高效液相色谱仪的常见问题分析

常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 1、柱压问题 柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。 压力过高:这是高效液相在使用中常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。 (1) .首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查; (2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压......阅读全文

高效液相色谱仪的应用特点

高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的维护经验

一.混合溶剂必须过滤并混合,如果要混合然后过滤,则仅有可能使用有机,并且绝对不可能使用水系统由于水系统的物质是纤维素有机相或多或少会溶解少量纤维素,造成污染。二.标准样品或样品最好用流动相溶解这样就可以避免很多麻烦。三.hplc柱加热升温的目的一方面是为了增加溶质的溶解度另一方面是为了降低溶剂的粘度

高效液相色谱仪的梯度洗脱

高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物,梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动

高效液相色谱仪的优点对比

高效液相色谱仪(HPLC)是20世纪60年代末发展起来的一种分离分析技术,随着其不断的改进和发展,它已成为化学分离分析的重要和广泛应用的手段。首先,与经典的液相色谱仪比较:1.高压:高效液相色谱仪供液、进液压力高,压力150*10^5-350*10^5pa。2.高速:分析速度是传统液相色谱法的数百倍

高效液相色谱仪的原理简述

  储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓

高效液相色谱仪的应用实例

气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大

高效液相色谱仪的色谱介绍

  (high performance liquid chromatography,HPLC)也叫高压液相色谱(high pressure liquid chromatography)、高速液相色谱(high speed liquid chromatography)、高分离度液相色谱(high re

高效液相色谱仪的主要结构

高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、.分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。1.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。2.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.

高效液相色谱仪的原理特点

  高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析;    便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛;    可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等

高效液相色谱仪的检测系统

  高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。  (1)紫外检测器  该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广(如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/ml);线性范围宽;对温度和流速变化不

高效液相色谱仪的应用介绍

高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中

高效液相色谱仪的优点(二)

 二、与经典液相色谱仪相比:  1、高压:高效液相色谱仪的供液和进样压力大,压力为150×105~350×105Pa。  2、高速:分析速度比经典液相色谱仪快数百倍。由于经典液相色谱仪是重力进料,流出速度极慢。而高效液相色谱仪采用高压输液设备,流速最高可达2575px/min。  3、高效:可一次同

简述高效液相色谱仪的应用

  高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。  与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的工作原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱仪的基本操作

一、实验准备阶段需要配置好实用所需的流动相,要注意所使用的流动相不能对实验或设备造成影响或损害(比如堵塞或腐蚀)。准备好流动相之后,需要对仪器及色谱柱进行冲洗和平衡,确保仪器压力正常,基线稳定。样品填写需要经过必要的净化处理,过0.45um以下微孔滤膜确保样品是澄清溶液,并装入合适的液相色谱样品瓶待

高效液相色谱仪的操作步骤

高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或

高效液相色谱仪的工作原理

液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成

高效液相色谱仪的发展历史

1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效

高效液相色谱仪的工作原理

高效液相色谱仪的工作原理:储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出

高效液相色谱仪的假期症状

高效液相色谱仪假日综合征主要表现为泵堵塞、泵漏、显示屏不亮、击键失败等。1.由于节假日前高效液相色谱仪系统未清洗好,导致盐析或粉尘附着,导致输液泵堵塞,单向阀和滤头一般用10%甲醇水超声清洗1~2小时。基本上是可以解决的。2。泵的泄漏连接点松动,或泵的密封圈变薄,各连接点拧紧,或更换密封圈均可解决。

关于高效液相色谱仪的简介

  高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中

高效液相色谱仪的使用步骤

高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等,它是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。1

高效液相色谱仪的优缺点

  高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中

高效液相色谱仪的分离原理

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被

高效液相色谱仪的主要部件

   高效液相色谱仪主要有分析型、制备型和专用型三类。   一般由五个部分组成:  高压输液系统 —— 进样系统 —— 分离系统—— 检测系统 —— 数据处理系统  一. 高压输液系统   贮液装置、高压输液泵、过滤器、脱气装置等  1. 贮液器:贮液器用于存放溶剂。溶剂必须很纯,贮液器材料要耐腐蚀

概述高效液相色谱仪的原理

  储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓

高效液相色谱仪分析中保留时间不重现的可能原因

  高效液相色谱仪分析中保留时间不重现的可能原因:  一、确认流动相是否新鲜配制的,比例有无错误。  二、确认色谱条件是否在色谱柱使用范围内,如pH范围、温度和压力。  三、仔细观察柱前压的变化。如果压力稳定,可以判断泵系统没有问题。如果压力不稳定,通常是由于泵内有气泡造成的,一定会影响保留时间。将

高效液相色谱仪在农药残留超标分析检测中的应用

    农药是农业生产中必不可少的化学产品,农药残留超标则是农药广泛使用带来的副作用。但农药残留与农药残留超标不同,几乎所有生长过程中使用过农药的农产品都会有农药残留,但在国家标准范围内的农药残留是国家许可的,食用后对人体无害;只有农药残留剂量超过国家标准的农产品才会在食用后对人体造成伤害;在日常生