高效液相色谱仪的常见问题分析

常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 1、柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。 压力过高:这是高效液相在使用中常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。 (1) .首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查; (2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压......阅读全文

高效液相色谱仪的特点

高压——压力可达150~300kg/cm2。色谱柱每米降压为75kg/cm2以上。高速——流速为0.1~10.0mL/min。高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:速度快

液相色谱仪的常见问题汇总

气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过

高效液相色谱仪是用来检测分析什么的呀

高效液相色谱仪是用来检测分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物。HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点。因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪

高效液相色谱仪在环境污染分析中的应用

高效液相色谱仪在环境污染分析中的应用  环境污染是指自然地或人为地向环境中添加某种物质而超过环境的自净能力而产生危害的行为,由于人为因素是环境的构成或状态发生变化,环境素质下降,从而扰乱和破坏了生态系统和人类的正常生产和生活条件的现象。在环境分析中,高效液相色谱仪起着重要的作用,大部分有机污染物都能

高效液相色谱仪分析中保留时间变化的处理方法

  高效液相色谱仪分析中保留时间变化的处理方法:  一、保留时间缩短:  1、流速增加:检查泵,重新设定流速。  2、样品超载:降低样品量。  3、键合相流失:流动相pH值保持在3~7.5,检查柱的方向。  4、流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀。  5、温度升高:柱恒温。  二、保留时间延长: 

高效液相色谱仪分析中待测样品的制备流程

高效液相色谱仪分析中待测样品的制备流程高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变,对分析结果的干扰因素很多,为达到分析目的,样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。  一、预处理:       1、固体样品:含水较低,粉碎过筛。

高效液相色谱仪是用来检测分析什么的呀

高效液相色谱仪是用来检测分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物。HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点。因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪

高效液相色谱仪和高压液相色谱仪

高效液相色谱仪和高压液相色谱仪有什么区别液相色谱进入中国的早期,业内人士英语学得都很糟糕,望文生义,将HPLC四个字母分别理解为高的(H),P(压力presser,其实P是Performance 的首字母)L(液体),C(色谱),于是就产生了“高压液相”这一翻译不十分准确的名词。如果从色谱系统必须用

高效液相色谱仪概述

高效液相色谱仪是近几十年发展起来的一种高效、快速的分离分析技术,是现代分离检测的重要工具。高效液相色谱仪是以经典液相色谱仪为基础,引入气相色谱仪的理论和实验方法,将流动相改为高压输送,采用高效固定相和在线检测等手段,发展而成的分离分析技术。一、基本结构:由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据

高效液相色谱仪组成

  高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度

高效液相色谱仪简介

  高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中

高效液相色谱仪测定

一、引入7氨基戊酸(7ACA)是三尖杉孢子药物的重要中间体。其分子结构,在其生产过程中,除主成分7aca外。它还含有少量脱乙烷7-氨基头孢烷酸(D-7ACA)、脱乙氧基72-氨基头孢烷酸(DO-7ACA)和头孢克(CPC)。采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离测定了7CA及其有关物质的含量。

高效液相色谱仪特点

在经典色谱的基础上,高效液相色谱(HPLC)是以气相色谱法为基础的。技术上,将流动相转变为高压输送输送压力可达4.9Pa色谱柱用小粒径填料以特殊的方式填充,使柱效应比经典液相色谱(数万或数千米塔板)要高得多。同时,在色谱柱后面有一个高灵敏度的检测器,可以连续检测流出液。特点1.高压:液相色谱以液体为

高效液相色谱仪分类

高效液相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室色谱仪和工业色谱仪。2、按固定相物理状态可分:液液色谱仪和液固色谱仪。3、按分离原理可分:吸附色谱仪、分配色谱仪和离子色谱仪。4、按分离模型可分:线性色谱仪和非线性色谱仪。5、按操作压力可分:低压色谱仪、中压色谱仪和高压色谱仪。6、按结构可分:台式

​高效液相色谱仪简介

高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各

液相色谱仪使用常见问题

1、流动相不过滤 因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换

高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

1.制标准溶液,利用不同浓度与峰面积的线性关系求出浓度与峰面积的线性范围,以确定实验所用浓度的范围。这里有用到回归方程。EXCEL上可处理。2.精密度,稳定性,重现性,回收率测定用到RSD相对标准偏差的公式即标准差/均数。3.样品含量测定用到外标法4.整个实验的进行,主要是找到合适的流动相,找对了比

高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

1.制标准溶液,利用不同浓度与峰面积的线性关系求出浓度与峰面积的线性范围,以确定实验所用浓度的范围。这里有用到回归方程。EXCEL上可处理。2.精密度,稳定性,重现性,回收率测定用到RSD相对标准偏差的公式即标准差/均数。3.样品含量测定用到外标法4.整个实验的进行,主要是找到合适的流动相,找对了比

高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间,W1 W2 分别表

高效液相色谱仪定量分析法对比

高效液相色谱内标法与外标法的区别;1.方法不同内标法是在分析样品的混合物中加入一定重量的纯物质作为内标,然后对含有内标的样品进行色谱分析,分别确定内标和待测组分的峰面积和相对校正因子。外标法是在空白溶剂中加入一定量的梯度标准物质制成对照品,并与未知样品平行处理检测。2.要求不同内标法对于内标的选择要

高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间,W1 W2 分别表

高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数

色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度。计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 峰2 的保留时间,W1 W2 分别表

高效液相色谱仪(HPLC)的保养

HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃;相对湿度

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的操作步骤

   高效液相色谱仪操作步骤:   1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.   2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。   3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。   4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,

高效液相色谱仪的优点(一)

高效液相色谱仪是20世纪60年代末发展起来的分离分析技术,随着不断改进和发展,目前已成为重要的应用极为广泛的化学分离分析手段。   一、与气相色谱仪相比:  1、气相色谱仪只限于分析气体和沸点较低的化合物,仅占有机物总数的20%(分子量<200)。而高效液相色谱仪主要用于分析高沸点、热稳定性差和摩

高效液相色谱仪的分离原理

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被

高效液相色谱仪的应用介绍

高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中

高效液相色谱仪的使用问题

1. 色谱柱中的流动相会排干吗?   不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏

高效液相色谱仪的优点(二)

 二、与经典液相色谱仪相比:  1、高压:高效液相色谱仪的供液和进样压力大,压力为150×105~350×105Pa。  2、高速:分析速度比经典液相色谱仪快数百倍。由于经典液相色谱仪是重力进料,流出速度极慢。而高效液相色谱仪采用高压输液设备,流速最高可达2575px/min。  3、高效:可一次同