核酸鉴定方法之浓度

核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是*的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都具有共轭双键,所以具有紫外光吸收性质。核酸在紫外光谱区有一条典型的吸收曲线,其吸收高峰在260nm处,吸收低谷在230nm处。蛋白质在紫外区的吸收高峰在280nm处,所以核酸的紫外吸收光谱数据是鉴定核酸的重要依据之一。由于核苷酸zui大吸收波长为260nm,根据朗伯-比尔定律可计算出在波长260nm的紫外线下,1个OD值的光密度大约相当于50µg/ml的双链DNA, 40µg/ml的单链RNA。紫外分光光度法只适用于测定浓度大于0.25µg/ml的核酸溶液。 计算公式:dsDNA(µg/µl)=OD260......阅读全文

司法鉴定血液中酒精浓度分析及检测

司法鉴定血液中酒精浓度分析及检测:酒精对身心的作用,是由它在血液中的浓度来决定,这就是为什么查酒驾、醉驾的时候测试的都是血液酒精浓度。酒精经由消化系统进入血液,在血液中停留,直到它被肝脏所分解,或是随尿液被排出体外。血液中酒精浓度的下降率是相当稳定的。不管在什么情况下,也不管需要多久你才会受到影响,

核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系

  (1)DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小,因此,就用琼脂糖凝胶

核酸浓度检测(二)——读数解读及注意事项

 当我们获得了Micro Drop超微量分光光度计检测结果后,对光谱的正确分析至关重要。输出结果的含义:1. A260nm——核酸zui高吸收峰的吸收波长。2. A280nm——蛋白zui高吸收峰的吸收波长。3. A230nm——是碳水化合物zui高吸收峰的吸收波长。4. A340nm——是基线校准

核酸浓度检测(二)——读数解读及注意事项

当我们获得了Micro Drop超微量分光光度计检测结果后,对光谱的正确分析至关重要。输出结果的含义:1. A260nm——核酸最高吸收峰的吸收波长。2. A280nm——蛋白最高吸收峰的吸收波长。3. A230nm——是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长。4. A340nm——是基线校准波长,为检测溶

食品微生物鉴定之生化实验汇总(三)

(三)碳源和氮源的利用实验 唯一碳源利用实验(1)原理:在基础培养基只提供一种待检测碳源,若菌株生长则表明菌株能以此种碳源为唯一碳源,否则不能。(2)培养基:基本培养基:(NH4)2HPO41g;NaCl 1g;MgSO4•7H2O 0.2 g;KH2PO40.5 g;琼脂20g;蒸馏水1000mL

食品微生物鉴定之生化实验汇总(二)

(二)蛋白质和氨基酸的代谢实验明胶液化实验(1)原理:某些可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶),能使明胶分解为氨基酸,使明胶失去凝固能力而液化,因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。(2)实验方法:取18~24h的斜面培养物穿刺接种,并有两支未接种的空白对照。(3)结果观察:于30℃培养20天后观

食品微生物鉴定之生化实验汇总(一)

不同的细菌具有各自的独特的酶系统,因而对底物的分解能力各异,其代谢的产物也不相同。这些代谢产物又具有不同的生物化学特性,可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。掌握各种生化反应的原理和应用是细菌鉴定的基础。生理生化特性的测定主要根据Shirling & Gottlieb《Internatio

食品微生物鉴定之生化实验汇总(四)

(四)各种酶类实验 氧化酶试验(1)原理:氧化酶(即细胞色素氧化酶),是细胞色素氧化酶系统中的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。因此,本试验结果与细胞色素C的存在有关。(2)实验方法:菌落法:直接滴加试剂于被检菌落上;滤纸

AB0血型鉴定的鉴定方法

(1)生理盐水凝集法①玻片法操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。玻片法凝集结果判断呈一片或几片凝块,仅有少数单个

理化实验室基础知识之试剂浓度的表示方法及计算公式!

百分浓度使用广泛,计算方便。百分浓度又分重量百分浓度和体积百分浓度两种。其中以重量百分浓度用的较多。 一、重量百分浓度    用100克溶液中所含溶质的克数来表示溶液的浓度,叫做重量百分浓度。即,溶质和溶剂的重量总和为100克或100克的倍数。如公式表示:溶质(克)+溶剂(克)=100克溶液由于溶质

为什么要检测核酸的浓度和分子量

浓度可以借助紫外分光光度法,使用nanodrop机器可以迅速测出;分子量可以借助核酸凝胶电泳,对照genemarker的条带可以读出。

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

        DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/m

Biochrom分光光度计测定核酸的浓度

DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02。当OD260=1时,DNA浓度约为50μg/ml;RNA浓度约

微生物鉴定之细菌的大小与形态简介

                      (一)的大小   细菌形体微小,通常以微米(μm;1μm=1/1000mm)为测量单位。须用放大数百至上千倍才能看到。一般球菌的直径约1μm,中等大小的杆菌长2~3μm,宽0.3~0.5μm。菌龄与环境等因素对菌体大小有影响。

微生物鉴定之培养基的制备程序

培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。  (一)配料  按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。  (二)溶化

植物组织培养苗之污染来源与污染鉴定

一、在组织培养中污染来源 1. 植物  本身具有: (1)植物  病原菌 有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。 (2)和植物  有关的菌类 有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。 2. 植物  所带

鉴定多糖的方法

1、方法提要食品中相对分子质量>1×104的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀,与水溶液中单糖和低聚糖分离,用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖,用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量,其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以此计算食品中粗多糖含量。2、主要仪器

亲子鉴定的方法

  鉴定的方法主要有以下几种:  (1)血型鉴定。血型鉴定,就是根据血型的遗传规律对亲生关系的判定。ABO式的血型遗传是受A、B和O三个等位基因控制的。每个人都有其中任何两个基因,这两个基因可以是相同的。在两个染色体配对时,可组合有6种基因,即AA、AO、BB、BO、AB、OO,这6种基因就是决定生

显微鉴定的方法

制片 进行显微鉴定,首先根据观察的对象和目的,选择具有代表性的生药,制作不同的显微制片,包括组织制片、表皮制片和粉末制片 。组织制片的方法主要有徒手制片、滑走制片、冰冻制片及石蜡制片等。对植物类中药,如根、根茎、茎藤、皮、叶等类,一般制作横切片观察,必要时制纵切片;果实、种子类须制作横切片及纵切片

几种核酸提取方法

 (1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来. 也可用

几种核酸提取方法

几种核酸提取方法(1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀

测定核酸的方法

琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶具有较大的孔径,因而适用于对较大分子的电泳分离,目前琼脂糖电泳凝胶法已成为核糖核酸和脱氧核糖核酸检测、分离和性质研究的标准手段。核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小以及核酸分子的形状三个因素。一般来说,较低浓度的琼脂糖凝胶适合于较大分子物质的电泳分

核酸的分离方法

核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以

核酸的分离方法

核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础.无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化.核酸样品质量将直接关系到实验的成败.核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性.因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以

核酸提取分离方法

核酸提取分离方法核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸,比较经典的是采用离心柱法,将硅胶膜固定在离心管中,通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污

核酸检验方法

核酸检测具体流程如下:1. 核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。2. 逆转录合成cDNA逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs

核酸提取方法大全

核酸是生物体内的高分子化合物。它包括脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)两大类。DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的。RNA平均长度大约为2000个核苷酸,而人的DNA却是很长的,约

硝酸浓度检测方法

先说实验步骤吧.1、用移取量为10毫升的移液管移取10毫升用浓硝酸与水按4%的体积比配制的待测硝酸水溶液,转移到50毫升的容量瓶中,加入蒸馏水稀释到刻度,充分摇匀备用.2、另外用一支移取量为10毫升的移液管移取10毫升容量瓶中配制好的溶液到锥形瓶中,加入100毫升左右蒸馏水,摇匀,加入2至三滴石蕊试

盐酸浓度检测方法

盐酸浓度检测:取10gHCI溶液和10gNaOH溶液(要知道质量分数的),充分反应后生成水和NaCI,烘干后秤取NaCI的质量,设盐酸的质量为X,盐酸的相对分子质量/X=氢氧化钠的相对分子质量/10g乘氢氧化钠的质量分数。再求出X,X/10就好了。工业盐酸的浓度检测为:取5毫升盐酸于250ml锥形瓶

硝酸浓度检测方法

先说实验步骤吧.1、用移取量为10毫升的移液管移取10毫升用浓硝酸与水按4%的体积比配制的待测硝酸水溶液,转移到50毫升的容量瓶中,加入蒸馏水稀释到刻度,充分摇匀备用.2、另外用一支移取量为10毫升的移液管移取10毫升容量瓶中配制好的溶液到锥形瓶中,加入100毫升左右蒸馏水,摇匀,加入2至三滴石蕊试