气相色谱法中归一化定量为什么要用校正因子

由于同一检测器对不同物质的响应值不同,所以当相同质量的不同物质通过检测器时,产生的峰面积(或峰高)不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量,就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积,以计算定量校正因子。相对校正因子就是当组分i的质量与标准物质s相等时,标准物质的峰面积是组分i峰面积的倍数。若某组分质量为mi ,峰面积Ai ,则fi与Ai之积代表了质量为mi的标准物质的对应峰面积。也就是说,通过相对校正因子,可以把各个组分的峰面积分别换算成与其质量相等的标准物质的峰面积,于是比较标准就统一了。这就是归一法求算各组分百分含量的基础。......阅读全文

色谱归一化定量法

定量测量时,可根据供试品的具体情况采用峰面积法或峰高法,测定杂质含量时须采用峰面积法。1、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量(1)按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物质,分别配成溶液,精密量取各溶液,配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量注入仪器,记录色谱图。测量对照品和内

色谱仪定量分析之归一化法

色谱仪定量分析的归一化法是将样品中所有组分的含量之和定为100%,计算其中某一组分百分含量的定量方法。一、计算方法:        Ci% =(mi/m)×100% = fi′Ai/(∑fi′Ai)×100%式中:Ci%为被测组分i的百分含量。fi′为被测组分i的相对质量校正因子。Ai为被测组分i的

高效液相色谱法定量测定介绍面积归一化法

测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定,除另有规定外可为该品种项下主成分保留时间的倍数。

归一化法进行定量分析的基本条件

定量的组分必须测出其峰面积及f¢i 值。测量低含量尤其是微量杂质时,误差较大,所以测量数据尽量大一点。定量计算方法归一化法其计算公式如下:Pi % = (mi / m) · 100%= Aif¢i / (A1f¢1 + A2f¢2 + ¼+Anf¢n) · 100%式中Pi %为被测组分i的百分含量

高效液相色谱法常用的定量方法面积归一化法

  面积归一化法  按各品种项下的规定,配制供试品溶液,取一定量进样,记录色谱图。测量各峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积,计算各峰面积占总峰面积的百分率。用于杂质检查时,由于仪器响应的线性限制,峰面积归一化法一般不宜用于微量杂质的检查。  如适用,也可使用其他方法如标准曲线法等,并在品种

气相色谱中归一化法和内标法定量的优缺点

1、归一化法优点:操作方便,程序固定。缺点:归一化法要求样品条件较高,要求样品中所有组分均出峰且要求所有组分的标准品才能定量,故很少采用。范围:适合样品中各组分都能流出色谱柱,并能在色谱图中出峰,比较适合工厂定量样品组成,如果需要减少误差,可以用修正面积归一法。2、内标法优点:定量准确,精度最高,对

气相色谱中归一化法和内标法定量的优缺点

1、归一化法优点:操作方便,程序固定。缺点:归一化法要求样品条件较高,要求样品中所有组分均出峰且要求所有组分的标准品才能定量,故很少采用。范围:适合样品中各组分都能流出色谱柱,并能在色谱图中出峰,比较适合工厂定量样品组成,如果需要减少误差,可以用修正面积归一法。2、内标法优点:定量准确,精度最高,对

气相色谱法中归一化定量为什么要用校正因子

由于同一检测器对不同物质的响应值不同,所以当相同质量的不同物质通过检测器时,产生的峰面积(或峰高)不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量,就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积,以计算定量校正因子。相对校正因子就是当组分i的质量与标准物质s相等时,标准物质的峰面积是组分i

气相色谱法中归一化定量为什么要用校正因子

由于同一检测器对不同物质的响应值不同,所以当相同质量的不同物质通过检测器时,产生的峰面积(或峰高)不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量,就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积,以计算定量校正因子。相对校正因子就是当组分i的质量与标准物质s相等时,标准物质的峰面积是组分i

气相色谱法中归一化定量为什么要用校正因子

由于同一检测器对不同物质的响应值不同,所以当相同质量的不同物质通过检测器时,产生的峰面积(或峰高)不一定相等。为使峰面积能够准确地反映待测组分的含量,就必须先用已知量的待测组分测定在所用色谱条件下的峰面积,以计算定量校正因子。相对校正因子就是当组分i的质量与标准物质s相等时,标准物质的峰面积是组分i

什么是归一化

归一化是一种简化计算的方式,即将有量纲的表达式,经过变换,化为无量纲的表达式,成为纯量。 比如,复数阻抗可以归一化书写:Z = R + jωL = R(1 + jωL/R) 注意复数部分变成了纯数量了,没有任何量纲。 另外,微波之中也就是电路分析、信号系统、电磁波传输等,有很多运算都可以如此处理,既

色谱定性与定量分析(归一化法、内标法和外标法)

色谱法是根据色谱峰的面积或高度进行定量分析的。色谱定量计算方法很多,目前比较广泛应用的有归一化法、内标法和外标法。1. 归一化法如果试样中所有组分均能流出色谱柱并显示色谱峰,则可用此法计算组分含量。设试样中共有n个组分,各组分的量分别为m1,m2,……,mn,则i种组分的百分含量为: 归一化法的

色谱定量分析归一化法、内标法、外标法及标准加入法比较

  归一化法  把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。  各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。  其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。  外标法(标准曲线法、直

Western-Blot归一化看家蛋白与总蛋白

  做Western Blot的小伙伴,是不是还在为归一化方法而纠结呢?今天小编就和大家汇总一下看家蛋白和总蛋白归一化的方法。   看家蛋白归一化   使用看家蛋白的最大缺点是在样品间和不同条件下表达水平可能不一致。如使用看家蛋白进行标准化,必须先花费时间和精力来验证内参的选择。   使用看家

Western-Blot归一化看家蛋白与总蛋白

做Western Blot的小伙伴,是不是还在为归一化方法而纠结呢?今天小编就和大家汇总一下看家蛋白和总蛋白归一化的方法。看家蛋白归一化使用看家蛋白的最大缺点是在样品间和不同条件下表达水平可能不一致。如使用看家蛋白进行标准化,必须先花费时间和精力来验证内参的选择。使用看家蛋白的第二个重大挑战是它们的

面积归一化法纯度和含量的关系

1.面积归一化法得到的纯度和含量有关系,如果所有组分在你选择的检测器上都响应,且灵敏度一致(理想化状态),纯度就是含量了2.要得到含量,要有标样,内标或者外标测定的。

液相色谱法术语概念归一化法

归一化法(normalization method)一种液相色谱定量方法。试样中全部组分都显示出色谱峰时,测量的全部峰值,经相应的校正因子校准并归一化后,计算每个组分的百分含量方法。

Azure-biosystems-Western-Blot归一化实验注意事项

  上样量质控   精确对比不同泳道的条带强度。注意事项   当进行定量western blot时,需要对比不同泳道内条带的强度值,前提要对上样量质控,校正偏差,确保每个泳道上样量一致。   通常研究人员通过检测在任何情况下表达量一致的看家/结构蛋白量进行校正。   对于化学发光检测,检测两

一文了解面积归一化法计算杂质

  面积,计算各峰面积占总峰面积的百分率。  用于杂质检查时,由于峰面积归一化法测定误差大,因此,本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外,一般不宜用于微量杂质的检查。  英文:area normalization method

Azure-biosystems-Western-Blot归一化实验注意事项

Western Blot归一化上样量质控精确对比不同泳道的条带强度。注意事项当进行定量western blot时,需要对比不同泳道内条带的强度值,前提要对上样量质控,校正偏差,确保每个泳道上样量一致。通常研究人员通过检测在任何情况下表达量一致的看家/结构蛋白量进行校正。对于化学发光检测,检测两种蛋白

关于高效液相色谱面积归一化法测定介绍

  测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定,除另有规定外可为该品种项下主成分保留时间的倍数。

气相色谱测含量归一化法是怎样的

跟小学的归一化应用题一样的。 归一化法就是 把所有的峰(面积、或者高)都加起来作为一, 其中每一个峰代表的物质以峰面积或者峰高在这个1 里面的比例作为物质含量的测量方法。因此此法要求,所有的待测物都应该出峰,物质属性比较接近。 所以归一化法都是用在测量同类物质的。比如石油里的烃类

气相色谱法分析归一化法怎么计算

气相色谱分析(chromatography)是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的(固定相),另一相(流动相)携带混合物流过此固定相,与固定相发生作用,在同一推动力下,不同组分在固定相中滞留的时间不同,依次从固定相中流出,又称色层法或者层析法。按流动相可分为气相色谱(GC)和液相色谱(

高效液相色谱的面积归一化法的简介

  测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定,除另有规定外可为该品种项下主成分保留时间的倍数。

气相色谱法分析-归一化法怎么计算

气相色谱分析(chromatography)是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的(固定相),另一相(流动相)携带混合物流过此固定相,与固定相发生作用,在同一推动力下,不同组分在固定相中滞留的时间不同,依次从固定相中流出,又称色层法或者层析法。按流动相可分为气相色谱(GC)和液相色谱(

荧光定量pcr仪定量方法之绝对定量

  在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。   使用标准曲线进行绝对定量   绝对定量是通

有关物质归一化法数据和自身对照法的区别

有关物质归一化法数据和自身对照法的区别环境条件可能会有很大的变化,通常以标准偏差这样的方式来表示。分析工作范围内的不同浓度的标准物质和经添加的样品空白,通常对于一个特定的用途而协商一致的,但要求每天的曲线应该是重复的。应该注意的是参考值,确定校准直线的斜率。②再现性(reproducibility)

荧光定量PCR“相对定量”与“绝对定量”的区别

  相对定量    相对定量,顾名思义,它的结果是一个相对的值,没有单位。与谁相对呢?就是传说中的“内参基因”,又名“持家基因”,即housekeeping gene。    那为什么在相对定量里一定需要它呢?    打个比方:假如你要研究某个基因,提取完样品的RNA然后逆转录再做PCR,发现结果是

定量方法知多少绝对定量

在做qPCR实验时,我们经常会问:“你是做绝对定量还是相对定量呢?”,而定量方法的选择是取决于实验的目标。绝对定量可测定目标核酸分子的实际拷贝数,但也是最费力、最复杂的定量形式。此方法要求周密的实验方案和高度准确的标准曲线,常用于确定病毒滴度。使用标准曲线进行绝对定量绝对定量是通过样品的Cq值和标准

用面积归一化法,测得的相对校正因子不同

因为在每一次使用气相时,会因为季节、温度、仪器等外部因素影响结果的精确度,但是在同一环境下用已知量校正,再得到校正系数来计算,就会更精确比如,制定0.1mol的已知样,气相测量得到0.11,说明测得量是已知量的1.1倍;此刻如果我测得样品浓度为2.2,就要用2.2/1.1=2,为更精确的量