实验室分析仪器高效液相色谱在生物化学工程中的应用

当前随着生命科学和生物工程技术的迅速发展,人们对氨基酸、多肽、蛋白质及核碱、核苷、核苷酸、核酸(核糖核酸RNA、脱氧核糖核酸(DNA)等生物分子的研究兴趣日益增加。这些生物活性分子是人类生命延续过程必须摄取的成分,也是生物化学、生化制药、生物工程中进行蛋白质纯化、DNA重组与修复、RNA转录等技术中的重要研究对象,因此涉及它们的分离、分析问题也日益重要。高效液相色谱法中的反相色谱法、体积排阻色谱法、亲和色谱法和离子色谱法都可用于上述多种生物分子的分离和分析。 ......阅读全文

液相色谱柱与高效液相色谱柱的区别

普通液相柱与高效液相柱的原理都是一致的,只不过后者是高效的可以缩短检测的时间,节省流动相,大大节省时间。普通的液相色谱柱的径口一般是是5um,高效液相色谱柱的径口一般在3.5um有的在3um甚至在1.7um,相比之下高效液相柱比普通液相柱径口更小,管长更短、柱压大,而普通液相柱承受不住高压,所以没有

高效液相色谱流动相选择

流动相选择1)由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍规则:每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察

高效液相色谱流动相选择

       流动相的性质要求        一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。       流动相选择        1:由强到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况

高效液相色谱的流动相要点

流动相溶剂的选择1)所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2)溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3)在制备分离中,溶剂应当易于除去,不干扰

高效液相色谱和气相色谱的异同点

不同点:一、流动相不同:HPLC为液体流动相,GC为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱

高效液相色谱和气相色谱的异同点

不同点:一、流动相不同:hplc为液体流动相,gc为永久性气体作流动相(通常叫做载气)二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针三、色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中流动速度快,因此可以增加柱

色谱技术方法高效液相色谱

高效液相色谱 (HPLC)是目前应用最多的色谱分析方法,高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体,

高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气

防止溶解在流动相中的气体因为压力和温度的变化释出来 液相色谱柱的分离。

高效液相色谱中,为什么要对流动相脱气

脱气方式:在线脱气机脱气,前期流动超声波超声脱气;系统中气泡的产生:流动相本身存在,梯度淋洗混合后放出气泡;气泡的影响:存在于管路中,系统压力不稳定,实验结果有偏差;存在于单向阀中,易造成液体回流,流量不准确,甚至是不吸液;存在于检测器中,出现鬼峰,影响检测准确性。所以做液相对流动相的气泡和杂质要求

岛津高效液相色谱LC20A-应用系统

文件简介: 生物样品自动前处理系统(Co-Sense for BA )有机酸分析系统氨基甲酸脂分析系统氨基酸分析系统 文件下载地址:岛津高效液相色谱LC-20A 应用系统

高效液相色谱在药学方面的应用分析

1.药物组分含量的分离和分析:由于药剂通常含有组分,因此高效液相色谱仪方法是一种能够分离和定量的方法。例如,脂溶性维生素片含有铬维生素、C18柱和含有碳酸铵的甲醇流动相.每种维生素B6,D1,A和E可以同时分离并以单剂量确定。另一个例子是镇痛剂或解热剂,其可以分离并测量每种组分的含量。2.药品生产中

Waters超高效液相色谱串联质谱仪共享应用

仪器名称:超高效液相色谱串联质谱仪仪器编号:A20000063产地:生产厂家:Waters型号:SQ Detector 2出厂日期:购置日期:所属单位:药学院>药学技术中心放置地点:郑裕彤楼E225固定电话:010-62788677固定手机:13811937265固定email:联系人:田国芳(01

高效液相色谱中能否用保留时间定性

可以的,首先进一阵已知对照品溶液的标样,然后进一针被测样品的溶液,看被测样品溶液色谱图中在对照品溶液色谱图主峰保留时间处是否有峰,可以鉴别被测样品中是否含有对照品的成分。利用液相色谱法的保留时间进行定性,只是定性鉴别的一种手段,要想得到跟进一步的定性,最好还要辅助其他的鉴别手段。

高效液相色谱中是否可用保留值定性?

在气体或液相色谱的操作中,当仪器的操作条件保持不变时,任何物质的峰值总是存在于色谱图中的固定位置,即一定的保留值它还包括:停滞时间、保留时间、校正保留时间、保留体积等。液相色谱保留值的方法主要用于直接控制已知标准的方法。当未知峰的保留值(t‘r或v‘r)与已知标准峰的保留值完全相同时,未知峰可能与已

高效液相色谱检测灵芝中活性成分含量

灵芝子实体中主要含有三萜类多糖及蛋白质等活性成分灵芝也含有真菌类的特征成分麦角甾醇本文采用紫外分光光度法和高效液相色谱仪分别测定这4类活性成分。1、仪器与试剂高效液相色谱仪配紫外检测器;紫外可见分光光度计;电恒温水浴锅;电子分析天平:0.1mg;超声波清洗机;高速离心机;D-葡萄糖熊果酸、牛血清蛋白

实验室分析仪器高效液相色谱控制系统与恒温装置

一、数据处理和计算机控制系统早期的 HPLC 仪器是用记录仪记录检测信号,再手工测量计算。其后,使用积分仪计算并打印出峰高、峰面积和保留时间等参数。20世纪80年代后,计算机技术的广泛应用使 HPLC 操作更加快速、简便、准确、精密和自动化,现在已可在互联网上远程处理数据。计算机的用途包括三个方面:

实验室分析仪器高效液相色谱食品中毒素、有害成分检测

食品中毒素与有害成分的检测随着科学技术的发展,各种有机化合物与防治病虫害的农药常用在农作物上,虽然一定程度地促进了农作物的生长,保证了生产产量,但降低了农作物的安全性,有一些强性农药或兽药,即便经过雨水洗刷,依然不能完全清除,还有部分残留,这时若采摘者或食用者在食用时没有仔细清洗,这些农药或兽药进入

高效液相色谱柱的分类与应用特点(二)

三、高效亲水液相色谱柱 高效亲水液相色谱是一个介于正相和反相高效液相色谱之间的运作模式。这个模式最早来自NH2色谱柱的糖分析应用。在此之后,逐步在Diol, 硅胶和亲水性高分子键合相找到了一些有价值的应用。近年来,高效亲水液相色谱成为比较流行的色谱的运作模式, 主要是因为亲水性化合物有良好的保留和高

高效液相色谱柱的分类与应用特点(一)

高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全

实验室分析仪器液相色谱与气相色谱的比较

液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致。但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中的气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同;此外,液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气相

在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用

梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。梯度洗脱时应注意:1、注意各

高效液相色谱故障排除

注意:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。 色谱柱的维护 1.使用预柱保护分析柱(

高效排阻液相色谱

实验材料 nrhTNF 试剂、试剂盒 氯化钠 PB 仪器、耗材

高效液相色谱使用步骤

高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用

反相高效液相色谱2

方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一

高效液相色谱使用步骤

高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用

高效液相色谱故障排除

  注意:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。   如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。   色谱柱的维护   1.使用预柱保护分析

高效液相色谱定性方法

与气相色谱相比,高效液相色谱定性的难度更大。HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此,在高效液相色谱分析过程中,对定性分析方法提出了更高的要求。 (1)利用检测器的选择性进

高效液相色谱使用步骤

高效液相色谱仪操作步骤如下:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用

反相高效液相色谱4

方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验实验材料用于分析的肽或蛋白试剂、试剂盒丙酮乙腈(HPLC级)2 -丙醇乙醇硝酸钠硫酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置离心机锥形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮气冷冻干燥机流动相过滤装置氦气制备型 HPLC 装置实验步骤一、