单克隆抗体技术的基本流程
单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故可在HAT选择培养基中存活和增殖。......阅读全文
单克隆抗体技术的医学应用
利用单抗进行疾病的诊断目前主要表现在人类疾病和畜禽传染病的诊断方面,尤其在一些感染性疾病和肿瘤的诊断方面。主要通过鉴定病原体或肿瘤抗原来诊断人是否感染相应疾病。目前利用单抗对疾病进行治疗已取得了很大的成果,主要是将单抗同药物耦联,再与病原体或肿瘤的特异抗原结合后发挥作用。
单克隆抗体的基本内容介绍
1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细
PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高(500
PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高(500
PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。 根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高
PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高(500
PAM沉淀的技术流程
PAM沉淀的技术流程沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮
PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。 根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高
纸电泳的基本操作流程
(1) 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0) 取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。(2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不低于4,置60℃烘箱烘干,备用。
气相色谱的基本流程
从图中可以看出,气相色谱仪通常由以下五个部分组成:1)气源和载气的控制和测量(1)气源气源多采用高压瓶(氢、氮、氩等)做高纯气的储存器,并装有减压阀,使高压气体减压 成低压气体(0.1-O.5MPa)以供使用。钢瓶供给的气体称为流动相,又称载气。载气的作用 主要是把样品输送到色谱柱和检测器中
显微镜操作法-单克隆抗体制备流程
在直径6cm培养皿中,加入1ml1.0×108细胞悬液放置5%CO2饱和湿度,37℃温箱中放置30min以上,倒置显微镜下,寻找那些与周围相距甚远的单个细胞,将毛细管口(一头有直角弯头毛细管,一头连接一尺长乳胶管,用口控制液体进入)水平置放于液面上,左右微动,直到看见管口,对准细胞,吸入毛细管,将管
单克隆抗体制备技术
单克隆抗体制备技术 单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop) 第一章: 小鼠免疫 第二章: 细胞融合 第三章: 细胞建株 第四章: 细胞株鉴定 第五章: 腹水制备 第六章: 抗体纯化和鉴定(略) 第一章. 小鼠免疫(BALB
单克隆抗体制备技术
单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop)第一章.小鼠免疫(BALB/c)小鼠免疫是单抗制备的关键一环,质控小鼠免疫是制备优质单抗的唯一保证。一.小鼠免疫分两程方案:根据免疫学原理小鼠免疫方案设计如下:1.短程免疫方案:第一次: 1d 100ug(可溶性Ag)+等体积完全佐剂. 腹
单克隆抗体制备技术
单克隆抗体制备技术 单克隆抗体制备标准化操作方案(McAb-sop) 第一章: 小鼠免疫 第二章: 细胞融合 第三章: 细胞建株 第四章: 细胞株鉴定 第五章: 腹水制备 第六章: 抗体纯化和鉴定(略) 第一章. 小鼠免疫(BALB
单克隆抗体的纯化技术操作步骤
从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体,不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定,须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀,进行初步浓缩和纯化;可用亲和层析法进一步纯化。一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前,一般均需对腹水进行预处理,目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以
单克隆抗体技术的临床应用介绍
单克隆抗体技术在临床应用中为疾病的诊断、治疗提供了新手段,作为治疗用药物,单克隆抗体主要应用于肿瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等领域。单克隆抗体也可用于肿瘤的导向治疗,将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗或放疗药物连接,利用单克隆抗体的专一性识别结合特点,将药物携带至靶细胞并直接将其杀
单克隆抗体技术的临床应用介绍
疾病诊断 利用单抗进行疾病的诊断目前主要表现在人类疾病和畜禽传染病的诊断方面,尤其在一些感染性疾病和肿瘤的诊断方面。主要通过鉴定病原体或肿瘤抗原来诊断人是否感染相应疾病。 疾病治疗 目前利用单抗对疾病进行治疗已取得了很大的成果,主要是将单抗同药物耦联,再与病原体或肿瘤的特异抗原结合后发挥作
射线探伤基本操作流程
透照操作应严格遵守工艺规定,操作程序、内容及有关要求简述如下:试件检查及清理试件上如有妨碍穿透或妨碍贴片的附加物,如设备附件、保温材料等,应尽可能去除。事件表面质量应经外观检查合格,如表面不规则状态可能在底片上产生掩盖焊缝中缺陷的图像时,应对表面进行打磨休整。 划线按照工艺文件规定的检查部位、比
人源单克隆抗体的基本信息
中文名称人源单克隆抗体英文名称humanized monoclonal antibody定 义借助基因工程技术扩增出鼠抗体轻、重链可变区,或将抗体VH和VL序列进行人工合成或定点突变,然后与表达载体中人免疫球蛋白恒定区拼接后所制备的单克隆抗体。具有鼠源单抗的特异性,又基本消除了鼠源单抗的免疫原性。
概述PAM沉淀的技术流程
沉淀是发生化学反应时生成了不溶于反应物所在溶液的物质。从字意上理解就是在重力作用下沉淀去除。污水中的悬浮物质,可以这是一种物理过程,简便易行,效果良好,是污水处理的重要技术之一。 根据悬浮物质的性质、浓度及絮聚丙烯酰胺凝性能,沉淀可以分为:自然沉淀,絮凝沉淀,区域沉淀。域沉淀的悬浮颗泣浓度较高
细胞检测技术的流程分享
细胞检测技术的流程会因具体的检测方法和目的而有所不同,但通常包括以下几个主要步骤:样本采集根据检测的需求,从患者(如血液、组织、脑脊液等)或细胞培养体系中收集细胞样本。样本预处理对于血液样本,可能需要进行红细胞裂解以富集白细胞。组织样本通常需要进行消化处理,将细胞分散。细胞培养样本可能需要离心收集细
单克隆抗体技术的克隆化的内容
从原始孔中得到的阳性杂交瘤细胞,可能来源于二个或多个杂交瘤细胞,因此它们所分泌的抗体是不同质的。为了得到完全同质的单克隆抗体,必须对杂交瘤细胞进 行克隆化。另一方面,杂交瘤细胞培养的初期是不稳定的,有的细胞丢失部分染色体,可能丧失产生抗体的能力。为了除去这部分已不再分泌抗体的细胞,得到分泌 抗体
水浴锅的使用基本流程
(1) 水浴锅使用时必须先加适量的洁净自来水于锅内,也可按需要的温度加入热水,以缩短加热时间。 (2)接通电源,选择温度。 配备电子式恒温器时,将“温度旋钮”顺时针调节到所需要的温度,此时为加热状态,绿色指示灯亮。当加热到所需温度时,红色指示灯亮,此时为恒温状态。 配备数显表头时,计数器
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
聚焦单克隆抗体药物技术瓶颈
抗体是由B细胞转化而来的浆细胞分泌的,每个B细胞株只能产生一种它专有的、针对一种特异性抗原决定簇的抗体。这种从一株单一细胞系产生的抗体就叫单克隆抗体(McAb),简称单抗。第一代单抗来自于Koehler和Milstein于1975年开发出的杂交瘤(hybridoma)抗体技术:在细胞融合技术的基
单克隆抗体技术:饲养层细胞
在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细
单克隆抗体技术:细胞融合
融合剂 细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与
单克隆抗体技术:细胞融合
实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳
单克隆抗体技术:抗体检测
用检测抗体的方法从杂交细胞中筛选出生产指定抗体的杂交株是很重要的。检测抗体的方法很多,从沉淀反应到放射免疫测定。由于细胞培养液中的抗体浓度通常是很低的,而且传统的检测方法多是以多价抗原与多克隆抗血清相反应。杂交瘤产生的抗体则是单克隆的,所以并不是每项方法都能适用。一定要选择敏感的、快速的、一次又能检