实验室分析方法免疫亲和萃取的过程方法及应用举例

通常的亲和色谱主要用于蛋白质分子的净化。它的具体过程如下:能和目标蛋白质分子亲和的基质(又称亲和物)以共价键的方式与不溶性的固定相键合(一般要通过一个连接剂作为中介);然后利用有选择性的亲和力与目标蛋白质(某一个或某一类)的活动中心可逆性地结合;被分离体系中其他蛋白质被淋洗出;再通过某些方式把已经结合的目标蛋白质释放出来,这种分离和净化蛋白质的方法称为亲和色谱法。 现在把抗体以共价键方式键合到分离柱的固定相上,用它可逆性地结合该抗体所对应的抗原,由此在一个很复杂的体系中快速、有效地萃取浓度很低的小分子目标抗原,这就是免疫亲和萃取法(IAE)。由于抗体和抗原是高度选择性的结合,可以把它们看作锁体和钥匙的关系,也就是一把钥匙配一把锁的选择性。这样,既可萃取又可浓缩的IAE是目前最为有效的纯化方法,并且使紧随后面的检测达到低于10-9的灵敏度。实际上IAE也可以用来对目标蛋白质进行纯化,只需把抗原结合在固定相上即可。&nbs......阅读全文

实验室分析方法免疫亲和萃取的过程方法及应用举例

通常的亲和色谱主要用于蛋白质分子的净化。它的具体过程如下:能和目标蛋白质分子亲和的基质(又称亲和物)以共价键的方式与不溶性的固定相键合(一般要通过一个连接剂作为中介);然后利用有选择性的亲和力与目标蛋白质(某一个或某一类)的活动中心可逆性地结合;被分离体系中其他蛋白质被淋洗出;再通过某些方式把已经结

举例介绍亲和标记的原理和方法

亲和标记指用对具有特异的亲和性物质中导入化学反应基团的试剂,有选择地修饰存在于活体高分子的对应结合部位的官能基。因根据亲和标记的目的而设计的试剂,对相应的活体高分子具特异的亲和性,故形成试剂与活体高分子的特异的复合体,结果在结合部位试剂之浓度特别高,因而结合部位的官能基得到良好的修饰。例如,对以芳香

索氏萃取仪应用举例

脂肪测定仪索氏提取法 500ml索氏萃取仪应用举例:萃取法提取粗。具体步骤如下:用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g茶叶,用研钵捣成茶叶末,装入滤纸筒中,将开口 端折叠封住,放入提取筒中,将150mL圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,安装好索氏提取装置,从仪器上部的回流冷凝管中加入够两次虹吸量

实验室分析方法硫酸型染料的分析及举例

磺酸型染料分析一直是困扰质谱学家的一个难題。这是因为分子中含有磺酸基团(或磺酸钠),使分子具有极强的水溶性和极低的蒸气压,用EI方法分析磺酸型的染料时,即使采用直接接进样,施以高的气化温度,也因热解而难以奏效。往往需要将SO3H转换为SO2NH2后进行直接进样的EI质谱分析。如果是多磺酸的酸性染料则

实验室分析方法电喷雾技术的发展及举例分析

电喷雾技术在质谱界已成为目前的热门话题。它的问世可以追溯到1976年Iribame等人提出的离子蒸发的术语。当时在Sciex公司的TAGAAPI/MS仪器上试验,并于1983年制成样机,但未能达到实用阶段。1986年Bruins等人在Cornell大学作了改进并在灵敏度上获得了突破,这才具有实用性,

免疫亲和层析的原理及应用

  原理  简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。  通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。  首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待

简述免疫亲和色谱的测定方法

  免疫亲和色谱的一般测定方法是将待测样品通过色谱柱,其中待测抗原以及类似物与固定的抗体结合,其他样品基质由于不与固定相结合而被除去。这样,结合的待测物质被洗脱以后利用在线或非在线的方法直接测定。测定方法一般采用紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法等。与传统的免疫分析相比,该技术具有操作简单、分析快速、

实验室分析方法微波萃取方法的原理介绍及要求

微波萃取也是近十年来发展的一种新方法。微波萃取的原理是基于微波加热的方法。样品中极性分子的偶极矩在髙频电磁波辐射的可变能量场作用下发生快速振动运动,从而在样品内部产生大最的摩擦热量下进行萃取。微波萃取的优点是快速并賦予样品低的热应力,这对热稳定性低的样品萃取是有利的。微波萃取要求极性溶剂,所以需要用

了解萃取方法实验过程

萃取有两种方式:1.液-液萃取,用选定的溶剂分离液体混合物中某种组分,溶剂必须与被萃取的混合物液体不相溶,具有选择性的溶解能力,而且必须有好的热稳定性和化学稳定性,并有小的毒性和腐蚀性。液-液萃取是利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶

实验室分析方法亲和色谱法原理及发展

亲和色谱(AFC)作为一种特异性分离技术,基于生物分子的活性特征,以其极高的选择性不可替代地被应用于复杂生物体系中特定组分的分离。一、原理与色谱柱推荐亲和色谱基于生物分子固有的特异性相互作用进行样品的高选择性分离。特异性相互作用包括醇能与底物、抑制物、辅酶等的结合:;抗体与抗原的结合:凝集素与细胞表

免疫亲和层析的应用

  免疫层析测试  一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

免疫亲和层析的应用

一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

免疫亲和层析的应用

  免疫层析测试  一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

实验室分析方法快速溶剂萃取方法及起特点分析

也许是受到超临界流体萃取的启发,使用高温和高压增加物质的溶解度,降低溶剂的黏度将有利于溶剂分子在基质中的扩散,降低基质对溶质的作用,加快溶质在基质中的释放,由此提高萃取效率。这样,大大地缩短了萃取的时间,减少萃取溶剂的用量,并保持了高的回收率。据称与索氏提取法、超声萃取相比,可以把萃取时间从小时计缩

免疫亲和柱荧光计快速分析方法测定伏马毒素的过程

伏马毒素的介绍该毒素是1989年发现的一种新型毒素,由串珠镰刀菌等产生的真菌毒素。目前已知有7种衍生物,研究证实伏马毒素可导致马产生白脑软化症(ELEM),神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调,甚至造成死亡;对猪产生肺水肿综合症(PPE),并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病,从而对畜牧业及人类的健

免疫亲和层析的应用特点

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

免疫亲和层析的应用实例

  抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物免

简述免疫亲和层析的应用

  一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

免疫亲和层析的应用实例

  抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离,而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原,经动物免

免疫金染色方法的特点及应用

中文名称免疫金染色英文名称immuno-gold staining定  义将用胶体金(直径大于20 nm)标记的间接抗体或A蛋白再与特异性抗体结合,在光镜下就可见红色的反应物出现,不需进行呈色反应的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

实验室分析方法亲和色谱法概念介绍

亲和色谱法(affinity chromatography)用连接在基体上的配位体作为固定相,使与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用,利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。

微萃取方法的概念和应用

微萃取是另一种形式的液 - 液萃取技术,采用0.001-0.01范围的相比率值(V)进行萃取过程。与传统的液 - 液萃取相比,它采用小体积有机溶剂。微萃取提供的回收率较差,但是在有机相中的欲测物质的浓缩大大地增高。此外,使用的溶剂量也大大地减少。在容量瓶中进行萃取,可以选择比水密度低的有机溶剂,结果

免疫亲和层析的应用相关介绍

  1、免疫层析测试  一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。  2、示例  抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又

免疫亲和层析的作用和应用

免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。

免疫亲和色谱法-技术的应用

1)免疫萃取(innunoextraction)IAC 技术最简单的应用就是单纯作为样品的预处理手段,即制备免疫亲和柱,也称为离线(off-line)IAC。现在市场上已有克伦特罗、黄曲霉毒素等多种免疫亲和柱出售,使用效果非常好。2)IAC 联用技术IAC 联用技术也可称为在线 IAC。将 IAC

FDA的样本制备方法举例

   (1)样本的整理在测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。    水果:去掉水果的把、凹处和核。    香蕉:切掉两头。    芒果:去掉皮和核。    甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。  

免疫金银染色方法的特点及应用

中文名称免疫金-银染色英文名称immuno-gold-silver staining;IGSS定  义使已在抗原位置沉积的金颗粒发挥催化作用,促进银离子被氢醌还原为银原子,后者围绕金颗粒形成一层银壳,利用胶体金和胶体银的双重标记抗体对抗原进行染色的方法。增强了检测灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科

实验室分析方法DSC概念、原理及应用

一、基本概念 差示扫描量热法简称DSC,是六十年代以后研制出的一种热分析方法。它是在程序温度控制下测量物质与参比物之间单位时间的能量差(或功率差)随温度变化的一种技术。这项技术被广泛应用于一系列应用,它既是一种例行的质量测试和作为一个研究工具。在1977年国际热分析协会(ICTA)的命名委员会的第四

亲和层析原理及分析方法

  亲和层析的原理与众所周知的抗原一抗体、激素一受体和酶一底物等特异性反应的机理相类似,每对反应物之间都有一定的亲和力。正如在酶与底物的反应中,特异的废物(S')才能和一定的酶(E)结合,产生复合物(E-S')一样。在亲和层析中是特异的配体才能和一定的生命大分子之间具有亲和力,并产生

亲和标记的方法介绍

亲和标记(affinity labeling):指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合,从而将两种物质交联在一起。