凝胶渗透色谱与高效液相色谱有什么区别
都属于液相色谱,主要不同是:1 GPC流动相是纯有机溶剂,为正相色谱;HPLC可用含量不超过95%的水溶液,为反相色谱。2 GPC的色谱原理是体积排阻; HPLC的色谱原理是吸附-洗脱。......阅读全文
液相色谱有几种分离类型
1、吸附色谱法吸附色谱法的固定相为吸附剂,色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的,不进入固定相的内部。与气相色谱不同,流动相(即溶剂)分子也与吸附剂表面发生吸附作用。在吸附剂表面,样品分子与流动相分子进行吸附竞争,因此流动相的选择对分离效果有很大的影响,一般可采用梯度淋洗法来提高色谱分离效率。在聚合物的
凝胶渗透色谱仪的日常维护与保养知识
凝胶渗透色谱仪一般在实验室的应用比较多,不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。相对于凝胶渗透色谱仪的使用,它的保养也极为重要。 清洗气路连接管时,应首先将该管的两端接头拆下,再将
凝胶渗透色谱仪的日常维护与保养知识
凝胶渗透色谱仪一般在实验室的应用比较多,不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。相对于凝胶渗透色谱仪的使用,它的保养也极为重要。 清洗气路连接管时,应首先将该管的两端接头拆下,再
凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样
凝胶渗透色谱仪的样品配制与进样:一、样品配制:由于凝胶色谱仪中的浓度检测通常用示差折光检测器,其灵敏度不太高,所以样品浓度不能太低。但色谱柱的负荷量是有限的,浓度太高易发生超载现象。一般情况下,进样浓度按分子量大小的不同在0.05%~0.5%(质量百分数)范围内配置,分子量越大,溶液浓度越低。样品配
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技术之一
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。 气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技
高效凝胶色谱仪分类
高效凝胶色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室高效凝胶色谱仪和工业高效凝胶色谱仪。2、按功能可分:高效凝胶分析色谱仪和高效凝胶制备色谱仪。3、按结构可分:台式高效凝胶色谱仪和落地式高效凝胶色谱仪。4、按分离规模可分:小型高效凝胶色谱仪和大型高效凝胶色谱仪。5、按用途可分:生物色谱仪、制药色谱仪
高效液相色谱和气相色谱的相同点和不同点
不同点: 一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气) 二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针 三、色谱柱长不同: (1)气相色谱柱通常几米到几十米 (气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此
高效液相色谱色谱法检测样品大概多少体积的流动相
不同的样品洗脱体积是不同的,以保留时间计算,大概在7min-15min出峰为宜,当然这是对单一样品来说的,如果目标峰或干扰峰较多,则首先要考虑的是分离度。这样计算的话(1ml/min的流速),一个样品大概需要10-20ml的流动相,另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。
实验室高效液相色谱仪液相色谱流动相的贮存
流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应
高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发
高效液相色谱柱分离效果的好坏
高效液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有zui优的分离效率。 高效液相色谱柱采用高
高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发
高效液相色谱日常简易保养及维护
1、流动相的抽作要求: 高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)。 2、吸滤头: 特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。 3、
反向高效液相色谱柱使用及维护
反相高效液相色谱(RP-HPLC)是一种基于溶质表面、极性流动相和非极性固定相之间疏水作用的色谱模型。任何有机分子的结构中都有非极性疏水部分。零件越大,一般保留值越高。它广泛应用于高效液相色谱。在生物大分子的反相液相色谱(RP-LC)条件下,大多数流动相为酸性、低离子强度的水溶液,含有一定比例的有机
高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发
高效液相色谱柱如何选择填料粒度
Shim-pack VP-ODS液相色谱柱在进行分析法开发及有效性检查过程中,对于色谱柱制造均一性的要求已经越来越高。而Shim-pack VP-ODS正是为了满足这一需求而开发出来的产品。 高效液相色谱柱如何选择填料粒度呢? 色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,粒度越小
高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发
高效液相色谱常用哪些检测器
最常用的检测器是紫外吸收检测器(UVD),用于有紫外吸收的物质。其他的二极管阵列检测器(DAD)可以扫描出一个3D光谱,它是在紫外检测器基础上改良出来的,用于多波长错组分物质;示差折光检测器(RID)和蒸发光散射检测器(ELSD)都属于万能检测器,可以检出没有紫外吸收的物质。还有荧光检测器,用于可发
高效液相色谱柱怎样选择填料粒度
目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3,5和10um填料,填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小, 填充柱 的柱效越高;小于3um的填料应用,在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是**的因素。如果固定相选择是真确,但是分离度不够,
怎样提高高效液相色谱的效率?
为了提高液相色谱的效率,我们可以从以下几个方面着手,主要结果如下:(1)减小了运动相位的速度,但延长了分析时间。(2)减少了固定相的数量,但也减少了样品在色谱柱中的装载量。(3)固定相颗粒尺寸减小,但渗透系数降低过大。(4)选择低粘度的流动相有利于快速传质但不利于多组分分析。(5)适当提高柱温可以降
高效液相色谱填料应如何选择(2)
二、聚合物填料 聚合物填料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸酯等,其主要优点是在pH值为1~14均可使用。 相对于硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。 现有的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
高效液相色谱填料应如何选择(3)
三、其它无机填料
高效液相色谱填料应如何选择(1.2)
2、反相色谱 反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。 样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。 常用的反相填料有:C18(ODS)、C8
高效液相色谱柱的洗柱方法
1、色谱柱清洗要看你的色谱柱是孔径是多少微米,适合的流速是多少。2、以4.6微米的为例,先用纯水清洗2小时,再用甲醇清洗1小时。用的时候直接换上流动相。3、高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的液相色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1.调整流动相比例:检测使用的液相色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2.调整流动相的pH值:流动
高效液相色谱的结构原理和特点
高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成,分离原理是一个物理过程,流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱,利用不同物质在固定相上的保留时间不同,从而出峰时间不同而达到分离,利用保留时间定性,峰高或者峰面积定量,在将分离后的各个成分依次通过
怎样绘制高效液相色谱的标准曲线
绘制高效液相色谱的标准曲线的方法如下:精密取相应对照品,加适当的溶剂溶解,分别精密量取1、2、3、4、5ml(或相应成梯度的量),稀释成各个梯度的溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作软件能直
高效液相色谱的基本内容介绍
高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气
高效液相色谱日常简易保养及维护
1、流动相的抽作要求:高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲盐一定要过滤;流动相脱气至关重要(可采用抽滤,超声波脱气等方法)2、吸滤头:特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗;清洗不成功则需要更换。3、单向阀:如