RtPCR实验准备及与操作步骤

一、实验器具与材料:1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头:1ml、200μl、20μl3、匀浆管:5ml4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个5、EP 管:1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶:2个60ml的棕色试剂瓶(广口,带盖)1个125ml的白色试剂瓶(放无水乙醇)7、量筒:50ml、250ml、500ml8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml9、试管架:5ml、 1.5ml、20μl10、盐水瓶:250ml、500ml各2个备用,一个装无水乙醇,另一个装DEPC水11、铝制饭盒:4个12、塑料小饭盒:1个13、大瓷缸:2个14、锡泊纸:一卷15、卷纸:2卷16、三角烧瓶:带盖,稍大易生物仪器库:http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物试剂库:http://www.ebioe.com/yp/product......阅读全文

实验动物标记实验

实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)

实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法

实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。

PCR实验如实预防实验污染

进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,zui大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。1.划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

杂交实验的实验材料仪器

1.实验材料:烟草或其它植物无菌苗的叶片。胡萝卜肉质根诱导的松软愈伤组织或悬浮培养细胞。2.试剂2.1酶液及洗涤液,同植物原生质体的分离和培养实验。2.2PEG溶液2.3高pH高钙稀释液2.4DPD培养基同植物原生质体的分离和培养实验。

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

细胞转染实验的实验原理

外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法、脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和

杂交实验的实验结果分析

1.在倒置显微镜下观察异源融合。在培养3天以内,可根据双新原生质体的形态特征来鉴别异核体。因为来自叶肉组织的原生质体具有明显绿色叶绿粒,而来自培养细胞的原生质体无色,但具浓密原生质丝,并可看到显示的核区。2.统计异源融合的频率

PCR实验如实预防实验污染

进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,均要求实验操作在三个不同的区域内进行,PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行:(1)标本处理区,

杂交实验的实验方法

所有操作均在超净工作台上进行。1.原生质体的分离和收集。2.将收集的两种不同材料的原生质体分别悬浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生质体密度调整为2×105/ml左右(用血细胞计数板统计原生质体密度)。3.将两种原生质体悬液等量混合。4.用刻度吸管将混合的原生质体悬

细胞转染实验的实验目的

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。

细胞计数实验——细胞计数实验

实验方法原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞牛长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品往往不易

细胞转染实验的实验步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,

薄层色谱实验的实验步骤

  偶氮苯和苏丹Ⅲ由于极性不同,利用薄层色谱(TLC)可以将二者分离。  (1)点样。  取两块制好的薄层板,分别在距一端1 cm处用铅笔轻轻画一条横线作为起始线。取管口平整的毛细管插入样品溶液[6]中,在一块板的起点上点1%偶氮苯的甲苯溶液和混合液两个样点。在第二块板的起点线上点1% 苏丹Ⅲ 的甲

核酶实验——发夹型核酶实验

实验方法原理作为有催化活性的 RNA,发夹型核酶在生物体内的作用是位点特异的核酸酶以及 RNA 连接酶。发夹型核酶的催化基序最先是在烟草环斑病毒负链的卫星 RNA 中发现的,它表现一种可逆的自切割反应,最终使滚环复制的产物形成成熟的病毒核酸。发夹型核酶与锤头型核酶都能催化产物的连接,但是发夹型核酶的

ELISA实验原理及实验过程

实验原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通

克尔效应实验的实验原理

各向同性的介质如玻璃,石蜡,水,硝基苯等,在强电场作用下会表现出各向异性的光学性质,表现出双折射现象。折射率差与电场强度的平方成正比,称为克尔效应。在两平行平板之间加上高电压,在电场作用下,由于分子的规律排列,这些介质就表现出象单轴晶体那样的光学性质,光轴的方向就与电场的方向对应。当线偏振光沿着与电

实验动物的取血实验

实验方法原理实验动物的采血方法很多,按采血部位不同,可分为:尾部采血(割、剪鼠尾),鼠尾刺血法,眼眶静脉丛采血,断头采血,心脏采血,颈静脉(动脉)采血,腹主动脉采血,股动(静)脉采血,耳缘剪口采血,耳静脉采血,后肢外侧小隐静脉采血,前肢内侧皮下头静脉采血,毛细血管采血,翼下采血等。实验材料家兔狗豚鼠

核酶实验——锤头型核酶实验

核酶(ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子,通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物 RNA 分子,从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中,参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法

MTT实验原理和实验步骤

MTT原理:MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formaza

抗球蛋白实验(直接Coombs实验和间接Coombs实验)

机体受某些抗原刺激后,可产生不完全抗体,由于这种抗体体积较小、长度短,只能与颗粒抗原一方相结合(又称单价抗体),因而不能出现肉眼可见的凝集反应。Coombs首先根据抗体存在于球蛋白,注入异种动物的球蛋白又是抗原的原理,将含有不完全抗体的血清球蛋白免疫异种动物,获得抗球蛋白抗体,此种抗体可以起到桥梁作

即肠道病毒型PCR试剂盒使用说明书

产品名称:即肠道病毒型PCR试剂盒英文名称:Enteric Virus72(EV72,HAV)72RTPCR产品编号:CP912798产品类别:PCR检测试剂盒产品规格:50T产品运输:低温运输产品保存:-20℃保存产品有效期:一年产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂

实验动物组织标本的制备实验

实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

克尔效应实验的实验方法

1.放入克尔盒,并转动至消光位置;2.接通克尔盒的偏转电源,即可观察到屏幕上有光亮。改变两极板之间的电压,可以观察到屏幕上的光强会随之变化;3.保持两极板之间的电压不变,旋转克尔盒,同样可以观察到屏幕上光强变化。

肥达实验,如何讨论实验结果

肥达氏反应试验主要有“O”、“H”、“A”、“B”、“C”等结果。“O”为伤寒菌体抗原,受其他因素影响较小,临床价值较大,阳性见于伤寒及一些其他细菌感染;“H”为鞭毛抗原,受防疫注射及一些自然因素影响较大,容易出现假阳性,临床诊断价值不如“O”有价值,常需反复检查,动态观察;“A”、“B”“C”为副

疼痛实验动物模型制作实验

神经病理痛模型(neuropathic pain model) 组织炎症疼痛模型 疾病并发慢性痛模型             实验方法原理 疼

免疫学实验动物实验介绍

  动物实验介绍:  动物实验是在实验室内,为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物 进行的科学研究。动物实验必须由经过培训的、具备研究学位或专 业技术能力的人员进行或在其指导下进行。  动物实验正常值:  无  动物实验临床意义:  实验动物科学发展的最终目的,就是要通过对动