免疫组织化学技术实验标本介绍
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。......阅读全文
免疫组织化学
· Double Peroxidase (HRP) Immunohistochemical Labeling of Trypsin-Sensitive Antigens (KPL)· Immunohistochemistry (Tyner lab)This is a
免疫组织化学
实验概要免疫组化流程实验步骤 第一天:1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min,脱蜡3、水化:100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注:以下步骤切勿让组织处于干燥状态!4
如何选择合适的内参基因进行免疫组织化学实验?
选择合适的内参基因进行免疫组织化学实验需要考虑以下几个因素:普遍表达:内参基因应在大多数细胞类型和组织中稳定且普遍表达,不受实验条件和疾病状态的显著影响。稳定表达水平:其表达量在不同的样本之间应相对恒定,不因组织类型、病理状态、个体差异等因素而发生明显变化。与目标蛋白的独立性:内参基因编码的蛋白在功
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展
用于-PCR-的模板-DNA-制备实验——含血标本
实验步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管(15 ml 管)中。2. 2000 r/min 离心 10 min。吸去血浆,用指弹匀剩余的有核细胞和红细胞,加入红细胞溶解液 10 ml 并混匀,常温下放置 30 min。红细胞溶解液配
实验室检验检测工具标本瓶
瓶主体是一个圆柱形的玻璃缸,口部有一厚边,是用以增加机械强度。筒的底部有一宽边,是用以放置平稳。盖的内壁中心有一玻璃弯钩,是用以悬挂固定标本之用。瓶体与瓶盖是用磨砂口磨合,主要是为了防止瓶内浸泡标本的防腐剂的挥发或外来灰尘侵入。根据采集标本的形状、大小或长短选择适合规格的标本瓶(或缸),因为标本瓶(
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中进行DNA复制时,BrdU可专一替代胸腺嘧啶核苷,而掺入到新复制的DNA核苷酸链中。因此只要通过两个复制周期,就可使姊妹染色单体中一条单体的DNA链中,
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
姐妹染色单体是由一个着丝点连着的并行的两条染色单体,是在细胞分裂的间期由同一条染色体经复制后形成的,在细胞分裂的间期、前期、中期成对存在,其大小、形态、结构及来源完全相同。实验方法原理5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
寄生虫标本的包装与邮寄实验
实验材料 蚊卵试剂、试剂盒 福尔马林酒精仪器、耗材 玻璃瓶塑料管木匣纸棉花塞玻片实验步骤 一、液浸标本 即用70%酒精或5%~10%福尔马林等固定液保存的标本,装于大小适当的玻璃瓶或塑料管(瓶)内,附上铅笔写的记录标签,如满保存液,不留空隙,盖紧瓶(管)塞,用蜡封口,随后,将之放于木匣内,两者之间的
关于免疫组织化学的基本信息介绍
免疫组织化学(immunohistochemistry),是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。 它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大
免疫组织化学概念和基本原理
1、概念和基本原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定位、定性、半定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性和组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物
RNA干扰实验技术介绍(二)
dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤,为研究人员节省时间和金钱(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不过这种方法的缺点也很明显,就是有可能引发非特异的基因沉默,特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示 这种情况通常不会造成影
RNA干扰实验技术介绍(一)
通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称为Dic
物理图的实验技术介绍
凝胶电泳这是分离高分子量DNA的一种电泳技术,使DNA分子处在两个相互垂直、交替更换的电场中移动,把分子量不同的DNA片段分开,可分辨50kb至200kb的DNA分子。YAC克隆YAC是由质粒pBR322、酵母的着丝粒、四膜虫rDNA的端粒、酵母的自主复制序列(ARS)以及一些选择标记基因构成。呈环
多种分析技术揭开琥珀中恐龙标本面纱
【导语】 科学家团队获得这块琥珀标本后,就开始采取多种无损成像和分析手段来研究它。中科院动物所的显微CT、北京同步辐射装置(BSRF)的硬X射线相衬CT、X射线荧光成像和X射线近边吸收谱、上海同步辐射装置的硬X射线相衬CT等都派上了用场。他们通过对CT数据的重建、分割和融合,无损得到了隐藏在羽毛
尿标本采集:标本容器准备
容器应符合以下条件:材料由不与尿成分发生反应的隋性一次性环保型材料制成;一般应能容纳50ml以上尿的容积;必须干燥、清洁,无污染物、无渗漏、无化学物质。
临床化学检查方法介绍免疫组织化学染色法介绍
免疫组织化学染色法介绍: 免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多
常用免疫组织化学方法的原理免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金
酶免疫组织化学技术的组织处理有什么要求呢
主要用于标本中抗原(抗体)的定位和定性检测。常用的标本有组织切片、组织印片和细胞涂片等。该技术染色标本可长期保存,可用普通光镜观察结果,可观察组织细胞的细微结构等优点,尤其是非标记抗体酶免疫组化法的敏感性更优于荧光免疫技术
标本瓶的使用方法介绍
根据采集标本的形状、大小或长短选择适合规格的标本瓶(或缸),因为标本瓶(缸)为适应标本形状的多样化而设计多种规格。标本瓶有90 多个规格,标本缸有六十多个规格,它是玻璃仪器规格最多的两个品种,因此对标本瓶(缸)的使用必须选好相适应的规格。使用时将标本瓶(或缸)洗净,把标本放入瓶内,为了使标本保持
关于脑脊液总蛋白的标本介绍
脑脊液总蛋白,在避免蒸发的条件下,CSF可在2℃和8℃保存5d。若标本5d之内不进行测定,则在收集后立刻置-20℃冷冻保存。 不同穿刺部位的CSF标本其蛋白质含量有很大差异,据报道脑室CSF总蛋白含量为50~150mg/L,脑池或腰椎穿刺CSF总蛋白含量分别为 150~200 mg/L和200
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的实验室。可用移液器人工加试剂,也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒,底部铺上
免疫组织化学简介
免疫组织化学(immunohistochemistry)又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。 它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微
免疫组织化学染色
实验概要本说明适用于没有全自动染色机或 capillary gap system(如 Shandon Sequenza)等的实验室。可用移液器人工加试剂,也适用于全自动或半自动系统。培养箱应配备有加湿器避免组织变干。变干发生在任何阶段最后都会导致非特异性染色及高背景染色。带密封盖的浅塑料盒,底部铺上
免疫组织化学简介
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原
染色体CBG标本制备实验——基本方案
实验方法原理异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部分
病毒透射电镜病毒标本制备实验2
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象,即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色,即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮,从而清楚地显示出被衬物的
浅部真菌病临床标本镜检实验
实验材料 发癣或足癣患者的毛皮皮屑甲屑试剂、试剂盒 NaOH 或KOH 溶液仪器、耗材 小刀小镜子载玻片盖玻片等实验步骤 1. 标本的采集采集足癣标本时,用小刀刮取病损边缘部皮屑,若是足趾间有病损,应选择潮湿或干裂皮屑。夹取发癣标本时,用小镊子选拔病损部位的断残头发。用过的器械应立即用火焰灭菌。2