快速蛋白液相色谱(FPLC)简介
FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统，FPLC为近年来的一项重要革新，其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持，并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来，其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展，有薄壳型填料和双扩散灌流型填料两种新型填料出现了，对于分离大分子物质，它们的优越性独特，从而大大拓展了FPLC的应用领域。其能够进行蛋白的含量的测定以及蛋白的分子量的确定，能够分离纯化蛋白、有机化合物，所以其在生物学领域和化学领域的研究可以得到使用。 近些年以来，在HPLC基础上发展出了新型色谱技术，包括低压液相色谱(LPLC)、中压液相色谱(MPLC)以及快速蛋白液相色谱(FPLC)，在这些新型色谱技术当中，快速蛋白液相色谱(FPLC)可以非常迅速地分离复杂混合物，能够在短时间内对大量样品加以纯化。其特性表现为较大的容量、较高的回收效率以及不易失活......阅读全文
高压液相色谱
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid Chroma
液相色谱原理
液相色谱原理是一种物理分离技术。1、液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。2、经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此
液相色谱原理
高效液相色谱（HPLC）的原理：以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气
液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪，具有常规HPLC的基本性能，并扩展了更多智能化的功能，能很好的满足用户的各类不同的应用要求，使用户能更加轻松的使用，并获得准确的分析数据。一、原理：高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论，色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化，对分
正相液相色谱方法
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽，氰基柱通常是首选；与氰基柱相比，硅胶柱可获得更大的值，适合于异构体和疏水性溶质的分离，但分析时必须严格控制流动相中水含量，也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差，仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用；氧化铝
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
液液分配色谱仪固定相与流动相简介
液液分配色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相中分配系数的差异进行分离。两相中有一相是固定的，称为固定相。有一相是流动的，称为流动相。一、固定相：固定相有载体和固定液组成。由于流动相参与选择竞争，因此对固定液的选择比较简单，只需使用几种极性不同的固定液即可解决分离问题。为了更好解决固定液在载体上的
液液分配色谱仪固定相与流动相简介
液液分配色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相中分配系数的差异进行分离。两相中有一相是固定的，称为固定相。有一相是流动的，称为流动相。一、固定相：固定相有载体和固定液组成。由于流动相参与选择竞争，因此对固定液的选择比较简单，只需使用几种极性不同的固定液即可解决分离问题。为了更好解决固定液在载体上的
液液分配色谱仪固定相与流动相简介
液液分配色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相中分配系数的差异进行分离。两相中有一相是固定的，称为固定相。有一相是流动的，称为流动相。一、固定相：固定相有载体和固定液组成。由于流动相参与选择竞争，因此对固定液的选择比较简单，只需使用几种极性不同的固定液即可解决分离问题。为了更好解决固定液在载体上的
液相色谱柱与高效液相色谱柱的区别
普通液相柱与高效液相柱的原理都是一致的，只不过后者是高效的可以缩短检测的时间，节省流动相，大大节省时间。普通的液相色谱柱的径口一般是是5um，高效液相色谱柱的径口一般在3.5um有的在3um甚至在1.7um，相比之下高效液相柱比普通液相柱径口更小，管长更短、柱压大，而普通液相柱承受不住高压，所以没有
液相色谱薄层色谱联用
薄层色谱在有机分析，特别是药物分析，和样品的分离纯化中得到广泛的应用。气相色谱和薄层色谱的联用比较简单，早在20世纪60-70年代就有商品仪器介绍，主要是气相色谱分离分析后，利用薄层色谱帮助定性。而用薄层色谱预分离后再用气相色谱进行分离分析也是很方便可行的，故对气相色谱和薄层色谱的联用在此就不多作介
快速了解气相液相的工作原理
1.气相：气相色谱是一种物理的分离方法。利用bai被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。 2.液相：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论
液相色谱质谱仪液相部分的维护
液相部分的维护 要求使用220V单相交流电。如发生断电，不管任何原因造成的，首先关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。 仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力为0.6～0.7MPa。 实验开始前先检查液氮罐液体存量是否充足。
戴安推出高压的Ultimate－3000－RSLC快速分离液相色谱
2008年1月9日 戴安（Dionex）公司 快速分离液相色谱（ RSLC ）系统具有宽广的流速-压力范围，流速可达5 mL/min，耐压可达800 bar（11,600 psi），具有无与伦比的灵活性。 戴安推出新款Ultimate 3000快速分离液相色谱
清华大学采购5台快速纯化液相色谱系统
分析测试百科网讯 近日，清华大学快速纯化液相色谱系统采购项目（项目编号：清设招第2019244号）进行公开招标，用于快速纯化多种生物分子，如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子（TCM）等，适合分离纯化活性物质。详情如下： 项目预算：273.5万（人民币） 项目联系人：
液相色谱和气相色谱有哪些不同
气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的
液相色谱和气相色谱有哪些不同
气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的
液相色谱和气相色谱有何异同？
色谱法是一种常见的分离技术，其原理是利用欲分离组分在两相间具备不同的分配系数，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中的不同物质以不同速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。 按两相的物理状态，可以分为气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)，在现代样品分析中，气相色谱和液相色谱都是普遍
液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气
快速了解气相色谱流动相的作用
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有：气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有：乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等 。 特点 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（一）
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capturechromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速凝
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（三）
2、纯化前的准备工作 （1）样品稳定性试验 a、测定样品在pH2-9的稳定性；b、测定样品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸铵中的稳定性；c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性；d、测定样品在4-40℃的稳定性；e、室温下静置过夜，测定对蛋白水解酶的稳定性。（2）样品预处理 a、
自动低压液相色谱分离层析仪简介
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液湘色谱仪中的一种紫外检测装置，该仪器配有层析柱、恒流泵、部分收集器等，即组成一套完整的液色湘色谱分离分析系统。它可应用于现代生物学研究，药物测定、农业科研、化工、食品及医疗单位对具有紫外吸收的样品作定量分析。本仪器主要元器件均采用进口，仪器全部采用LED数字显示，使
简介液相色谱前延峰的发生及处理
因柱温问题很易引起前延峰，有些样品在常温下分离可见前延峰，提高温度后前延峰的现象消失。在离子对色谱中，前延峰的另一个原因是用非流动相作样品溶剂。因此在离子对色谱中要求仅用流动相溶解样品，而且进样量不要太大，否则会导致前延峰或其它问题。在rp-HPLC中样品溶液的强度大于流动相引起前延峰。增加流动
液相色谱(HPLC）荧光检测器工作原理简介
液相色谱荧光检测器是由双路固定波长荧光检测器的中压泵浦灯发出的连续光通过半反射半透镜分成两束再经过测量池和参比池特别是大约10%的激发光被反射到参考细胞和相应的光电倍增管上液相色谱参比池有利于消除流动相发射的背景荧光和外界影响，参比光路也有利于消除光源波动的影响约90%的激发光被激发光滤光器分离，并
FPLC的应用范围
应用范围： FPLC专门用于分离纯化蛋白质、多肽及多核苷酸。 HPLC能够对低沸点低相对分子质量分子、高沸点中分子、高分子有机化合物(包括极性、非极性)、离子型无机化合物、热不稳定生物分子加以分析。
液相色谱流动相的滤过
流动相的滤过所有溶剂使用前都必须经0.45µｍ（或0.22µｍ）滤过，以除去杂质微粒，色谱纯试剂也不例外（除非在标签上标明“已滤过”）。用滤膜过滤时，特别要注意分清有机相（脂溶性）滤膜和水相（水溶性）滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂，过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液，严禁用
液相色谱流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。
液相色谱流动相的脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。（噪声增大，基线不稳，突然跳动）。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果