PCR假阴性的原因分析及解决办法
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因:引物设计不合理,酶失活或酶量不足,模板量太少,退火温度不合适,循环次数过少,产物未及时电泳检测等。解决方法有:重新设计引物,增加酶量或调换酶,增加模板量,调整退火温度,增加循环次数,及时检测扩增产物,一般在 48h 以内进行。......阅读全文
基线漂移原因分析及解决办法
原因: ①柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。) ②流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。) ③流通池被污染或有气体; ④检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生
PCR反应阴性对照也出现明显扩增的原因
反应体系组分(如,水)被污染:实验过程中,更换新的Mix或者水重复实验;标本间的交叉污染或产物污染:反应体系在超净工作台内配制,对实验室进行严格的区分,减少气溶胶污染;使用带滤芯的枪头;引物二聚体的出现:一般在35循环以后阴性对照出现扩增属正常情况,可配合熔解曲线,PCR产物的琼脂糖电泳结果进行分析
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果
假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生
如何在PCR检测过程中降低检测结果假阴性概率?
什么是PCR技术?PCR技术又称为聚合酶链式反应。是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。在新冠病毒检测中,核酸检测被定义为临床诊断的金标准,RT-PCR技术被反复提到,它是一种将RNA反转录与PCR相结合的
真空泵卡死的原因分析及解决办法
在太阳能行业当中,很多工厂会选择莱宝SV300真空泵,莱宝真空泵作为世界公认的品牌真空泵,质量也是受到客人的信奈,而在实际生产当中,为什么也是经常出现真空泵卡死的事故?要了解卡死的原因,首先我们先要了解莱宝真空泵的结构和工作原理。真空泵原理 在带有吸气阀和排气阀的圆形泵体(定子)内,装有一个偏心转
WesternBlot实验背景高原因分析及解决办法
膜没有完全均匀湿透,建议 使用100% methanol浸透膜;洗膜不充分,可以增加洗液体积和洗涤次数;电极不平衡或者加样位置偏斜,可以调整电极和加样;封闭物用量不足,可以提高封闭物浓度,孵育时保证封闭液完全浸没转印膜;封闭物使用不当,比如检测生物素标记的蛋白时不可用脱脂奶粉封闭;封闭时间不够,一般
无创产前诊断的假阳性和假阴性
尽管无创产前诊断能够让医生和患者在孕期评估胎儿非整倍体的风险,但在最近召开的美国医学遗传学和基因组学学院(ACMG)年会上,专家们提醒,有时筛查会得到假阳性或假阴性的结果。 目前,美国有四家公司提供无创产前筛查,它们分别是Ariosa Diagnostics、Natera、Sequenom
核酸检测的“假阳性”与“假阴性”指的是什么
一、概念理解。当你真的没有的时候,别人却说你有——假阳性(false positive)当你真的有的时候,别人却说你没有——假阴性(false negative)下面表格列出了四种情况,另外两张判断正确的情况分别是:你真的有,别人也说你有——真阳性(true positive)你真的没有,别人也说你
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因素也会对结果
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因
核酸检测的假阴性和假阳性是什么意思?
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔
血清瓶瓶体发暗的原因分析及解决办法
血清瓶是储存血清或各种培养基的专用容器,一般由透明度较高的PET材质经注拉吹工艺加工而成。有时我们会发现血清瓶的瓶体有发暗现象,这是什么原因造成的呢?血清培养基瓶PET处于无定型状态时,它是透明的。在50-250°C之间,PET材料将产生结晶,在低温段易形成晶核,在高温段易生长成球晶,在180°C左
离心机喘振原因分析及解决办法
离心机喘振是离心机的杀手,高速冷冻离心机和超高速冷冻离心机出现喘振的几率比较大,严重时会损坏离心机转子等配件,下面我们就来分析下离心机喘振的原因和解决方方:离心机喘振原因1.冷凝器积垢:冷凝器换热管内表水质积垢(开式循环的冷却水系统最容易积垢),而导致传热热阻增大,换热效果降低,使冷凝温度升高或蒸发
离心机喘振原因分析及解决办法
离心机喘振是离心机的杀手,高速冷冻离心机和超高速冷冻离心机出现喘振的几率比较大,严重时会损坏离心机转子等配件,下面我们就来分析下离心机喘振的原因和解决方方:离心机喘振原因1.冷凝器积垢:冷凝器换热管内表水质积垢(开式循环的冷却水系统zui容易积垢),而导致传热热阻增大,换热效果降低,使冷凝温度升高或
ELISA法测梅毒抗体假阳性原因分析及对策
梅毒血清学试验对梅毒的诊断有很大的价值,但它存在着一定的假阳性和假阴性情况,其结果一定要结合病史和临床、体格检查综合分析考虑。近年来梅毒在我国的发病率呈上升趋势。梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种性传播性疾病之一,可侵犯全身各脏器,几乎可以引起全身所有组织器官的损害和病变,导致功能障碍。梅毒螺旋体抗体
导致尿HCG假阳性的原因分析
HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋
导致尿HCG假阳性的原因分析
HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细
导致尿HCG假阳性的原因分析
应以血HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血B-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具
什么是PCR阴性?
举乙肝的例子来说:通过酶免的方法查乙肝两对半和通过荧光定量PCR的方法学查乙肝DNA小明得了肝炎,但他不知道自己得了肝炎,有一天身体不舒服或者正常体检(比如入职体检),他去看医生,临床医生怀疑他得了肝炎(肝炎有很多种比如病毒性肝炎,也就是病毒倾入他体内后由于人体的三道防线没能把病毒消灭掉,导致病毒在
尿妊娠试验假阳性原因分析
绒毛膜促性腺激素(hCG)是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素,由α和β两个亚基组成。 其中α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,β亚基则是特异的,因此一般用β-hCG 抗体来测定标本中的β-hCG。 尿妊
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid Emulsion Sensor , LES)颜色变浅,通过
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理,监测溶于培养基中的二氧化碳(CO2)的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度(PH)改变,从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料(Liquid Emulsion Sensor , LES)颜色变浅,通过照射感应器
外斐氏试验阴性的原因及检查
原因 外斐氏试验阴性的原因: 人体被立克次体感染后,血清中逐渐产生相应抗体,该抗体在发病后5~12天出现,至数月后基本消失,一般凝集价在1:160以上或病程中效价明显上升有诊断意义。我国常见的立克次体病上要为斑疹伤寒和恙虫病,流行性斑疹伤寒主要为OX19凝集价升高,恙虫病主要表现为OXK升高
气体分析仪纸带颜色变浅的原因及解决办法
原因:孔隙板的孔隙堵塞或不畅通。处理方法:检查并清洗孔隙板孔隙。
气体分析仪指示误差大的原因及解决办法
原因:增益没调准。处理方法:接上标准气,反复调整增益,使表的指示与标准气一致。
HPLC压力持续偏高原因分析及解决办法
1、流速设定过高。解决方法:将流速调整到适当数值。2、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀。解决方法:更换流动相,冲洗色谱柱。3、柱前筛板堵塞。解决方法:在允许情况下反冲色谱柱,更换筛板,更换色谱柱。4、保护柱堵塞。解决方法:清洗或更换保护柱。
气体分析仪纸带斑点重叠原因及解决办法
原因:(1)受纸轮松动;(2)斑块颜色过浅;(3)步进电机工作不正常。处理办法:(1)拧紧受纸轮的制动螺钉;(2)增大空隙板的空隙尺寸;(3)更换电机。
污水提升泵不出水原因分析及解决办法
污水提升泵不出水原因一:污水泵提升泵不出水进水管和泵体内有空气(1)污水泵启动前未灌满足够的水,有时看上去灌的水已从放气孔溢出,但未转动泵轴将空气完全排出,致使少许空气残留在进水管或泵体中;(2)与水泵接触的进水管的水平段逆水流方向应用0.5%以上的下降坡度,连接水泵进口的一端为zui高,不要完全水
HPLC基线不稳的原因及解决办法
液相色谱经常会出现基线不稳定,其主要原因和解决方法大致如下: 1 高压泵的单向阀堵塞引起基线波动;解决方法:取下单向阀,用超声波在纯水中超20分钟zui右,去除堵塞物。 2 流动相中有溶解气体引起基线波动;解决方法:用超声波脱气15~30分钟或用充氮气方法脱气,一般可解决。 3 高压泵密封垫