荧光技术在生物化学及分子生物学研究中的主要应用

三用紫外分析仪广泛应用于生物、化学、医药、制药、食品及法医鉴定等部门的分析、检测,可同时发出长波紫外线、短波紫外线和可见光三种波长的光辐射。该仪器广泛应用于生物、化学、医药、制药、食品及法医鉴定等部门的分析、检测。可同时发出长波紫外线、短波紫外线和可见光三种波长的光辐射。荧光技术在生物化学及分子生物学研究中应用主要包括以下几个方面: 1.物质的定性:不同的荧光物质有不同的激发光谱和发射光谱,因此可用荧光进行物质的鉴别。与吸收光谱法相比,荧光法具有更高的选择性。 2.定量测定:利用在较低浓度下荧光强度与样品浓度成正比这一关系可以定量分析样品中荧光组分的含量,常用于测定氨基酸、蛋白质、核酸的含量。3.研究生物大分子的物理化学特性及其分子的结构和构象:荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参数不仅和分子内荧光发色基团的本身结构有关,而且还强烈地依赖于发色团周围的环境,即对周围环境十分敏感。......阅读全文

常用的分子生物学基本技术2

IS PCR的技术特点 (1)既具有PCR的特异性与高灵敏性,又具有原位杂交的定位准确性;(2)测到低于2个拷贝量的细胞内特定DNA序列,甚至可检测出单一细胞中的仅含一个拷贝的原病毒DNA;(3)有助于细胞内特定核酸序列定位与其形态学变化的结合分析;(4)可用于正常或恶性细胞,感染或非感染细胞的鉴定

分子生物学的技术有哪些原理

随着生命科学和化学的不断发展,人们对生物体的认知已经逐渐深入到微观水平。从单个的生物体到器官到组织到细胞,再从细胞结构到核酸和蛋白的分子水平,人们意识到可以通过检测分子水平的线性结构(如核酸序列),来横向比较不同物种,同物种不同个体,同个体不同细胞或不同生理(病理)状态的差异。这就为生物学和医学的各

常用的分子生物学基本技术(三)

DNA序列分析(DNA sequencing) 应用各种突变检测技术检测到的基因突变,最后都需用序列分析才能确定突变类型及突变位置,其效率可以达到100%。现在的测序方法已与经典的方法有了很大的不同,其基本原理虽仍是双脱氧终止法,但自动化程度大为提高,操作更简便,测序时间也大大缩短。随着PCR技术与

分子生物学技术都包括哪些技术

  分子生物学技术:  PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA,  RNA  提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交、蓝白斑筛选、抗生素筛选  、基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的。  分子生物学的基本含义 

常用的分子生物学基本技术(四)

参考文献:[1]Donohoe GG et al. Clin Chem,1999,45(1):143~146[2]Grossman PD. Nucleic Acids Res,1994,22:4527~4534[3]Barta C et al. J Chromatogr A,1998,817(1-2

分子生物学实验室的器材

分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和zui终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?  1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。zui常使用的

微生物分子生物学检测技术

微生物分子生物学检测技术通过对不同样品微生物DNA的提取,将提取的DNA进行扩增并识别,来确定样品中微生物的多样性和种属,具有先进性和准确性,免去了烦琐、需时长的培养过程,可检出传统方法不可培养的微生物,并能原位反映微生物群落结构的真实情况。微生物分子生物学技术的建立,突破了长期以来一直采用的传统微

常用的分子生物学基本技术(四)

转基因动物的建立和应用转基因动物是以实验方法交源基因导入宿主受精卵或早期胚胎细胞染色体基因组内,使其稳定整合和遗传给后代动物。它主要采用显微注射法、逆转录病毒载体感染法、精子载体法、电转移法与胚胎干细胞法。转基因动物模型的建立,推动了肿瘤在分子水平上的研究,它使人们认识到激活的原癌基因的异常表达及功

β甘露聚糖酶的分子生物学研究

  关 于酶的分子特征和催化机制方面的研究报道还很少。吴襟等利用化学修饰的方法对诺卡氏菌形放线菌产的甘露聚糖酶的结构与功能进行了初步研究,证明了酶蛋白的巯基、酪氨酸残基及色氨酸残基是维持酶活性必需的基团。进一步研究证实蛋白内部的二硫键是影响该酶热稳定性的重要因素。Cann等从Thermoanaero

基因诊断的分子生物学基础(二)

  三、RNA分子结构  (一)RNA类型  细胞内含有三类主要的RNA,即核蛋白体RNA(Ribosomal RNA, rRNA)、转运RNA(Transfer RNA,tRNA)及信使(Messenger RNA,mRNA)。  1.rRNA。是核蛋白体的组成部分,含量最多,约占细胞内全部RNA

专题:常用分子生物学实验方法

*章 基因克隆 1. 操作流程 收集基因信息——>设计引物——>PCR ——>回收目的片段——>与载体 连接,取得连接产物 ——> 用感受态细胞做转化 ——>接菌——>阳性克隆鉴 定(酶切法或PCR)——>质粒抽提——>质粒测序——>测序结果分析——>克隆 信息输入数据库——>质粒实物保存 *章 基

分子生物学常用实验技术(page-2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

分子生物学的研究方法有哪些

分子生物学(molecular biology ):从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等。分子生物学中最基本的技术是蛋白质的表

常用的分子生物学基本技术(二)

载体 所谓载体是指携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。细菌质粒 是一种细菌染色体外小型双链环状结构的DNA,分子大小为1-20kb,对细菌的某些代谢活动和抗药性表型具有一定的作用。质粒载体是在天然质粒的基础上人工改造拼接而成。最常用的质粒是pBR322。噬菌体(phaeg) 噬菌体是感

分子生物学常用试剂的配制(二)

  15.5ml 85%磷酸(1.679g /ml)   40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)   使用时再稀释10倍。   Tris-硼酸(TBE):5×浓贮存液(每升):54g Tris 碱   27.5g 硼酸20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

细胞凋亡的分子生物学检测方法

  细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ?+和Mg?+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。DNA双链断裂或只要一

常用的分子生物学技术包括哪些

分子生物学技术:PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA, RNA 提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交、蓝白斑筛选、抗生素筛选 、基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的。分子生物学的基本含义分子生物学是从分子水

血液分子生物学检验技术及临床应用

血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性(RFLP)、转基因技术及基因芯片(DNA-chip)技术等分子生物学技术。目前这些技术已应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。(1)核酸分子杂交技术原理和方法1)South

分子生物学实验室的器材配置

分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?  1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。最常使用的有:4℃

谢晓亮JAMA畅谈单分子生物学

  当单分子遇上基因组学,它们会擦出什么样的火花?著名华人学者谢晓亮(Sunney Xie)博士围绕这个话题,在《美国医学会杂志》(JAMA)上发表了文章。谢博士现任哈佛大学化学及化学生物学系教授,也任北京大学生物动态成像中心主任。  谢博士写道,单分子成像和操作的进步导致了单分子生物学的出现。由于

利用分子生物学技术研发转基因食品

  利用分子生物学技术,将某些生物的基因转移到农作物中去,改造生物的遗传物质,使其在性状、营养品质、消费品质方面向人类所需要的目标转变,从而得到转基因农作物。以转基因生物为直接食品,作为原料加工生产的食品,以及喂养家畜得到的衍生食品,在广义上都可以称为转基因食品。因其安全性被广泛质疑,国际社会对其尚

分子生物学实验室区域的划分

一、核酸检测实验室应划分为五个独立的工作区。五个工作区应按照从清洁、半污染到污染的顺序排列。各区内的试剂和耗材不能再进入任何“上游”区域。(1)试剂配置和贮存区:本区的功能是实验相关试剂(如核算提取液、乙醇等)的配置和贮存(包括商业化的试剂,如PCR反应缓冲液、Taq聚合酶和dNTPs等)。用于PC

血液分子生物学检验技术及临床应用

血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性(RFLP)、转基因技术及基因芯片(DNA-chip)技术等分子生物学技术。目前这些技术已应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。 (1)核酸分子杂交技术原理和方法 1)So

简述梅毒相关检测方法—分子生物学检测

  近年来分子生物学发展迅速,PCR技术广泛用于临床,所谓PCR即多聚酶链式反应,即从选择的材料扩增选择的螺旋体DNA序列,从而使经选择的螺旋体DNA拷贝数量增加,能够便于用特异性探针来进行检测,以提高诊断率。但是,这种实验方法,要求有条件绝对好的实验室和技术一流的技师,而我国很少有这样高水平的实验

分子生物学实验室中有哪些仪器

分子生物学作为基因工程 的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,最常使用的有:4℃、

分子生物学实验室的器材配置

   分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?   1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。  

关于分子生物学分型方法的基本介绍

  在序列特异性引物(SSP)存在的条件下,用已知的一段DNA与从细胞核提取的DNA混合,通过PCR扩增技术可获得序列特异性寡核苷酸(SSO)。目前HLA-DNA分型均以PCR技术为基础,主要包括:聚合酶链反应寡核苷酸探针杂交(PCR/SSO)、顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR/SSP)、限制性

分子生物学实验室的器材配置

   分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?   1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱。  

血液分子生物学检验技术及临床应用

血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性(RFLP)、转基因技术及基因芯片(DNA-chip)技术等分子生物学技术。目前这些技术已应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。(1)核酸分子杂交技术原理和方法1)South

DNA提取-I:土壤的分子生物学特性

在前面的文章(Soil molecular biology),围绕提取土壤样品DNA、RNA相关问题做了简单的引导介绍,比如PCR抑制因子、裂解注意事项等。今天将详细介绍土壤微生物DNA提取的细节,以及如何使用MO BIO PowerSoil® DNA Isolation Kit获得更好的提取效果。