白质印迹法检测小鼠不同器官中细胞色素C的含量
摘 要: 目的探讨细胞色素C 在不同脏器中的差异。方法采用蛋白质印迹法(Western Blot)测定小鼠肝、肾、心中细胞色素C 的含量。结果细胞色素C 含量在肝组织中最高, 心肌组织中最低。结论细胞色素C 含量具有组织器官差异性。点击这里进入下载页面：进入下载页面......阅读全文
细胞色素C过敏试验法
细胞色素C是一种辅酶，可引起过敏反应，在用药前应先作过敏试验。 （1)皮试液的配制 1)细胞色素C皮试液的标准：每毫升含细胞色素C0.75mg. 2)细胞色素C 皮试液的具体配制方法：以一支2ml细胞色素C(含15mg)为例，取出0.1ml药液，加0.9%氯化钠溶液稀释至1ml,则每毫升含
大鼠细胞色素C(Cytochrome－C)ELISA检测法
大鼠细胞色素C(Cytochrome C)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Cytochrome C 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Cytochrome C与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠Cytochrome C，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化
蛋白质印迹法
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里
蛋白质印迹法
值得一提的是，western blot这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Edwin Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southern blot，后来类似的出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个针对蛋白质，人们分别把这两种技
细胞色素C的细胞色素的基本介绍
细胞色素种类较多，可以用光谱学、血红素基团的精确结构、抑制剂的敏感度以及还原电势的大小来分辨。 根据辅基的不同，可以将细胞色素大致分为三类： 分类辅基 细胞色素a 血红素a（原血红素） 细胞色素b血红素b（甲酰血红素） 细胞色素d 二氢卟酚（Chlorin）的衍生物 细胞色素c不是根
细胞色素C的概况
本品为生物氧化过程中的电子传递体。其作用原理为在酶存在的情况下，对组织的氧化、还原有迅速的促酶作用。通常外源性细胞色素C不能进入健康细胞，但在缺氧时，细胞膜的通透性增加，细胞色素C便有可能进入细胞及线粒体内，增强细胞氧化，能提高氧的利用。 来自三羧酸循环中产生的琥珀酸辅酶A，其肽链仅有104个
细胞色素C的概况
本品为生物氧化过程中的电子传递体。其作用原理为在酶存在的情况下，对组织的氧化、还原有迅速的促酶作用。通常外源性细胞色素C不能进入健康细胞，但在缺氧时，细胞膜的通透性增加，细胞色素C便有可能进入细胞及线粒体内，增强细胞氧化，能提高氧的利用。 来自三羧酸循环中产生的琥珀酸辅酶A，其肽链仅有104个
细胞色素C的用途
1.细胞呼吸激活药。对组织中细胞的氧化、还原过程具有迅速的酶促作用。用于急救或辅助治疗中因各种原因引起的组织缺氧。对抗癌药物引起的白血球降低，四肢循环障碍，肝疾患，肾炎亦有一定的治疗作用。 2.适用于治疗由脑缺氧、心肌缺氧和其他组织缺氧引起的一系列症状。本品尚能促进受损肝细胞再生、骨髓造血机能
蛋白质印迹法分类
Western Blot显色的方法主要有以下几种：i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理
蛋白质印迹法原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——Western印迹法
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒裂解液PBSG 250考马斯亮蓝溶液NaClSDS上样缓冲液电泳缓冲液转移缓冲液丽春红染液封闭液TBSTTBS洗脱抗体缓冲液显影液定影液抗体化学发光试剂仪器、耗材高压锅玻璃匀浆器高速离心机分光光度仪-20℃低温冰箱垂直板电泳转移装置恒温水浴摇床多用脱色摇床实验步骤一、操
细胞色素C的用量用法
1. 肌注：成人每次15mg，每日1次，病重者每次30mg，每日2次，更严重者可酌情增加。儿童用量酌减。 2. 静注：每次15～30mg，每日1～2次，加25%葡萄糖液20ml混匀后，缓慢注射；亦可用5%～10%葡萄糖液或等渗盐水等稀释后静滴。 3. 粉针（冻干型）目前用25%葡萄糖液20m
细胞色素C的关系判断
亲缘关系越近的生物，其细胞色素C越相似或相同。比如人和黑猩猩。而如果在进化史上相去甚远，则其细胞色素C也相差越远，比如人和酵母菌。 鉴于细胞色素C分子在呼吸电子传递链中不可或缺的地位，其分子结构是相对保守的。但随着生物的进化，其分子组成结构也必将出现变异，只是相对于其他蛋白来说，细胞色素C分子
细胞色素C的定位检测
细胞色素C作为一种信号物质，在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下，它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中，凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液，结合Apaf-1 （apoptoticprotease activating factor-1）后启动caspase级联反应：细胞色素C/Apaf-1复合物
蛋白质印迹法的分类
显色的方法主要有以下几种：i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）
蛋白质印迹法试剂准备
1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。 2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。 3、转膜缓冲液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定
蛋白质印迹法的原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附
蛋白质印迹法的原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附
什么是蛋白质印迹法？
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
蛋白质印迹法操作步骤
试剂准备1、SDS-PAGE试剂：见电泳实验。2、匀浆缓冲液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.0ml；10%SDS 6.0ml；β-巯基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。3、转膜缓冲液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至
蛋白质印迹法的概念
蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里
蛋白质印迹法的原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附
兔细胞色素C(Cytochrome－C)ELISA试剂盒
兔细胞色素C(Cytochrome C)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗兔 Cytochrome C 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Cytochrome C与单抗结合，加入生物素化的抗兔Cytochrome C，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标
猪细胞色素C(Cytochrome－C)ELISA试剂盒
猪细胞色素C(Cytochrome C)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗猪 Cytochrome C 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Cytochrome C与单抗结合，加入生物素化的抗猪Cytochrome C，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标
小鼠细胞色素C(Cytochrome－C)ELISA试剂盒
小鼠细胞色素C(Cytochrome C)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 Cytochrome C 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Cytochrome C与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠Cytochrome C，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化
细胞色素C的物化性质
外观与性状：棕色-红色结晶粉末 熔点：300ºC 沸点：1323.5ºC at 760 mmHg 闪点：754.2ºC 稳定性：Oxidizes when exposed to air. 储存条件：-20ºC
细胞色素C的注意事项
1.可引起过敏反应，用药前需作过敏试验。 2.当停用后再用时，应再作过敏试验，阳性者禁用。 3.治疗中若一经停药，再用药时易发生休克，如发生休克，用升压药，强心药，抗组织胺药，肾上腺皮质素处理. 4.对缺氧治疗应采取综合措施。[2]
细胞色素C过敏试验方法
一、皮试液的配制 取细胞色素C（每支2ml含15mg）0.1ml加等渗盐水至1ml，每ml含0.75mg. 二、试验方法 （一）皮内试验取细胞色素C试验液0.1ml（含0.075mg），作皮内注射，观察20分钟后，判断试验结果。 （二）划痕试验取细胞色素C原液（每ml含2.5mg）1滴，
细胞色素c族的相关介绍
有c及c1都是线粒体细胞色素，二者的光谱性质十分近似，二者的辅基和与酶蛋白的联接方式都相同。c1单体分子量为38 000，c1是以多聚体存在，无论是单体还是多聚体，都不能与aa3起反应。细胞色素c是分子量最小的细胞色素，由于它的分子量小，是可溶的，容易提取纯化，所以研究比较多，对其结构也最清楚，
细胞色素C的药理作用
细胞色素C系从猪或牛心中提取而得，为生物氧化过程中的电子传递体。作用与辅酶相似。当组织缺氧时，细胞通透性增高，注射用药后，细胞色素C可进入细胞内起到矫正细胞呼吸与促进物质代谢的作用。 本品为细胞呼吸激活酶，作为组织缺氧治疗的急救用药和辅助药物,如一氧化碳中毒，安眠药中毒，初生儿假死，不可逆休克