使用高效液相色谱过程中会遇到哪些柱压问题?
压力过高 这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。 (1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查; (2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查; (3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子......阅读全文
使用高效液相色谱过程中会遇到哪些柱压问题?
压力过高 这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。 (1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸
使用高效液相色谱过程中会遇到哪些基线问题?
基线漂移 一般说来,机器刚起动时,基线容易漂移,大概要半个小时的平衡时间,如果你用了缓冲溶液或缓冲盐,还有就是在低波长下(220nm)平衡时间相对会比较长,但如果你在实验过程中发现基线漂移,则你要考虑下面的原因: 1、柱温波动。解决方法:控制好柱子和流动相的温度,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温
使用高效液相色谱过程中会遇到哪些峰异常问题?
峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。 1、色谱图中未出峰。解决方法:系统未进样或样品分解;泵未输液或流动相使用不正确;检测器设置不正确;针对以上情况成因作相应调整即可。 2、一个峰
液相色谱柱使用问题
在液相色谱分析过程中,我们经常遇到的问题主要有二种,一种与液相色谱仪器本身因素有关,如液相色谱的阀门、混合器、检测器的光源以及其它的一些硬件设备。出现这类问题后,如果能找出问题根源,解决起来一般很简单,而且这类问题可以通过对仪器的精心维护来避免;而另一类问题则是分析方法本身造成的问题,如出现色谱峰形
氮气发生器在使用过程中会遇到哪些问题?
出现的状况很可能的原因纠正措施氮气发生器不运转电压低检查电源断路器故障重新设定电路断路器保险丝烧断更换保险丝主电源关闭打开氮气发生器电源开关PLC没电,低电压检查PLC故障指示器LEDs空气压力低压缩机故障线路缺陷检查线路连接氮气发生器持续运转压力设置太高降低设置压力压力开关或电连接压力表故障更换开
高效液相色谱柱的使用
高效液相色谱柱是高效液相色谱的心脏,在高效液相色谱仪的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不采取措施,将会缩短色谱柱的使用寿命,影响工作效率,并造成一定的经济损失。
使用微量水分测定仪中会遇到哪些问题?
微量水分测定仪是一种专门用来检测液体、固体以及其他微量水分的仪器。在工作使用的过程中,常常会遇到一些问题,使得检测值不准确,那么常遇到的问题有哪些呢?该如何解决? 1、待机的时候偏移太高: 可能是阳极池中的水分渗透到阳极池内,解决方法可以直接更换阳极池中的电解液,加入少量的单组分容量法卡尔菲休
高效液相色谱柱有哪些要求?
填充剂的要求 最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统
高效液相色谱柱在使用时要注意的问题
高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速
高效液相色谱柱
一、怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。 (1)硅胶基质填料: 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(
高效液相色谱柱
一、怎样选择色谱柱现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。(1)硅胶基质填料:1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,C
高效液相色谱柱使用心得
柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配 色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。 溶剂的匹配转换 色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂,如果和流
高效液相色谱柱使用心得
高效液相色谱柱使用心得:柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配色谱柱是消耗品,不是仪器原配的情况很多,如果接头和柱头深度匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长,不易拧紧而漏液;接头比柱头深度短,柱头内留有空隙而产生死体积,使谱带展宽和峰拖尾。溶剂的匹配转换色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留
高效液相色谱柱的正确使用
1.加装保护柱 保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污然,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等
液相色谱柱压升高
造成柱压升高的原因很多。一般是由于柱床内产生了异常的占位性物体,造成流体阻力加大所引起的。例如,缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内,或样品污染沉积。针对第一种情况,处理时应先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲
键合硅胶高效液相色谱柱使用中应注意哪些基本问题
首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa
键合硅胶高效液相色谱柱使用中应注意哪些基本问题
这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。第二个是
高效液相色谱柱压力的高低会可能引起哪些问题
柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。1.压力
怎样确定高效液相色谱柱的最大柱压
在不依靠色谱柱说明书给的参考值和仪器工作的常规压力范围情况下,那就是看柱效了吧。色谱柱说明书都会有。一般常用的压力200bar(20MPa)以下应该都可以。最好不要挑战极限,对色谱柱的寿命影响很大。
使用气相色谱仪会遇到哪些问题?
使用气相色谱仪会遇到哪些问题呢?问题1:为什么在空白运行中出现了我的样品组分峰?答:有可能是由于样品制备或系统清洁问题。尝试在样品和空白样品制备中使用新溶剂,并在样品清洗瓶中装上新溶剂。尝试使用新的注射器和隔垫。取出并清洗分流出口管路。在未进样情况下运行以观察仅加热色谱柱有无峰出现。问题2:什么原因
液相色谱柱使用问题解析
1对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做? 答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很
液相色谱柱使用问题解析
1.对于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做? 答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,特别是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方
液相色谱柱与高效液相色谱柱的区别
普通液相柱与高效液相柱的原理都是一致的,只不过后者是高效的可以缩短检测的时间,节省流动相,大大节省时间。普通的液相色谱柱的径口一般是是5um,高效液相色谱柱的径口一般在3.5um有的在3um甚至在1.7um,相比之下高效液相柱比普通液相柱径口更小,管长更短、柱压大,而普通液相柱承受不住高压,所以没有
材料试验机在使用中会经常遇到哪些问题?
材料试验机在使用中会经常遇到哪些问题?任何东西用久了,或大或小都会出现一些问题,如设备秀、螺丝松落、测试出现误差等一系列问题,那么,在使用过程中,有哪些问题是会经常遇到的呢。1、紧固件定锁紧:试验后产生的振动使用会有一些紧固件松动,要定时进行查看。2、丝杠、传动部分定时涂润滑油,以防产生干摩擦;3、
不锈钢风淋室在使用中会遇到哪些常见问题?
1.不锈钢风淋室风机不工作 当不锈钢风淋室不工作时,有时间去检查一下不锈钢风淋室外箱体的紧急开关是否切断,如确定切断了,用手轻轻一按,往右方旋转一下松手即可。2.不锈钢风淋室风机倒转或者不锈钢风淋室风速很小 请务必检查一下380V三相四线的线路是否反接,一般不锈钢风淋室生产厂家出
反向高效液相色谱柱使用及维护
反相高效液相色谱(RP-HPLC)是一种基于溶质表面、极性流动相和非极性固定相之间疏水作用的色谱模型。任何有机分子的结构中都有非极性疏水部分。零件越大,一般保留值越高。它广泛应用于高效液相色谱。在生物大分子的反相液相色谱(RP-LC)条件下,大多数流动相为酸性、低离子强度的水溶液,含有一定比例的有机
高效液相色谱柱的使用与维护
高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不
高效液相色谱的色谱柱
填料和流动相的组分应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。在用
高效液相色谱柱色谱条件筛选过程中应遵循哪些原则
色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小,定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是:每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法,主要有下列方法:1.归一化法当样品中所有组分能全部流出色谱柱,并在检测器上都能产生相应信号(得到色谱峰)时,常采用归一化
高效液相色谱柱色谱条件筛选过程中应遵循哪些原则
你给的条件过于宽泛,先上一个大概的选择原则:不过一般提到液相色谱的时候,一般不包括排阻色谱以及离子色谱,所以对应的分析对象的分子量要小于2000g/mol,这种情况下一般都属于分配色谱,目前分配色谱的固定相一般属于键合相,相应的色谱柱属于键合相色谱柱。比如C18色谱柱。这种情况下,选择原则一般是“相