高效液相色谱压力不稳定怎么解决
高效液相色谱仪压力不稳故障解析与检修示例压力不稳是高压液相色谱仪(HPLC)最为常见的故障,其表现: ①压力在一段时间逐渐变化(升高或降低);②压力瞬间变化(>3kg)。总结原因不外乎以下四种情况:⑴有气泡;(2)漏液;(3)单向阀不良;(4)泵工作相位不正确。 对于①这种情况:一般是在开机的一段时间内出现,往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。这些都不属于仪器问题,只要多平衡一会就会稳定。若使用的是梯度程序,由于流动相的比例正处在变化中,压力也会跟随变化。对于第②种情况:通过下面几步分析,很快就可以确定原因。 首先排除气泡因素:气泡的产生是由于流动相中溶解了空气,在泵压的作用下空气会分离出来,气泡留在泵体内排不出去,它不仅影响到流量的准确,泵压也会不稳,这时我们只要打开排废阀,利用快速冲洗功能很快就能将气泡赶出。为防止气泡产生,最好的办法就是使用在线脱气装置。没有脱气机时,流动相要经过脱气处理。超声波震......阅读全文
高效液相色谱中,压力波动大是什么原因
原因:泵漏液;有气泡;单向阀不稳;泵相位工作不正确。解决方法:有气泡,可以打开排空阀,用色谱配件里的针筒抽几下,把气泡抽出来。单向阀问题,可以将单向阀取下,超声去杂质等,若不行再换新的。泵漏液的原因,逐一排除漏液位置,然后对漏液位置进行修补。
高效液相色谱中,压力波动大是什么原因
原因:泵漏液;有气泡;单向阀不稳;泵相位工作不正确。解决方法:有气泡,可以打开排空阀,用色谱配件里的针筒抽几下,把气泡抽出来。单向阀问题,可以将单向阀取下,超声去杂质等,若不行再换新的。泵漏液的原因,逐一排除漏液位置,然后对漏液位置进行修补。
高效液相色谱检验法测定时泵压力上不去
高效液相色谱是现在食品实验室中应用非常广泛的一款仪器,但是还有很多小伙伴对它的原理、使用维护等知识不太了解。今天小编就从HPLC概述、工作原理、结构组成、常见故障及维护、HPLC应用等方面来给大家科普下HPLC的基础知识。1高效液相色谱法概述高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的
多种方法检测高效液相色谱泵的压力
高效液相色谱泵是每台高效液相色谱分析仪的核心部件。其用途是在色谱分离过程中产生恒定的流量。为了对高效液相色谱泵的工作情况进行监控,可以采用多种不同的压力检测方法。 在压力下干起活来更有劲——几乎没有任何领域比液相色谱分析技术领域更适合这句话了。但在色谱分析中,压力并不能真实地反应分离性能,
高效液相色谱中,压力波动大是什么原因
原因:泵漏液;有气泡;单向阀不稳;泵相位工作不正确。解决方法:有气泡,可以打开排空阀,用色谱配件里的针筒抽几下,把气泡抽出来。单向阀问题,可以将单向阀取下,超声去杂质等,若不行再换新的。泵漏液的原因,逐一排除漏液位置,然后对漏液位置进行修补。
高效液相色谱柱前保护柱具体怎么用
使用时应该用对应的保护柱,如C18柱用C18的保护柱。第一次使用时先冲洗干净保护柱,再连接到柱子上。保护柱的填料和柱子一样,所以也有一定的分离作用,但是会增加死体积。保护柱一般不会损坏柱子,柱子损坏先看是不是你使用不当造成的,例如C18柱不宜用PH大于7的流动相和纯水系流动相。
高效液相色谱柱前保护柱具体怎么用
提高液相色谱柱效的方法有:改进柱填料、改变色谱条件(温度和流速)等。主要还是改进柱子本身的方法最为主要,不过这个色谱柱生产商考虑的肯定更多,我做QC的就不用管那么多了。另外,如果柱效下降,保存之后换下来放置一段时间也可以恢复一部分柱效。
高效液相色谱柱前保护柱具体怎么用
使用时应该用对应的保护柱,如C18柱用C18的保护柱。第一次使用时先冲洗干净保护柱,再连接到柱子上。保护柱的填料和柱子一样,所以也有一定的分离作用,但是会增加死体积。保护柱一般不会损坏柱子,柱子损坏先看是不是你使用不当造成的,例如C18柱不宜用PH大于7的流动相和纯水系流动相。
高效液相色谱柱长度和口径要怎么选择?
长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。内
高效液相色谱标准曲线的线性范围怎么确定
绘制高效液相色谱的标准曲线的方法如下:精密取相应对照品,加适当的溶剂溶解,分别精密量取1、2、3、4、5ml(或相应成梯度的量),稀释成各个梯度的溶液,注入液相色谱仪,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作能直接绘
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
高效液相色谱与超高效液相色谱条件有什么差异
原理是一致的。不同的地方一个是仪器,一个是色谱柱。后者超高效液相色谱,可以缩短检测时间,节省时间,节省流动相,大大地提高了效率。先说色谱柱,超高效液相色谱柱的粒径会更小,柱子也更短。如果说样品流过液相色谱柱的感觉是流过满是石头的管路,那么超高效液相色谱柱就是装满了沙子的管路。一般液相色谱柱的粒径是5
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
超高效液相色谱相比高效液相色谱有哪些提升
超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。 超高效液相色谱法的原理与高效液相色谱法基本
葛根液相色谱峰形不好,应该怎么解决呢
调整有机相比例,看看变化趋势,如果能调开,用这个方法简单变梯度,这个最好是有经验的实验员调整调的好的话,峰型会变得很好。调整水相pH值,这个吧,如果你分不开的色谱峰是有酸碱性的官能团会比较好。不过pH值一变,所有色谱峰的保留时间都可能变色谱柱,你看看峰型,有没有拖尾。如果有的话换一根好点儿的柱子可能
液相色谱的峰面积重现性差怎么解决
1、自动进样器清洗液流路有气泡。 选择合适的清洗液并脱气,使用PURGE功能冲洗进样阀,排除气泡。 2、自动进样器进样口漏液。 在流路中进样口发生漏液时,通常是进样口密封垫损坏造成,这时需要更换进样口密封垫。 3、自动进样器流路污染。 使用清洗液清洗进样器管路。 4、色谱柱污染或劣化
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱前提条件是使用的反相色谱柱(C8、C18及其衍生等),不知道你用的什么柱子1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍(推荐值)柱体积,应考虑柱前仪器的死体积(约5-10ml),可以不接柱子大流速3-5ml/min,冲3-5分钟,然后更换流动相即可.2、使用后用可用
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱前提条件是使用的反相色谱柱(C8、C18及其衍生等),不知道你用的什么柱子1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍(推荐值)柱体积,应考虑柱前仪器的死体积(约5-10ml),可以不接柱子大流速3-5ml/min,冲3-5分钟,然后更换流动相即可.2、使用后用可用
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱
高效液相色谱在使用前怎么冲洗系统和色谱柱前提条件是使用的反相色谱柱(C8、C18及其衍生等),不知道你用的什么柱子1、一般使用前用80%的甲醇冲洗20倍(推荐值)柱体积,应考虑柱前仪器的死体积(约5-10ml),可以不接柱子大流速3-5ml/min,冲3-5分钟,然后更换流动相即可.2、使用后用可用
液相色谱没有流动相流出,又无压力指示怎么办?
可能是泵内有大量气体,这时可打开泄压阀,使泵在较大流量(如5ml/min)下运转,将气泡排尽,也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损,需更换。
液相色谱机的压力逐步上升时怎么回事
一般来说压力偏高都是系统有堵,首先需要判断堵在什么地方.1. 拆下色谱柱,用两通代替,看系统压力是多少,正常应该处于10-20bar. 如果偏高很多,说明管路堵了,需要一段一段查看.2. 如果压力正常,说明色谱柱有堵.这样需要用乙腈或者其他有机试剂冲洗, 对于某些色谱柱,可以反着冲,效果会更好些.
液相色谱机的压力逐步上升时怎么回事
根据你描述的情形来看,很可能是使用的流动相没过滤好,或者是色谱柱的前面的筛板被堵。你应当停机重新配制流动相并且换一根使用正常的柱子,待系统充分清洗后观察压力情况。如果此时柱压稳定,则系统正常。然后再换上原先使用的柱子开机观察柱子压力情况,若系统压力正常了,说明是流动相问题,如果情况没改善,那么色谱柱
液相色谱同样的条件泵压力怎么会忽高忽低
其他条件下压力也不稳定吗?那如果单向阀、密封圈等都没有问题的话,可能是系统内有异物堵了,如果仪器三几年没修过了 ,里面会有好多灰尘会不会是有气泡呢?压力波动一般会是单向阀的问题,可能里面有气泡了我最近也遇到此问题,即是做完实验用醇水冲洗柱子时,压力会忽高忽低,经常出现压力在慢慢一路下坡,走着走着突然
液相色谱机的压力逐步上升时怎么回事
一般来说压力偏高都是系统有堵,首先需要判断堵在什么地方.1. 拆下色谱柱,用两通代替,看系统压力是多少,正常应该处于10-20bar. 如果偏高很多,说明管路堵了,需要一段一段查看.2. 如果压力正常,说明色谱柱有堵.这样需要用乙腈或者其他有机试剂冲洗, 对于某些色谱柱,可以反着冲,效果会更好些.
高效液相色谱流动相选择
流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察
高效液相色谱流动相选择
流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 流动相选择 1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混
液相压力过低过高如何解决
液相色谱仪LCMS在使用久了都会出现一些问题,当然这其中比较常见的问题是柱压、压力过高过低的问题,那我们面对这三项问题故障该如何解决呢?下面小编就大家讲一下吧 1.柱压问题: 柱压问题是使用液相色谱仪LCMS过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密
色谱技术方法高效液相色谱
高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。在用