实验室分析方法液相色谱的定性方法介绍
液相色谱法作为一种重要的分离分析手段,具有能通过色谱柱分离复杂样品中不组分的能力,这种能力是任何其他分析方法所无法比拟的。对色谱柱分离后的组分进行。尽管液相色谱法包多定性及定量鉴定,是色谱工作者完成分析工作的一个重要环节。尽管液相色谱法包括多种模式,但无论采用何种模式,对样品进行定性及定量分析皆基于通过检测器得到的图信息。液相色谱过程中影响溶质迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留也可能有很大差别。在同根色谱柱上的分离,有时甚至会因为流动相组成的改变而出现出峰次序颠倒的现象。显然,与气相色谱相比,液相色谱法定性的难度更大。对液相色谱中组分定性方法的研究一直是色谱工作者努力探求的一项重要工作。这里只介绍几种最常用的定性方法。一、利用已知标准样品定性在具有已知标准物质的情况下,利用标准样品对未知化合物定性是最常用的液相色谱定性方法,这也是唯一在任何条件下都有......阅读全文
液相色谱泵常规维护方法
在高效液相色谱仪的日常保养中，柱塞后清洗，也是很重要的，尤其是流动相中含有缓冲盐，或者其他可凝固和可析出固体的情况下，柱塞后清洗尤为重要。以缓冲盐为例，经常时间使用的情况下，建议一周进行一次后柱塞后清洗：一般用纯水，或水中加10%的甲醇或者10%的乙腈。无论是国产还是进口的，只要是柱塞泵，都会有柱塞
实验室分析方法气相色谱酯化衍生化方法
(1)甲醇法:有机酸与甲醇在催化剂条件下加热,发生酯化反应,生成有机酸甲酯。一般采用三氟化硼作催化剂,通常将三氟化硼通入甲醇配制酯化剂,因为配置过程中以放热,有一定的危险性,现在也有商品化的三氟化硼甲醇溶液可直接购买使用。(2)重氮甲烷法:重氮甲烷可以与有机酸反应生成有机酸甲酯放出氮气。此法简便有效
实验室分析方法气相色谱酰化衍生化方法
酰化能降低羟基、氨基、巯基的极性,改善这些化合物的色谱性能,并提高这些化合物的挥发性,增加某些易氧化化合物的稳定性。当酰化时引入含有卤离子的酰基时,还可以提高使用ECD检测器的灵敏度。常用的酰化试剂有酰卤、酸酐和反应活性的酰化物。(1)乙酰化法:标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中,与乙酸酐和乙酸在50℃
气相色谱仪利用经验规律定性方法
气相色谱仪分析中利用经验规律定性方法有碳数规律和沸点规律等。一、碳数规律：大量实验证明，在一定温度下，同系物的调整保留时间的对数与分子中的碳原子数成线性关系，即：lgtR′= A1n + C1式中：A1和C1均为常数，n为分子中的碳原子数（n≥3）。根据某一同系物中两个或更多已知组分的调整保留时间的
气相色谱仪定性分析方法归纳
气相色谱仪定性分析方法有利用保留值与已知纯物质对照定性、利用保留值经验规律定性、根据文献保留数据定性和与其它方法结合进行定性等。一、利用保留值与已知纯物质对照定性：利用已知纯物质对照定性是基于在一定操作条件下，各组分的保留值是一定值进行的，是色谱定性分析中zui方便的方法。仅适用于样品性质已有所了
气相色谱仪利用保留值定性方法
气相色谱仪利用保留值定性方法有利用已知纯物质对照定性、利用已知物峰增高定性、根据相对保留值定性和根据保留指数定性等。一、利用已知纯物质对照定性：利用已知纯物质对照定性是基于在一定操作条件下各组分的保留时间为定值，是色谱定性分析中zui方便的方法。纯物质对照定性仅适用于组分性质已有所了解、组成比较简单
气相色谱仪定性分析方法归纳
气相色谱仪定性分析方法有利用保留值与已知纯物质对照定性、利用保留值经验规律定性、根据文献保留数据定性和与其它方法结合进行定性等。一、利用保留值与已知纯物质对照定性： 利用已知纯物质对照定性是基于在一定操作条件下，各组分的保留值是一定值进行的，是色谱定性分析中zui方便的方法。仅适用
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，zui好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是zui佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处
液相色谱柱的使用方法
液相色谱柱的使用方法液相色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要留意： 液相色谱柱柱性能可能由于所使用的样品、活动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是最佳条件），只有这
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
高效液相色谱的使用方法
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)．过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)．进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)．有一段时间没用，或者换了
液相色谱柱的使用方法
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理
液相色谱柱的故障处理方法
气泡溢出 流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用
液相色谱柱的故障处理方法
气泡溢出 流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力
液相色谱柱的故障处理方法
流动相内有气泡，关闭泵，打开泄压阀，打开purg键，清洗脱气，气泡不断从过滤器冒出，进入流动相，无论打开purge键几次，都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，阻塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱，其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系，根据两者线性关系，可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
气相色谱分析的定性分析方法
色谱定性分析的任务是确定色谱图上每个峰代表什么物质；定性分析的根据是每个峰的保留值。 在一定的色谱条件下，每种物质都有一个确定不变的保留时间。但在同一色谱条件下，不同的物质可能具有近 似或完全相同的保留时间。因此色谱定性往往是十分困难的。不过当已知样品组分，并有标准的纯物质样品可以比较时，色谱定性
实验室分析方法红外光谱定性分析方法介绍
反映红外光谱特征的是谱带的数目和位置，谱带的形状和谱带的相对强度，并通过这些特征来获得化合物结构信息就是光谱的解析。但至今并没有建立起一套完整的解析图谱的系统方法。早在1958年日本学者岛内武彦曾做过使官能团定性分析系统化的尝试，提出了所谓“八区法”。南京药学院主编的《分析化学》一书中对红外光谱解析
实验室分析方法液固色谱法概念介绍
液-固色谱法（LSC, liquid-solid chromatography）一般指吸附剂作为固定相的液相色谱法。
实验室分析方法液液分配色谱法流动相概念和应用
流动相与固定液应尽量不互溶,或者二者的极性相差越大越好。根据流动相与固定相极性的差别程度,可将液液色谱分为正相分配色谱(流动相极性小于固定相极性,极性小的先流出,适于强极性和中等极性组分分离)和反相分配色谱(流动相极性大于固定相极性,极性大的先流出,适于非极性或弱极性组分分离)。固定相:由载体和固定
实验室分析方法高效液相色谱仪液相色谱柱保护柱选择
在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样
色谱定性的方法有哪些
参考答案主要的定性方法有：①纯物质对照法。②利用保留值经验规律定性。③利用其他方法定性。如利用化学方法配合进行未知组分定性。
实验室分析方法正相液相色谱法概念介绍
正相液相色谱法（NPLC, normal phase liquid chromatography）固定相的极性较流动相的极性强的液相色谱法。
实验室分析方法气相色谱溶剂萃取技术介绍
溶剂萃取包括液-液萃取（Liquid-Liquid Extraction，LLe）和液-固萃取（Liquid-Solid- Extraction，LSE），分别针对液相样品和固相样品，通过在基质中添加不相溶的有机萃取溶剂利用样品组分在不同溶剂中分配系数不同或在萃取溶剂中的溶解度不同而达到分离和提取其
实验室分析方法气相色谱色谱柱的性能评价
制备好的色谱柱常用以下几个指标来评价其性能好坏。一、分离能力1.塔板数（1）塔板数N塔板数是评价柱效的主要指标，塔板数的计算可依据表1中的公式，其中柱效计算时色谱峰上的关键点见图1。 图一 表1塔板数N=参数标准偏差2Π（tRh/A）24（tR/wi）25.55（tR/wh）216（tR/wb）2保
实验室分析方法气相色谱法的气化方式介绍
样品必须先完全气化，然后在气相色谱柱中进行组分分离。当进样装置把样品送入气化室的空间或气化室内色谱柱的顶端（柱头进样），此时气化室可能是已加热至高温并保持恒温；也可能是低温，样品进入后才快速程序升温。一般地说，样品进入气化室空间之际，气化室已经加温至可完全气化样品的温度。而柱头进样时，样品进入气化室
实验室分析方法正相液相色谱法方法发展
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽，氰基柱通常是首选；与氰基柱相比，硅胶柱可获得更大的值，适合于异构体和疏水性溶质的分离，但分析时必须严格控制流动相中水含量，也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差，仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用；氧化铝
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（三）
2、纯化前的准备工作 （1）样品稳定性试验 a、测定样品在pH2-9的稳定性；b、测定样品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸铵中的稳定性；c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性；d、测定样品在4-40℃的稳定性；e、室温下静置过夜，测定对蛋白水解酶的稳定性。（2）样品预处理 a、
蛋白质、多肽液相色谱纯化方法介绍（一）
1、纯化的一般目标和方法 首先，自然来源或者重组表达的蛋白质经过一些粗提的步骤（例如：匀浆、离心、硫酸铵沉淀等）成为稳定的可以用于色谱分离的样品。然后进行捕获色谱（capturechromatography），主要目标是浓缩和去除大量的容易去除的杂质，此步最关心的是流速和载量，常采用高载量、快流速凝