙扩散快的多,分离仅受到每个分子结合动力学差异(生物分子和固定相之间的亲和力)的影响。但是也因为比表面积的减少,膜结合蛋白的能力
层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响
层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小
凝胶过滤(分子筛层析或凝胶层析)原理和实验方法
凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sephadex型号很多,从G10到G200,它的主要应用范围是:①分级分离各种抗原与抗体;② 去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射
滤胶过滤层析法蛋白质的纯化实验_凝胶过滤层析法
凝胶过滤层析是一项重要的蛋白质纯化技术,又称为大小排阻、凝胶排阻、分子筛或凝胶过滤层析这种方法利用分级分离,而不需要蛋白质的化学结合,这就明显降低了因不可逆结合所致的蛋白质损失和失活。另外,可利用此法更换蛋白质的缓冲液或降低缓冲液的离子强度。在蛋白质纯化操作中何时使用凝胶过滤,还不能一概而论,有时纯
DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验——离子交换层析法
本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白,利用DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验方法原理利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料酶蛋白试剂、试剂盒DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯
关于层析法的原理介绍
层析法利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等),使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。 层析法进行时有两个相,一个相称为固定相,另一相称为流动相。由于各组分所受固定相的阻力和流动相的推力影响不同,各组分移动速度也
层析技术及离心技术
(一)层析技术层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。可分为吸附层析法、分配层析法、离子交换层析法、凝胶层析法、亲和层析法、高效液相层析法等。在层析法中,根据层析峰的位置及峰高或峰面积,可以定性及定量。层析法与光学、电学或电化学仪器连用,可检测出层析后各组分的浓度或质量,同时绘出层析图。
亲和层析--GST标签(谷胱甘肽)
低耐压:谷胱甘肽琼脂糖微球大包装填料谷胱甘肽琼脂糖凝胶提供了一步纯化方法,并允许对含有谷胱甘肽结合序列的蛋白质进行快速、温和以及高特异性的纯化。通过使用含有还原型谷胱甘肽的缓冲液洗脱,已结合的 GST融合蛋白容易从填料中被取代。 该填料用于纯化谷胱甘肽 -S- 转移酶(GST) 以及带有 GST 标
反相高效液相层析实验
多肽和蛋白质的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
气相层析的特点介绍
属于分配层析或吸附层析,仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物(如磨细的耐火砖)上覆盖一层高沸点液体,如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。
薄层层析分离原理
薄层层析分离是把支持剂均匀涂布于支持板(常用玻璃板和涤纶布等)上形成薄层,待分离样品点在支持板上,然后用相应的溶剂进行展开,使样品中各组分得到分离的过程。薄层层析分离根据固定相支持剂的不同,分薄层吸附层析分离、薄层分配层析分离、薄层离子交换层析分离和薄层凝胶层析分离等。一般实验中应用较多的是薄层吸附
薄层层析操作关键点
薄层层析操作关键点1、铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀
气相色谱层析技术
气相色谱层析 (一)基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。 利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强,能够分离和检测到毫微克的水平。它具有快速的特点,常在数十分钟甚至数小时就可以对传染
前沿层析的基本概念
中文名称前沿层析英文名称frontal chromatography定 义层析法的一种形式,样品连续加入层析柱,样品中各组分以不同的速度在柱内移动,最终形成一系列组分移动的前沿,只有滞留最少的组分才在前沿以纯化形式流出层析柱而能被分离,其余的样品组分都随后以混杂的形式流出。这种层析法获得的层析谱常
亲和层析技术简介
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质
凝胶过滤层析的应用特点
⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25%-
关于分配层析的基本介绍
分配色谱是色谱法之一种,利用固定相与流动相之间对待分离组分子溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。 分配色谱过程本质上是组分分子在固定相和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。
常用色层分析分配层析
分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。一般是水相和有机溶剂相。常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等,这些亲水物质能储留相当量的水。被分离物质在两相中都能溶解,但分配比率不同,展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。
纸层析的理论依据
在实际操作中,点样后的滤纸一端浸没于流动相液面之下,由于毛细作用,有机相即流动相开始从滤纸的一端向另一端渗透扩展。当流动相(有机相)沿滤纸经点样处时,样品点上的溶质在水和有机相之间不断进行分配,一部分样品离开原点随流动相移动,进入无溶质区,此时又重新分配,一部分溶质由流动相进入固定相(水相)。随着流
离子交换层析小知识
离子交换层析利用含有能与周围介质进行离子交换的不稳定离子的不溶 性基质来分离分离物质。 1、离子交换基质Adams 和Holnes 有1935 年通过酚、甲醛和磺酸缩 聚成不溶性树脂,制成了第一个人工合成的离子交换材料。从此以后,人工 合成的离子交换树脂日见增多(多数是从芳香族化合物合成的),
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、吸附层析 1、吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、薄层层析 薄层
薄层层析(TLC)方法(二)
薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。 薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄
反相层析的概念和应用
如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。目前用HPLC做反相层析常用的ODS柱,即在支持物的表面上连接了C18H37Si—基团。
薄层层析的分析程序
将样品溶液用毛细管点在薄层板的一端,置密闭槽中,加入适宜溶剂为流动相。由于毛细管原理,溶剂被吸上,沿板移动,并带动样品中各组分向前移动,这个过程称为展开。由于各组分性质不同,移动距离不同,展开一定距离后,即得互相分离的组分斑点。可用适当方法使各组分在板上显示其位置,如组分本身有颜色,即可直接观察,否
免疫亲和层析的原理
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混