高效液相色谱压力不稳定怎么解决
高效液相色谱仪压力不稳故障解析与检修示例压力不稳是高压液相色谱仪(HPLC)最为常见的故障,其表现: ①压力在一段时间逐渐变化(升高或降低);②压力瞬间变化(>3kg)。总结原因不外乎以下四种情况:⑴有气泡;(2)漏液;(3)单向阀不良;(4)泵工作相位不正确。 对于①这种情况:一般是在开机的一段时间内出现,往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。这些都不属于仪器问题,只要多平衡一会就会稳定。若使用的是梯度程序,由于流动相的比例正处在变化中,压力也会跟随变化。对于第②种情况:通过下面几步分析,很快就可以确定原因。 首先排除气泡因素:气泡的产生是由于流动相中溶解了空气,在泵压的作用下空气会分离出来,气泡留在泵体内排不出去,它不仅影响到流量的准确,泵压也会不稳,这时我们只要打开排废阀,利用快速冲洗功能很快就能将气泡赶出。为防止气泡产生,最好的办法就是使用在线脱气装置。没有脱气机时,流动相要经过脱气处理。超声波震......阅读全文
高效液相色谱基线噪音怎么计算
这个是通过仪器自带的软件也就是工作站来计算的,在不进样的情况下采集一段信号,然后设定一个时间范围,软件就会自动给你提供不同标准的噪声值。
液相色谱峰分叉如图,怎么解决
如果分析方法和参数和以前没有变化,新出现的问题。那就要考虑是色谱柱坏了。换一根新柱子试试,如果正常出峰就能确定了。旧柱子如果还想用的话,可以试试反冲一段时间看看(属于暴力操作)。
液相色谱的基线噪音怎么解决
1、检测池有气泡。需将检测池清洗。 2、流动相纯度不够,或流动相在使用波长下吸收大。更换纯度高的流动相或更换流动相种类。 3、检测池能量低。更换光源或光路部件。 4、仪器接地不良。重新连接地线,确定接地。
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
液相压力不稳定的原因
一、管路里有气泡,建议由流动相多走些时间。或打开排空阀,用配件里的针筒多抽几下。二、输入单向阀失效所致,这也是经常遇见的。首先如何判断输入单向阀失效。判断步骤为:A.如果是双泵梯度分析系统,故泵压力不稳必然是其中一台泵压力不稳所致,须逐个分析。1.在不开UV检测器,工作站的前提下,将其中一台泵接上蒸
制备型液相色谱压力升高怎么处理
如何手动收集组分 液相色谱 0.5ml/min一般来说液相色谱法流速用1.0ml/min的比较多。无论流速高低,都是几点:一个保证色谱峰出峰情况良好,峰型什么的。这个参数看拖尾因子、理论板数什么的,其实目测就可以。一个是保证分离。主峰前后色谱峰的分离度均大于1.5,最好达到基线分离。再有一个就是控制
制备型液相色谱压力升高怎么处理
如何手动收集组分 液相色谱 0.5ml/min一般来说液相色谱法流速用1.0ml/min的比较多。无论流速高低,都是几点:一个保证色谱峰出峰情况良好,峰型什么的。这个参数看拖尾因子、理论板数什么的,其实目测就可以。一个是保证分离。主峰前后色谱峰的分离度均大于1.5,最好达到基线分离。再有一个就是控制
液相色谱柱压力高怎么办
柱子有堵的现象吧,有以前的样品和流动相的纯度有关。建议用双蒸水与甲醇(HPLC专用)分别冲洗2小时以上,重新活化色谱柱,如果不行,估计柱子就够呛了,只能是用一次赚一次了。
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的液相色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1.调整流动相比例:检测使用的液相色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2.调整流动相的pH值:流动
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1、调整流动相比例:检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2、调整流动相PH值:流动相pH值改
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的液相色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。 1.调整流动相比例:检测使用的液相色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
液相色谱不是堵就是漏,怎么解决?
[导读] 使用液相色谱仪的小伙伴肯定会遇到漏气和漏液的状况,流动相是造成液相色谱各种问题的最主要源头。液相色谱最常见的故障一是堵,二是漏。今天就这两部分别展开讨论(流动相以甲醇为例,色谱柱以C18为例) 。使用液相色谱仪的小伙伴肯定会遇到漏气和漏液的状况,流动相是造成液相色谱各种问题的最主要源头。液
液相色谱基线不稳噪音大怎么解决?
基线噪声(常规)导致分辨率1.流动相中的空气,检测器或泵流动相脱气 冲洗系统,从检测器或泵中排出空气2. 检查管接头是否松动泵是否漏液是否有盐沉淀和异常噪音。必要时更换泵密封件。3.流动相3的不完全混合。用手摇匀,或使用低粘度溶剂4。温度影响(色谱柱温度过高,检测器未加热)4.减少差异或增加热交换
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)
附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
高效液相基线漂移至负值要怎么解决
高效液相色谱仪基线漂移的原因 ①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) ③流通池被污染或有气体 ④检测器出口阻塞。(高压造成流通
高效液相色谱体系的可承受的压力范围
不同型号设备设计承受压力不同,目前常见液相色谱仪器耐压有逐渐升高趋势,例如安捷伦已将其液相色谱仪器耐压提高至600bar,其他厂商也有类似举动。
高效液相色谱体系的可承受的压力范围
AGILENT1100/1200可承受的压力范围是0~400bar.Waters可承受的压力范围是0~400bar.DIONEX可承受的压力范围是0~350bar.
液相色谱柱柱压升高,怎么分段排查,怎么解决
液相色谱系统中反映在泵上的压力一般指的是柱压,如果柱压升高,首先判断是否是色谱柱造成的,最简单的办法是:拆掉色谱柱,如果压力将为零(或者接近零,有的系统本身有一定的压力),说明是色谱柱产生的,如果压力异常,就可以判定为柱前系统中堵塞了。
高效液相色谱已知峰面积怎么求含量
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份的峰面积。然
高效液相色谱回收率怎么做
相同的样品取两份,其中一份加入定量的待测成分标准物质;两份同时按相同的分析步骤分析,加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果,其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率。 加标回收率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法, 给定了一个理论公式: 加标
高效液相色谱回收率怎么做
相同的样品取两份,其中一份加入定量的待测成分标准物质;两份同时按相同的分析步骤分析,加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果,其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率。 加标回收率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法, 给定了一个理论公式: 加标
高效液相色谱已知峰面积怎么求含量
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份的峰面积。然