核酸电泳的指示剂与染色剂
指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色，在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色，它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时，其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似. 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液.载样缓冲液的作用有①增加样 品密度，使其比重增加，以确保DNA均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带，可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色，使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后，需经染色后才能显现出带型，最常用的是溴化乙锭染色法，其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide，EB)是一种荧光染料，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间，在紫外线激发下，发出红色荧光.根据情况可在凝胶......阅读全文
琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测
一. 实验目的1、掌握琼脂糖凝胶电泳的原理;2、学习琼脂糖凝胶电泳的操作。二. 实验原理琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与
核酸疫苗的研究与发展
核酸疫苗的发展史真正开始于20世纪90年代。基因疫苗的分子路线在过去的20世纪中，疫苗研究取得了巨大成功，它是继柯赫、巴斯德等人的科学突破而迅速发展起来的，经历了一个由“期盼”到“实现”这样一个伟大的历史转变过程。疫苗免疫接种所经过的第一次重大变革是由Pasteur等研制开发的减毒或灭活的疫苗，第二
核酸疫苗的研究与发展
核酸疫苗的发展史真正开始于20世纪90年代。基因疫苗的分子路线在过去的20世纪中，疫苗研究取得了巨大成功，它是继柯赫、巴斯德等人的科学突破而迅速发展起来的，经历了一个由“期盼”到“实现”这样一个伟大的历史转变过程。疫苗免疫接种所经过的第一次重大变革是由Pasteur等研制开发的减毒或灭活的疫苗，第二
核酸的发现与研究历史
核酸最早于1869年由瑞士医生和生物学家弗雷德里希·米歇尔分离获得，称为Nuclein 。在19世纪80年代早期，德国生物化学学家，1910年诺贝尔生理和医学奖获得者科塞尔进一步纯化获得核酸，发现了它的强酸性。他后来也确定了核碱基。1889年，德国病理学家Richard Altmann创造了核酸这
化学试剂级别及简称宝典
常见质量级别 优级纯(GR，绿标签)：主成分含量很高、纯度很高，适用于精确分析和研究工作，有的可作为基准物质。 分析纯(AR，红标签)：主成分含量很高、纯度较高，干扰杂质很低，适用于工业分析及化学实验。 化学纯(CP，蓝标签)：主成分含量高、纯度较高，存在干扰杂质，适用于
核酸电泳—琼脂糖凝胶电泳的凝胶摄影和EB溶液的净化处理
1、琼脂糖凝胶电泳—凝胶摄影 需配置135照相机，全色135胶卷，照相机固定架，近摄镜和红色滤光镜以及有机玻璃防护面罩。 操作需在暗室进行，将相机固定好，把凝胶放在紫外检测仪上适当位置，调焦，装上红色滤光片，按常规拍照。 亦可使用凝胶自动处理系统，但仪器费用较高。 2、琼脂糖凝胶电泳—E
显微制片染色剂
染色剂3.4 苏丹Ⅲ试液 此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5 钌红试液（临用新制）此液可使粘液染成红色。3.6 间苯三酚试液 此液与浓盐酸合用，可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.7 碘试液（临用现配。应置棕色瓶内保存）此液可使淀粉染成蓝色或紫
色素试剂的定义及分类
在化学试剂中，把带有颜色或可改变颜色的一类试剂称为色素试剂，它包括了指示剂、显色剂和染色剂。酸碱指示剂是遇到酸、碱能改变试剂颜色的指示剂，主要用来指示溶液的PH值，指示酸滴定的终点，如：甲基橙、酚酞、甲基红等。这些酸碱指示剂也是一种染料，但一般染料并不能直接作为酸碱指示剂，一般要进行提纯，严格控制试
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
核酸分离与纯化的设计与原则（二）
（四）核酸的浓缩、沉淀与洗涤随着核酸提取试剂的逐步加入，以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失，样品中核酸的浓度会逐渐下降，及至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时，需要对核酸进行浓缩。沉淀是核酸浓缩最常用的方法，其优点在于核酸沉淀后，可以很容易地改变溶解缓冲液和调整核酸溶液至所
核酸分离与纯化的设计与原则（一）
第一节 核酸分离与纯化的设计与原则细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白（nucleoprotein）。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白（deoxyribonucleoprotein，DNP），RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白（ribonucleoprotein
DNA的琼脂糖凝胶电泳实验
实验方法原理 在pH值为8.0~8.3时，核酸分子碱基几乎不解离，磷酸全部解离，核酸分子带负电，在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物，在分子筛的作用下，使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大的差异，从而达到分离核酸片段检测其大小的目的。核酸分子中嵌入荧光染料（如EB）后，在
尼罗蓝染色剂的基本结构
尼罗蓝是一种化学物质，分子式是C40H40N6O2·O4S。
洋红染色剂的发展简述
1859年，人们从煤焦油染料里得到了品红色染料。其后，1860年，品红色这个名字迅速变成另一个名字：洋红色。其名之变源于发生在意大利伦巴第的“Magenta战役”，因为当时“Magenta的大地被血染”；1860年，人们从煤焦油染料里得到洋红色；1890年代，根据“减法三原色”，印出洋红色，从那时起
洋红染色剂的功能介绍
又叫胭脂红或卡红（Carmine），是从一种热带昆虫胭脂虫雌虫体内提取的天然染料。单纯的洋红不能直接染色，要和铁、铝等金属盐类媒染剂一起使用。溶于钾明矾中带正电荷，因此成为碱性染色剂。
洋红染色剂的染色配方
通常的染色配方为：（1）醋酸洋红配方：冰醋酸1体积、蒸馏水1体积、洋红饱和量。配法：冰醋酸与蒸馏水混合煮沸，加入洋红再煮20分钟。（2）明矾洋红配方：洋红1g，铵明矾或钾明矾10g，蒸馏水100mL。配法：先将明矾溶于蒸馏水，再加入洋红煮沸，冷却后加入少量防腐剂（水杨酸钠、石炭酸等）。（3）硼砂洋红
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离方法介绍
1．核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系（1）DNA分子的大小 在凝胶中，DNA片段迁移距离（迁移率）与碱基对的对数成反比，因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较，便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时，普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于
核酸定量内标与外标
众所周知，在实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）中模板的浓度对数值与结果Ct值呈线性关系，Ct值越小，浓度越高。根据所选取定量数学模型的差别，主要有外标定量法（外标法）和内标定量法（内标法）两种定量方法。这些数学模型就像特殊标记的尺子，把得到的Ct值测量为浓度值
核酸提取与纯化介绍
核酸提取是分子生物学的基本组成部分，因高质量的核酸是分子生物学上的应用至关重要。 我们将会总结一些现用核酸提取技术和针对样品类型选择正确提取方法的小建议；也会提及评估核酸浓度和质量，以及核酸提取过程中的常见问题。 a. 为什么需要核酸提取？ 核酸提取为大量广泛研究和应用提供了答案（例如：克
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
钙调素（CaM) 是普遍分布的蛋白质，参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时，CaM 获得强亲和力，结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白，启动或终止 Ca2+ 调控的信号串联。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料PRSETB 细菌表达质
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
实验材料 PRSETB 细菌表达质粒HeLa 细胞株试剂、试剂盒 苯甲基横酰基氟化物EGTA 缓冲液氯化钙缓冲液仪器、耗材 超声发生器荧光光谱仪实验步骤 本文中描述的方法涵盖了变色子在细菌及真核细胞里的克隆与表达（见 4.3.1 )，变色子的生物化学和生物物理特征鉴定（见 4.3.2 )，以及通过
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂 实验材料 PRSETB 细菌表达质粒 HeLa 细胞株
核酸样品与裂解液的比例
核酸样品与裂解液的比例 核酸样品与裂解液的比例开始样品用多大，并没有具体的讲法。假如不是样品量有限，则以能抽提出满意数次成功实验所需的核酸量，作为表决样品开始量的基础，会比较合理的。 恒温培养箱 不要由于 1ml 裂解液可以抽提100mg 样品，就一定运用100mg 样品。裂解
核酸分离与纯化的原则、步骤
磁珠提核酸 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤、磁珠法纯化DNA原理。 核酸分离与纯化的原则 核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与
核酸的分子大小与化学组成
分子大小核酸分子通常很大。实际上，DNA分子可能是已知的最大的单个生物分子。但也有比较小的核酸分子。核酸分子的大小范围从21个核苷酸（小干扰RNA）到大染色体（人类染色体是一个含有2.47亿个碱基对的单个分子 ）不等。化学组成核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖（核糖或脱氧核糖）和磷酸的混合物
核苷酸与核酸的关系
核苷酸是核酸的基本结构单位，人体内的核苷酸主要由机体细胞自身合成。核苷酸在体内的分布广泛。细胞中主要以5′-核苷酸形式存在。细胞中核糖核苷酸的浓度远远超过脱氧核糖核苷酸。不同类型细胞中的各种核苷酸含量差异很大，同一细胞中，各种核苷酸含量也有差异，核苷酸总量变化不大。
DNA的琼脂糖凝胶电泳
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
DNA的琼脂糖凝胶电泳
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳（agarose－gel－electrophoresis）
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
检测人员须知的常识：化学试剂级别及简称汇总
化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质，是科技进步的重要条件，广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析，可以说是化学工作者的眼睛，在工厂、学校、医院和研究所的日常工作中，均离不开化学试剂。化学试剂的品种繁多，分类方法国际上尚未有统一的规定。 可是，如果你不知道化学试剂的分类，那么可能会