生物样本蛋白质的提取

由于大部分蛋白质都能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液,所以蛋白质的提取一般是以水溶液为主,其中盐溶液和缓冲溶液对蛋白质的稳定性好、溶解度大,是提取蛋白质最常用的溶剂。当细胞粉碎后,用盐溶液或缓冲溶液提取蛋白质时,应注意以下一些条件。(1)盐浓度常用等渗盐溶液,尤其以0.02~0.05mol/L磷酸缓冲溶液和碳酸缓冲落液、0.15mol/L氯化钠溶液应用较多。但有些蛋白质在低盐浓度下溶解度较低,需用浓度较高的盐溶液,如脱氧核糖核蛋白需用1mol/L以上的氯化钠溶液提取;而另一些蛋白质则在低盐浓度溶液或水中溶解度较高,如某些霉菌中的脂肪酶用水提取效果更好。因此,在用水溶液提取蛋白质时,需根据所要提取的蛋白质来选择不同种类和不同浓度的盐溶液。(2)pH值由于蛋白质的溶解度和稳定性与pH值关系很大,因此pH值的选择对蛋白质的提取十分重要。提取蛋白质时,提取溶液的pH值应选定在该蛋白质的稳定范围,在该蛋白质等电点的两侧,提取碱性蛋白质时要选在......阅读全文

生物样本蛋白质的提取

由于大部分蛋白质都能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液,所以蛋白质的提取一般是以水溶液为主,其中盐溶液和缓冲溶液对蛋白质的稳定性好、溶解度大,是提取蛋白质最常用的溶剂。当细胞粉碎后,用盐溶液或缓冲溶液提取蛋白质时,应注意以下一些条件。(1)盐浓度常用等渗盐溶液,尤其以0.02~0.05mol/L磷酸缓冲溶

生物样本DNA的提取

DNA的提取DNA主要存在于细胞核中,绝大数以脱氧核糖核蛋白形式存在。以1mol/L氯化钠溶液提取,将得到的脱氧核苷酸核蛋白黏液与含少量辛醇和戊醇的氯仿一起摇荡,除去蛋白质。

生物样本细胞的提取

1.细胞的破碎当待测组分(主要是各种多肽激素、各种酶以及各种基因工程的产物如胰岛素、生长激素等)存在于生物体细胞内及多细胞生物组织中时,需在分析测定之前将细胞和组织破碎,使这些待测组分充分释放到溶液中去,不同的生物体或同一生物体的不同组织,其细胞破碎的难易程度不一样,使用的方法也不完全相同。如动物胰

体液样本核酸提取纯化

无细胞体液包括:血浆或血清,脑脊液 ,尿液,其他无细胞体液,细胞培养上清液。QIAamp Viral RNA Mini Kit —— 从无细胞体液中纯化病毒 RNA1)快速纯化高品质病毒 RNA(见图 1)2)无需有机提取或乙醇沉淀3)重复性好,产量高4)完全去除污染物和抑制剂图1 扩增血浆中的RN

生物样品的前处理技术蛋白质的提取

由于大部分蛋白质都能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液,所以蛋白质的提取一般是以水溶液为主,其中盐溶液和缓冲溶液对蛋白质的稳定性好、溶解度大,是提取蛋白质最常用的溶剂。当细胞粉碎后,用盐溶液或缓冲溶液提取蛋白质时,应注意以下一些条件。(1)盐浓度常用等渗盐溶液,尤其以0.02~0.05mol/L磷酸缓冲溶

稳定输出,样本DNA提取案例分享

最近实验室的师兄师姐们反馈,试用了MP的两款柱膜法新品试剂盒(SPINeasy DNA Kit for Soil和SPINeasy DNA Kit for Feces)都得到比较理想的实验数据,问了一圈身边的科研小伙伴们,认为操作简便,提取DNA纯度高、收率好的试剂盒为优先考虑购买的上上之选

临床样本核酸提取全攻略

¤ 临床检验样本RNA的提取人和动物全血、血清、血浆、脑脊液、人淋巴细胞中提取总RNA或病毒RNA——血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)货号:RP4001  700元/50次血清、血浆、全血(或其他含病毒的液体)中同时提取病毒基因组和RNA——病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒(

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤 一、化学法和酶法细胞裂解 微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进

生物样本库的现状

  早在1994年中国科学院就建立了中华民族永生细胞库,而后,山东省脐带血造血干细胞库、北京脐带血造血干细胞库、泰州(复旦)健康科学研究院、SBC芯超生物银行等专项生物标本资源库也相继建立,所以我国生物样本资源库与欧美相比,起步时间并不算晚。  2003年我国启动了国家自然科技资源共享平台建设项目,

生物样本库的定义

  生物样本库  根据经济合作与发展组织(OECD)的定义,”生物样本库(Biobank)是一种集中保存各种人类生物材料(Human biological material),用于疾病的临床治疗和生命科学研究的生物应用系统”。  类型  生物样本库(Biobank)有多种类型,常见的组织、器官库(T

生物样本的概念介绍

生物样品通常是指动物(包括人)的体液(如尿血、唾液、胆汁、胃液、淋巴液及生物体的其他分泌液等)、毛发、肌肉和一些组织器官(如胸腺、胰腺、肝、肺、脑、胃、肾等)以及各种微生物。生物样品常有动物体内的药物及代谢产物、糖类及有关化合物、脂类及长链脂肪酸化合物、维生素及辅酶类化合物、核苷、核苷酸及其衍生物、

生物样本库的价值

  在和大量客户接触和交流的过程中,发现越来越多的临床科研工作者意识到样本资源对于科研工作的重要性,开始重视临床生物样本的大量收集和规范化管理工作,一个优秀的生物样本库信息化管理体系的建立,将带来以下价值:  整体科研  即从短期、中期和长期三个阶段来规划本单位的科研目标,明确各个阶段可以采用的科研

生物样本库的推广势在必行如何安全存储和管理生物样本

  1. 标准化样本处理  生物样本种类繁多(主要分为5大类:组织样本、血液样本、核酸和蛋白质样本、冻存的细胞样本、组织切片和组织芯片),对样本进行标准化处理是构建样本库最重要也是最核心的一样工作。  1) 样本处理是对样本进行必要的分割、分装和处理,以使样本满足储存和将来使用的质量要求。样本的处理

生物样本库类型

  生物样本库(Biobank)有多种类型,常见的组织、器官库(Tissue bank),如血液库、眼角膜库、骨髓库,到拥有正常细胞、遗传突变细胞、肿瘤细胞和杂交瘤细胞株(系)的细胞株(系)库,近年来出现了脐血干细胞库、胚胎干细胞库等各种干细胞库以及各种人种和疾病的基因组库(Genome bank)

蛋白质的蛋白质的提取技术

选择材料及预处理   以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方

不同来源的样本miRNA(microRNA)如何提取?

 如何提取小小的miRNA(microRNA),各大生物技术公司均推出了自己的试剂盒,国内知名核酸纯化公司百泰克针对不同来源的样本亦推出了一系列拥有自己独特技术的miRNA(microRNA)提取试剂盒!       miRNA(microRNA)的成功提取依赖于样本中核酸的充分裂解和释放,有没有一

不同来源的样本miRNA(microRNA)如何提取?

如何提取小小的miRNA(microRNA),各大生物技术公司均推出了自己的试剂盒,国内知名核酸纯化公司百泰克针对不同来源的样本亦推出了一系列拥有自己独特技术的miRNA(microRNA)提取试剂盒!miRNA(microRNA)的成功提取依赖于样本中核酸的充分裂解和释放,有没有一种试剂盒能够针对

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验(一)

一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验(三)

四、细胞裂解的流程、试剂和技巧下文所述的以细胞提取物的产品质量为出发点的各种策略和指导方针适用于大多数下游纯化及分析过程。尽管介绍的重点是在小规模或较大的实验室规模的大肠杆菌裂解上,但是一些技术还是可以用于其他来源的细胞裂解和细胞内蛋白质提取,并且是可以放大的。广泛的蛋白质纯化方面的文献为这里列出的

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验(二)

二、机械法裂解细胞超声和高压裂解已经被高效地应用于微生物、植物和动物细胞的裂解。这些方法已经采用了几十年,其设备和原理已经被详细阐明(Harrison,1991;Hopkins,1991;Mid-delberg,1995)。超声裂解是通过调谐的探头或机臂的共鸣(15~25kHz) 所引发的髙

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验(四)

小规模大肠杆菌细胞裂解规程1.去垢剂为基础的裂解试剂10 mL 裂解试剂溶液的配方:10 mLB-Per 或 BugBuster,20/iLLysonaseBioprocessingReagent。如果需要减少蛋白质水解和增加目标蛋白质可溶性及稳定性可以添加,如 EDTA、蛋白酶抑制剂、

生物芯片生物样本的制备方法

分离纯化、圹增、获取其中的蛋白质或DNA、RNA并用荧光标记, 才能与芯片进行反应。用DNA芯片做表达谱研究时,通常是将样品先抽提MRNA,然后反转录成CDNA。同时掺入带荧光标记的dCTP或dUTP。

蛋白质如何提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利

蛋白质如何提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利

如何提取蛋白质?

  对于每个大肠杆菌表达的目的蛋白,确定其产生、定位及估计培养基或细胞中的产量都相当重要。为了简化确定工作,通常对总细胞蛋白及培养液、周质、可溶胞质和不溶胞质部分进行小规模分析。分析的结果有利于诱导条件优化或确定大规模诱导条件,以及采用合适的蛋白抽提方法用来纯化目的蛋白。下面简单的介绍总细胞蛋白的提

常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化

20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织完全去除污染物和抑制剂可在 QIAcube 上进行自动化纯化表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量样

生物样本库的识别跟踪

  a) 提取、分装后的样本应能通过信息系统追溯到原始样本并与其信息相关联;  b) 每份样本在信息系统中应有且仅有唯一一个或者一组识别符号(数字或条形码);  c)样本从采集到处理、储存、配送运输、使用后剩余返回重新储存等的全过程都应被有效记录;  d) 生物样本的转移应被及时记录,信息系统能追溯

蛋白质提取的方法总汇

1、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,样品制备完成

蛋白质的提取方法介绍

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利