酶联免疫检测的方法及原理

(1)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA):是将抗原或抗体吸附在固相载体表面。使抗原抗体反应在固相载体表面进行。可用间接法、双抗体夹心法或竞争法测定抗原或抗体。(2)夹心法(sandwich assay):将已知的特异抗体包装在固相载体(塑料板凹孔或纸片上),加入待检标本,标本中的抗原即可与载体上的抗原结合,洗去未结合的材料后加入该抗原的酶标记抗体,洗去未结合的酶标抗体,加底物显色,用酶免疫检测仪测量颜色的光密度,可定量测定抗原。 间接法(indirecr ELISA)常用于检查特异抗体。先将已知特异抗原包被固相载体,加入待检标本(可能含有相应抗体),再加入酶标抗Ig的抗全(即第二抗体),经加底物显色后,根据颜色的光密度计算出标本中抗体的含量。(3)BAS-ELISA:近年来对酶免设分析法的改进是使用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂,组成一新的生物放大系统......阅读全文

酶联免疫法的注意事项

   1 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。    2 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:  ⑴  固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,

酶联免疫吸附法的原理和操作办法

  1、原理   对 E.coli O157:H7 抗原具有高度特异性的多克隆酶联免疫专有抗体被绑在酶标板的微孔内,加入增菌后的测试样品和阳性质控后,如有 E.coli O157:H7 ,抗原存在则与微孔内的抗体结合形成抗体抗原复合物,没参加反应的物质被冲洗掉。加入碱性磷酸酶抗体接合剂,使 E.

直联型离心萃取器的原理及相关应用介绍

  离心萃取机整体采用玻璃钢材质,底部轴承上移,改为顶部双轴承,底部不设机封;    底部轴承采用陶瓷材质,可与水及其他溶剂直接接触,壳体采用钢衬氟材质,转鼓采用全氟材质。    直联型离心萃取器工作原理:    该机集混合与分离于一体,结构紧凑。    借助离心力加速具有比重差的液-液两相

电化学发光免疫检测原理

电化学发光免疫检测原理报告者:湘雅医院检验科高骞博士

凝结酶实验的试验方法原理

  致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶。一种是结合凝固酶,结合在细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面,发生凝集:可用玻片法测出。另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶。作用类似凝血酶原物质,可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质,而使纤维蛋白原变成纤维蛋白,从而使血浆凝固,可用试管法测

免疫化学发光并非万能,单分子免疫检测未来可期(三)

前言       化学发光技术已经成为当前免疫诊断市场中最重要的检测技术。自上世纪70年代诞生以来,尽管随着检测设备全自动化水平以及检测元件精密度、试剂生产保存工艺的发展,化学发光技术的检测灵敏度有了显著的提升,然而究其本质而言,无论是酶促发光、直接发光或是电化学发光,化学发光技术在检测原理上在过去

gG4酶联免疫分析的建立及初步应用有哪些

  用兔抗人IgG4的多克隆抗体(IgG4Ab)包被成固相板,以识别结合待测标本中的IgG4。用生物素标记IgG4Ab得Bio-IgG4Ab;用亲和素标记辣根酶得HRP-A。在已包被IgG4Ab的固相板中加入IgG4标准品(或待测样品),反应、洗涤后,加入Bio-IgG4Ab,反应、洗涤后,加入HR

小鼠白细胞介素1(IL1)酶联免疫检测试剂盒使用说明书

使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测小鼠白细胞介素1(IL-1),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用    途:用于小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1(IL-1)测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中小鼠白

大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析

大鼠钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠钙调磷酸酶(CaN)水平。用纯化的大鼠钙调磷酸酶(CaN)抗体包被微孔

人乙酰肝素酶(HPA)酶联免疫分析(ELISA)

人乙酰肝素酶(HPA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乙酰肝素酶(HPA)含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙酰肝素酶(HPA)水平。用纯化的人乙酰肝素酶(HPA)抗体包被微孔板,制成固

人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)

人端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人端粒酶(TE)水平。用纯化的人端粒酶(TE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微

山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)

山羊端粒酶(TE)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定山羊血清,血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)的活性。 上海裕平生物科技公司高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,售后完善,并提供免费代检测服务。咨询热线:021-60545848-5512

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中胃蛋白酶(Pepsin)含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶(Pepsin)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶(Pepsin)

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析

大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中胃蛋白酶(Pepsin)含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胃蛋白酶(Pepsin)水平。用纯化的大鼠胃蛋白酶(Pepsin)

脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析

脂蛋白脂肪酶(LpL)酶联免疫分析说明书实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中脂蛋白脂肪酶(LpL)水平。用纯化的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入脂蛋白脂肪酶(LpL),再与HRP标记的脂蛋白脂肪酶(LpL)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物

大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析

大鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的大鼠乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相

人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)

人凝血酶(Thrombin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中凝血酶(Thrombin)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶(Thrombin)水平。用纯化的人凝血酶(Thromb

昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析

昆虫乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫乳酸脱氢酶(LDH)水平。用纯化的昆虫乳酸脱氢酶(LDH)抗体包被微孔板,制成固相

电化学发光法和电化学方法哪个灵敏度更高

化学发光法由于灵敏度高,分析方法简单快捷,检测时间短及诊断范围宽等优势被公认为未来将取代放免和酶联免疫检测方法的最佳方案 ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性

DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法3

二、DNA分子量标准的制备采用EcoRⅠ或HindⅢ酶解所得的λDNA片段来作为电泳时的分子量标准。λDNA为长度约50kb的双链DNA分子,其商品溶液浓度为0.5mg/ml,酶解反应操作如上述。HindIII切割 DNA后得到8个片段,长度分别为23.1, 9.4, 6.6, 4.4, 2.3,

DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法2

3、 DNA分子的构象当DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而线状双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引

DNA限制性酶切及凝胶电泳,实验原理及方法1

实验原理一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,

绵羊产气荚膜梭菌酶联免疫分析试剂盒原理

  绵羊产气荚膜梭菌D型(CP-D)酶联免疫分析试剂盒     本试剂盒仅供研究使用。     96T     使用目的:     本试剂盒用于测定绵羊血清、血浆及相关液体样本中产气荚膜梭菌D型(CP-D)的表达。     实验原理     本试剂盒

用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底

酶标仪的选购指南

  酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。  酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业

关于酶联免疫法的试剂的应用

  在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:  ⑴已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);⑵酶标记的抗原或抗体(结合物);  ⑶酶的底物;  ⑷阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制

木瓜蛋白酶的酶活测定原理和方法

本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.

酶标仪总述

  即酶联免疫检测仪(ELISA Reader)是酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量. ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250u l以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪

什么是MTT法?

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映

大鼠APJ酶联免疫分析(ELISA)

大鼠APJ酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中APJ的含量。 实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠APJ水平。用纯化的大鼠APJ抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依