用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底物对等。上述色原底物受HRP作用主要有两种形式的反应:①氧化还原底物的氧化作用,如OPD、ABTS等;②一个氨基芳香剂与另一个芳香基化合物的氧化耦联,如4—氨基安替比林:苯酚等。 (一)氧化还原色原底物 OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一,其在HRP的作用下,由过氧化氢(H202) 氧化而聚合成2,2’—二氨基偶氮苯(DAB)。在pH5.0左右时,DAB在波长450nm处有广范围的最大吸收,当pH值降为1.0时,最大吸收波长移动至492nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深(图4—2)。因而常用强酸......阅读全文

用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底

碱性磷酸酶(AP)的色原底物

在ELISA测定中,碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(p-nitropheny|phosate,)。在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(),其在入=405 nm处有最大吸收。由于碱性条件下的光吸收增强,并可使碱性磷酸酶失活,因而可使用碳酸钠作为终止剂。二乙醇胺缓冲液中不能有单乙醇胺,因为单

酶免疫技术酶与底物

酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染

人降钙素原(PCT)酶联免疫分析

人降钙素原(PCT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。用纯化的人降钙素原(PCT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的

酶免疫技术中酶和酶作用底物

酶和酶作用底物(一)酶的要求: 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ,酶活性不受样品中其他成分的影响,受检

大鼠胰岛素原(PI)酶联免疫分析

大鼠胰岛素原(PI)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素原(PI)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胰岛素原(PI)水平。用纯化的大鼠胰岛素原(PI)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗

大鼠心脏纤维原细胞(HCF)酶联免疫分析

大鼠心脏纤维原细胞(HCF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中心脏纤维原细胞(HCF)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠心脏纤维原细胞(HCF)水平。用纯化的大鼠心脏纤维原细胞(HCF

小鼠胰岛素原(PI)酶联免疫分析

小鼠胰岛素原(PI)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素原(PI)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素原(PI)水平。用纯化的小鼠胰岛素原(PI)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗

免疫酶技术中常用的酶底物系统

各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性

人碳酸酐酶(CA)酶酶联免疫分析

人碳酸酐酶(CA)酶酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中碳酸酐酶(CA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碳酸酐酶(CA)水平。用纯化的人碳酸酐酶(CA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往

人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析

人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中ATP酶(ATPase)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,

酶联免疫分析缺点

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。   ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗

什么是酶联免疫

酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控

酶联免疫法简介

  酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,用血清来进行检测。  酶联免疫法是利用抗体与酶复合物结合显色的原理,并保持抗体免疫活性,其已成为分析化学领域中的前沿课题。

什么是酶联免疫

酶联免疫法简介  酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。   它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤  ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范

鲫鱼卵黄蛋白原(vtg)酶联免疫分析

鲫鱼卵黄蛋白原(vtg)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定鲫鱼血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中卵黄蛋白原(vtg)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鲫鱼卵黄蛋白原(vtg)水平。用纯化的鲫鱼卵黄蛋白原(vtg)抗体包被微孔板,

酶联免疫斑点实验(ELIspot)——酶联免疫斑点实验(ELIspot)

实验材料血液样品细胞样品试剂、试剂盒70%乙醇PBS脱脂奶粉链霉亲和素检测抗体包被抗体仪器、耗材PVDF膜96孔培养板硝基纤维素底板免疫斑点板酶标板实验步骤一、包被96孔板 用70%乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30 s 加入捕获抗体(PBS稀释),4℃过夜 倒空板中包被液,轻轻在纸上拍干,用PBS

酶联免疫斑点实验(ELIspot)_酶联免疫斑点实验(ELIspot)2

实验方法原理ELISPOT技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPBST乙醇包被抗体封闭液抗体稀释液检测抗体酶联亲和素AEC显色液PHA刺激物U-Cytech无血清培养基仪器、耗材ELISPOT读数仪超净工作

大鼠5α还原酶Ⅱ酶联免疫分析

大鼠5α-还原酶Ⅱ酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中5α-还原酶Ⅱ的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5α-还原酶Ⅱ水平。用纯化的大鼠5α-还原酶Ⅱ抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单

人端粒酶(TE)酶联免疫说明

本试剂盒仅供研究使用。检测范围:                                                          96T1 IU/L -40 IU/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中端粒酶(TE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中

大鼠5α还原酶Ⅱ酶联免疫分析

大鼠5α-还原酶Ⅱ酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中5α-还原酶Ⅱ的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5α-还原酶Ⅱ水平。用纯化的大鼠5α-还原酶Ⅱ抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单

酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?

  酶和酶作用底物  (一)酶的要求:  一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合:  1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。  2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。  3.作用专一性强 ,酶活性不受样品

人酶联免疫分析(ELISA)

人酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)水平。用纯化的人邻氨基苯甲酸合成酶(ASA)抗体包被微孔板,

人Apelin酶联免疫分析

人Apelin酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Apelin的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Apelin水平。用纯化的人Apelin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次

人Neuritin酶联免疫分析

人Neuritin酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中Neuritin的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Neuritin水平。用纯化的Neuritin抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被

人(TotalT)酶联免疫分析

人(TotalT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中总**(TotalT)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人总**(TotalT)水平。用纯化的人总**(TotalT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,

小鼠酶联免疫分析(ELISA)

小鼠酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中(Insulin)含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体

什么是酶联免疫法

酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked

酶联免疫法的原理

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原

什么是酶联免疫法

酶联免疫法是将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法。1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked