实验室分析方法免疫亲和萃取的过程方法及应用举例

通常的亲和色谱主要用于蛋白质分子的净化。它的具体过程如下:能和目标蛋白质分子亲和的基质(又称亲和物)以共价键的方式与不溶性的固定相键合(一般要通过一个连接剂作为中介);然后利用有选择性的亲和力与目标蛋白质(某一个或某一类)的活动中心可逆性地结合;被分离体系中其他蛋白质被淋洗出;再通过某些方式把已经结合的目标蛋白质释放出来,这种分离和净化蛋白质的方法称为亲和色谱法。 现在把抗体以共价键方式键合到分离柱的固定相上,用它可逆性地结合该抗体所对应的抗原,由此在一个很复杂的体系中快速、有效地萃取浓度很低的小分子目标抗原,这就是免疫亲和萃取法(IAE)。由于抗体和抗原是高度选择性的结合,可以把它们看作锁体和钥匙的关系,也就是一把钥匙配一把锁的选择性。这样,既可萃取又可浓缩的IAE是目前最为有效的纯化方法,并且使紧随后面的检测达到低于10-9的灵敏度。实际上IAE也可以用来对目标蛋白质进行纯化,只需把抗原结合在固定相上即可。&nbs......阅读全文

亲和标记的方法原理

亲和标记指用对具有特异的亲和性物质中导入化学反应基团的试剂,有选择地修饰存在于活体高分子的对应结合部位的官能基。因根据亲和标记的目的而设计的试剂,对相应的活体高分子具特异的亲和性,故形成试剂与活体高分子的特异的复合体,结果在结合部位试剂之浓度特别高,因而结合部位的官能基得到良好的修饰。例如,对以芳香

亲和标记的方法介绍

亲和标记(affinity labeling):指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合,从而将两种物质交联在一起。

液液萃取法的方法和应用

液-液萃取是分离、提纯有机物常用的方法,分液漏斗是萃取操作的常用玻璃仪器。一般是用有机溶剂从水中萃取有机物,常用的与水不互溶的有机物有乙醚、石油醚、二氯甲烷等。

免疫亲和层析技术的应用介绍

一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

免疫亲和层析的技术应用和特点

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

免疫亲和层析的具体应用有哪些

亲和层析是通过层析介质表面键合的配基与目标物质特异性吸附,然后非目标物流穿,再改变流动相是目标物质的特异性吸附消失,从而达到纯化目的。凝胶层析是通过层析介质孔径的设定,使分子量大小相差比较大的物质通过的路径不一样,从而达到分离效果。离子交换是通过层析介质表面的带电荷的基团与目标之间产生吸附,通过改变

实验室分析方法质谱分析的原理及应用

  质谱分析本是一种物理方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿(F.W.Asto

AFM应用举例

 AFM应用举例由于原子力显微镜对所分析样品的导电性无要求,因此使其在诸多材料领域中得到了广泛应用。透明导电的ITO薄膜,随着成膜方法、膜厚、基底温度等成膜条件变化,而表面形貌不同。将膜厚120nm(左)与450nm(右)的ITO薄膜进行比较时,随着膜厚的增加,每个结晶颗粒明显地长大。另外,明显地观

XPS应用举例

(1)例1 硅晶体表面薄膜的物相分析对薄膜全扫描分析得下图,含有Zn和S元素,但化学态未知。为得知Zn和S的存在形态,对Zn的最强峰进行窄扫描,其峰位1022eV比纯Zn峰1021.4eV更高,说明Zn内层电子的结合能增加了,即Zn的价态变正,根据含有S元素并查文献中Zn的标准谱图,确定薄膜中Zn是

实验室分析方法质谱法的应用

质谱法特别是它与色谱仪及计算机联用的方法,已广泛应用在有机化学、生化、药物代谢、临床、毒物学、农药测定、环境保护、石油化学、地球化学、食品化学、植物化学、宇宙化学和国防化学等领域。用质谱计作多离子检测,可用于定性分析,例如,在药理生物学研究中能以药物及其代谢产物在气相色谱图上的保留时间和相应质量碎片

实验室分析方法气相色谱辅助萃取技术超临界流体萃取

超临界流体萃取(Super-critical Fluid Extraction,SFE)是指利用超临界状态的流体溶解并分离样品基质中待测组分的预处理技术。所谓“超临界状态”,是指温度和压力同时超过某种气体物质的临界压力和临界温度的状态临界温度,是指某种气体能够被液化的最高温度而临界压力,则是在临界温

实验室分析方法气相色谱溶剂萃取技术同时蒸馏萃取

同时蒸馏萃取(Simultaneous Distillation Extraction, SDE)是一种液-液萃取技术,一般用于水相基质样品中有机组分的提取;如用于固相样品,则需将粉碎后的样品置入样品瓶中加入适量蒸馏水,将目标组分提取到水相中后,再通过同时蒸馏萃取过程将其转入有机萃取液中。它利用有机

常用的分离方法萃取的概念和应用

萃取,又称溶剂萃取或液液萃取,亦称抽提,是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作。即,是利用物质在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使溶质物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中的方法。广泛应用于化学、冶金、食品等工业,通用于石油炼制工业。另外将萃取后两种互不相溶

实验室分析方法质谱分析的过程

(1)进样,化合物通过汽化引入电离室;(2)离子化,在电离室,组分分子被一束加速电子碰撞,撞击使分子电离形成正离子;(3)离子也可因撞击强烈而形成碎片离子;(4)荷正电离子被加速电压V加速,产生一定的速度v,与质量、电荷及加速电压有关;(5)加速正离子进入一个强度为B的磁场(质量分析器),发生偏转。

实验室分析方法DSC实验的过程步骤

一、启动 DSC1)检查气路,打开仪器所需气体。2)检查 DSC 和控制器之间的所有连接。确保每个组件都插入到正确的接头中。3)将仪器电源开关设置到“打开”位置。正确开启电源后,TA  Instruments 徽标将显示在触摸屏上,这表示仪器已经可以开始使用了。注意:允许 DSC 在执行实验之前至少

有证标准物质的用途及应用举例

有证标准物质(CRM)附有证书的标准(参考)物质,其一种或多种特性值用建立了溯源性的程序确定,使之可溯源到准确复现的表示该特性值的测量单位,而且每个特性值都附有给定置信水平的不确定。如NIST,IRMM标准物质,Sigma网站上查到的CRM标识产品•用途•评价化学分析结果的准确度和精密度;•校准测量

固相萃取柱的选择及萃取过程

参考固相萃取柱的类型及应用,选择适当的填料类型,然后选择固相萃取柱的大小和填料量。样品量 :萃取柱的大小 1ml 1ml 1ml~250ml,且不要求萃取速度 3ml 1ml~250ml,要求快速萃取 6ml  10ml~250ml,要求高样品容量 12,20或60ml 1L和要求高样品容量

蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立

近期,中国计量科学研究院武利庆及其合作者杨屹等发表系列文章(Anal.Bioanal.Chem.412(2020)2777-2784、Talanta178(2018)78-84、Microchem.J.157(2020)104954),介绍了基于表面等离子共振光谱法和数字ELISA的蛋白质免疫亲和活

蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立

TD-MSQS 2020 技术篇五蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立 学者简介:武利庆,研究员,中国计量科学研究院前沿计量科学中心蛋白质室主任杨屹,教授,北京化工大学化学学院苏萍,副教授,北京化工大学化学学院近期,中国计量科学研究院武利庆及其合作者杨屹、苏萍等发表系列文章(Anal.Bioan

蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立

TD-MSQS 2020 技术篇五蛋白质免疫亲和活性浓度绝对测量方法的建立 学者简介:武利庆,研究员,中国计量科学研究院前沿计量科学中心蛋白质室主任杨屹,教授,北京化工大学化学学院苏萍,副教授,北京化工大学化学学院 近期,中国计量科学研究院武利庆及其合作者杨屹、苏萍等发表系列文章(Anal.Bioa

索氏提取器应用举例萃取法提取粗咖啡因

用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g茶叶,用研钵捣成茶叶末,装入滤纸筒中,将开口 端折叠封住,放入提取筒中,将150mL圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,安装好索氏提取装置,从仪器上部的回流冷凝管中加入够两次虹吸量的95 %乙醇(当流入索氏中提取器中的液体量超过虹吸管的高度时,液体会沿着虹吸管全部

黄曲霉毒素分析方法——免疫亲和净化柱/UVE法

一、免疫亲和净化柱/UVE法简介:     利用德国LCTech品牌AflaCLEAN 净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2专一分离出来,然后用HPLC/FLD分别测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2。 二、免疫亲和净化柱/UVE法特点:    专用AflaCLEAN 净化柱使得样

实验室分析方法激光解吸源的结构及应用

自1963年Honig和Woolston首次发表激光解吸离子化的论文后,Vastola随后将这一方法引入到有机质谱分析。四十年来激光质谱法得到了显著的发展。激光解吸离子化(简称LDI)有效地对付热稳定性低、难气化样品的分析。该技术向着两个方向发展,一是解决有机小分子的分析,二是解决生物大分子的分析。

萃取小柱技术的方法及特点介绍

使用萃取夹代替分液漏斗完成液 - 液萃取,将一种液相混合到一种惰性介质中并经过一会儿地渗滤,与色谱相类似的方式,不相容相进入不流动相。这些萃取小柱同固相萃取小柱一样,在聚乙烯管中填充经煅烧助溶的高纯硅藻土。这些管的体积从0.3-300ml( 有商品出售)。具有大表面的填充物可提高萃取效率、防止水溶液

实验室分析仪器超临界流体萃取方法介绍及特点分析

一、超临界流体与通常的液一液、液一固萃取相同,超临界萃取(SFE)也是一种两相之间的萃取,不过只是使用了超临界流体。当温度和压力超过一个物质的临界时,该物质处于一种既非液态又非气态的超临界状态,此时称为超临界流体,用它来萃取样品即为超临界流体萃取。 二、SFE的优点超临界流体具有气体的低黏度和液体的

实验室分析方法气相色谱固相萃取技术固相萃取法

固相萃取的操作原理是将液态或溶解后的固态样品倒入活化过的SPE柱,然后利用抽空或加压使样品进入SPE柱的固定相。利用固定相和样品组分间的相互作用实现对目标组分的富集和对样品基质的去除。为提高处理效率,可以采用SPE歧管真空装置同时处理多个样品。一般地,SPE在分离步骤中保留感兴趣的组分和类似的其他组

实验室分析方法气相色谱溶剂萃取技术浊点萃取技术

浊点萃取(Cloud Point Extraction,CPE),亦称“胶束媒介萃取(Micellar Mediated Extraction,MMe)”,是一种较新的液-液萃取技术,它利用所谓的“浊点现象”,实现水相溶剂中疏水性待测组分的提取。此法在螯合金属离子分离分析方面具有天然的优势,但也可以

索氏提取方法的相关举例介绍

  ⒈ 萃取法回流提取  用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g茶叶,用研钵捣成茶叶末,装入滤纸筒中,将开口端折叠封住,放入提取筒中.将150 mL圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,量取95%乙醇100mL,从提取筒中倒入烧瓶,安装好索氏提取装置,见图4-21.1,打开电源,加热回流2小时.实验时能

实验室分析方法过程气相色谱仪结构及原理

过程气相色谱是一种用于化学工业在线分离和测量混合物中不同组分的分析技术,常用于工业过程的在线监测、自动循环分析等,又被称为流程气相色谱仪或在线气相色谱仪。从气相色谱技术诞生的20世纪50年代,气相色谱系统就已从实验室进入到工厂生产过程的控制,包括对原料、中间产物及产品的组成、质量和收率进行分析,关键

食品检测样本制备方法举例

(1)样本的整理 测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。水果:去掉水果的把、凹处和核。  香蕉:切掉两头。  芒果:去掉皮和核。  甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。  坚果类:去掉壳。  菠萝: