实验室分析仪器液相色谱仪常见问题HPLC柱压不稳
①泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理。②比例阀失效,更换比例阀即可。③泵密封垫损坏,更换密封垫即可。④溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法。⑤系统检漏,找出漏点,密封即可。⑥梯度洗脱,这时压力波动是正常的。......阅读全文
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十四
用的是四元梯度泵 A50% 甲醇 B50% 水 经常出现停或进气泡这是什么原因?答:水 / 甲醇比例在 55:45 时,黏度和柱压有个极大值。50:50 接近了这个极值,柱压是比较高的,但影响柱压最大的还是填料粒径和色谱柱内径,你这个实例中不知用的什么规格的色谱柱?系统压力高,可能会因溶剂泵中
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十六
国产色谱柱在市场上占有比例如何啊?国内色谱柱市场还没有人进行过科学统计,连一年色谱柱销售总量也众说纷云,更别说国内生产色谱柱所占份额了。我估计是占 30% 左右吧。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十七
色谱柱为什么要国外生产填料并填装完成成品卖到国内？答:国内填装会出现质量小问题,和国内目前普遍做事没有国外严谨有关吧。如果工艺技术上没有问题,又能制订并切实执行一整套严格的生产质量管理措施,国内填装和国外填装并无区别。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十九
如果柱子取下来放置一段时间,需要做什么保护吗?答:对一般的反相柱,也就是洗干净后放到纯甲醇(乙腈)或者是 80% 左右的甲醇(乙腈)水中,然后用堵头塞紧柱两头,以免保存溶剂挥发,应该不需要做特殊的保护。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十八
流动相中加入适量的四氢呋喃可以改善峰形的机理是什么?答:《高效液相色谱方法及应用》于世林编著的上面说:甲醇为质子给予体、乙腈为质子接受体、四氢呋喃是偶极溶剂,应该除了极性影响,还有另外的影响因素,至于分离机理,还是比较复杂的,不能看成是个万能方法。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题五十二
色谱条件是成熟没问题,但是该条件下保留的物质变的不被保留,比如本来保留时间 15 分钟却怎么调比例都是 2-3 分钟就出峰了,维护后,下次再使用又正常了,什么样原因啊?答:最大可能是发生相塌陷了。C18 柱和高密键合封尾的 C8 柱,在高含水流动相下会发生相塌陷,后果就是保留能力大幅下降。用有机相比
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题三十一
一般正常使用一个 C18 柱能用多长时间?答:柱寿命一般不按时间计算,按持续进样针数比较科学。一般正常使用维护,不超过 pH 和温度等范围,C18 柱能达到 500-2000 针进样的寿命,视样品干净程度的不同而不同。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十五
预柱或保护柱用还是不用的问题!原来分析中药品种时,我一直都是用保护柱。但来到新公司后,发现大家都没有使用,几个实验室连保护柱都没找到一个,也就是说大家从来都没有用过。后来问一个老员工,说是有可能影响药品分析。我就想问:安装保护柱后会影响样品分析吗?我们做的大多是头孢类的抗生素。答:应该这样说,加上保
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题三十四
三乙胺磷酸盐缓冲液作流动相,柱压一天比一天高,该怎么样解决?答:把柱子再生下,再生的方法搜一下有很多反冲对绝大部分色谱柱都是可行的, 效果不错。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十一
waters AtlantisC18 柱可以用较高比例的流动相,那麽用完后应该怎麽清洗?在什麽体系中保存比教合适?答:反相柱都可以用下面通用的方法清洗维护:流动相中不含缓冲盐 。分析完成后,用甲醇(或乙腈):水=90:10 反向冲洗色谱柱 45min。流动相中含有缓冲盐。分析完成后,先用甲醇(或乙
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题三十五
关于配置流动相,有机相我们可以甲醇乙腈同时用,这个是基于什么考虑的?是不是根据甲醇乙腈选择性不同、样品在这个两者的溶解度的差异以及调节洗流动相脱能力来考虑的?答:甲醇和乙腈同时用,可以获得单纯的甲醇或者乙腈不一样的选择性,而且洗脱能力也会改变,根据多元流动相的强度因素 Sab.....=Saψa+S
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题七十一
做多肽药物时遇到下列问题:1)基线不稳定波动大,流动相 A :1%TFA 水溶液 B:1%TFA 乙腈溶液检测波长 210nm 流速 1.0ml/ml 什么原因?怎么解决?TFA 有什么作用?流动相中不加 TFA 见不到主峰,基线良好。2)做完肽类样品时怎么冲洗 C18 比较好;3)药典上
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十一
现在色谱柱和仪器的接口还没有标准化吗,除了检测池的出入管较小外,色谱柱的接口与PEEK头不匹配的有哪个型号的色谱柱,以后使用的时候需要注意一点。同时发现使用过金属接头的色谱柱再换成PEEK头,常易漏液,这是因为金属头易使色谱柱接口变形吗?答:色谱柱接头其实大都不是色谱柱厂商自己生产的,供货商有多个,
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十二
按照国标测定辣椒红色素中苏丹红含量,标品分离很好,峰也不错,但是辣椒红色素由于跟苏丹红性质很相似,且颜色较深,分离效果很差,收得率很低,测定结果偏差很大。该如何处理样品?色素是否会降低柱效?答:色素不会降低柱效,但辣椒红色素主峰浓度过大,会影响与临近杂质峰的分离。可考虑稀释样品,或试试用柱效更高的柱
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十二
为了节约成本我们自己填保护柱,用废的同型号柱子填。但填完以后做标样定量分析有所改变。请问其原因。答:不建议自己填保护柱柱芯,填得不好的柱芯会影响分离效果,也会影响定量分析结果。你不知道废柱子里的填料是不是受了污染,另外你填的柱芯肯定没有厂商填得好,如果影响到峰形,峰面积积分结果有所改变是可能的。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十三
色谱柱的接头,出口处用的是 peek 接头,请问都用 peek 接头不行么,为什么?答:都用 PEEK 接头我认为都可以的,当然 PEEK 接头的质量要过关。有人认为 PEEK 接头不耐压,估计是针对品质不好的产品说的。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十四
CN 基柱应该怎样维护才好呢?比如做完实验用什么流动相冲柱子、短期用什么溶剂保存、长期用什么溶剂保存等等。答:CN 可作正相柱,也可作反相柱用,除了保存溶剂有特殊要求外,其它维护办法和一般正相和反相柱没有多大区别。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十五
“水相” 指的是什么?纯水?CN 基柱保存在 40% 的乙腈里面,这个有不良后果吗?答:水相就是纯水。CN 基不适合保存在中等极性的溶剂中,除了可以低温保存在极性较大的纯水中外,还有可以保存在非极性溶剂如正己烷中。40% 乙腈水,属于中等极性溶剂,短期过夜保存可能问题不大,长期保存不太好,后果就是可
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十七
做农药残留分析的,用的是 UV2487 检测器,想问一下,C18 色谱柱用什么缓冲液比较好,我以前做三聚氰胺是用柠檬酸,辛烷磺酸钠,也用农药检测行不行?还有用 HLB 柱能不能去除蔬菜和水果中的杂质?答:C18 色谱柱用用磷酸盐,醋酸盐就比较好啊,离子对试剂不是个好东东,你要慎用。我们做三聚氰胺用三
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十一
通常我们在分析天然药物成分的时候结构复杂,无法考察组分的 PKa 值,哪我们如何去选择最合适的流动相或者是拖尾该怎么改善呢?答:如果天然产物中没有易电离的极性基团,就不需要用缓冲盐调节 pH。如果天然产物中既有酸性基团,也有碱性基团,譬如有 pKa=6.2 的羧基和 pKa=9.0 的氨基的两性物质
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十五
“样品与离子对生成紧密的结合物,离子对试剂掩藏化合物中的极性基团” 这句话是什么意思?离子对怎么样掩蔽化合物中极性基团?不就是通过静电引力的作用形成离子缔合物,来降低其极性的吗?答:离子对色谱是解决强极性物质在反相色谱中保留能力不足的一个有效的途径。有些碱性极性物质,即使用 100% 水相做流动相,
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十八
在梯度洗脱的时候,如果整个时间程序越长,保留时间的重现性越差,尤其是后出的峰重现性差更明显,我猜估计是流量本身的误差引起的,但是怎么尽量避免这种情况的出现,使保留时间重现性更好?答:这个要控制好环境温度和柱温,易挥发的流动相要适当密封,同时保留时间的漂移与仪器的精度也有关系。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十二
新的 C18 柱,在进样之前我用 100% 的甲醇冲了半个多小时。刚才看到上面写的要活化什么的?不知道我只冲洗半小时就开始用对柱子有没有影响?对出峰什么的有没有影响呢?答:不是所有的测定,都需要对新柱子用所测样品老化。但先按方法程序进样几针,观察到峰面积保留时间不再有明显变化,再开始正式测定,这是一
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十四
苯基柱,氰基柱该什么时候考虑用?答:苯基柱用于含苯环的芳香族化合物的测定时,具有较高的选择性。CN 柱可作为一个保留能力最弱的反相柱使用,也可作为一个活性降低的正相柱使用(保留时间比硅胶柱和氨基柱低很多)。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十五
多个样品不好不离的时候,请问该怎么通过选择合适的柱子来提高分离度?答:提高分离度可从三个主要影响因素来考虑,柱效、选择性和保留因子。可通过减小填料粒径和增加柱长提高柱效;选择性和固定相选择以及 pH 条件有关,通过选择合适的色谱柱和合适的 pH,可以提高选择性;有时候适当延长出峰时间增加保留因子,也
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十五
HPLC 柱前衍生和柱后衍生的相关问题?1)为什么要衍生?2)衍生化的分类?3)进行衍生,适用的化合物有哪些?4)进行衍生化的要求有哪些?5)柱前衍生和柱后衍生的优缺点?答:色谱技术中的化学衍生法系指在色谱过程中用特殊的化学试剂(一般称为衍生化试剂或标记试剂)使样品成分转变相应的衍生物之后进行分离检
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十六
同一根色谱柱在分析完三聚氰胺后,再分析苯甲酸、山梨酸、糖精钠时为什么保留时间会提前?答:色谱柱被强保留物质污染后,保留时间提前和滞后的情况都有,具体要看污染物的性质,还要看分析物、固定相和污染物三者共同作用的情况,情况比较复杂,有时候比较难预测是提前还是滞后。不过你平时维护的时候,注意在测定后将污染
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十八
反相离子对色谱法中,离子对是如何起作用的,是离子对试剂的非极性端溶解在填料的非极性端里,解离端伸向流动相,对含胺化合起离子交换作用,还是样品与离子对生成紧密的结合物,离子对试剂掩藏化合物中的极性基团,还是这种结合物是在解离与结合的动态平衡之中? 答:首先离子对试剂的解离端和目标离子形成离子缔合物,降
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十九
磷酸盐缓冲盐渗透力强,为什么,是因为与醋酸盐,枸椽酸盐相比,基团小吗,使用磷酸盐缓冲液与其它缓冲液相比,会使色谱柱寿命缩短多少?答:经常用磷酸盐,在其它条件差不多一样的情况下,柱子寿命肯定比不用磷酸缓冲盐相对短一些。但用磷酸盐也有不可取代的优点吧,否则不可能现在大部分人还在用。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题八十一
色谱柱技术的技术要点在哪里?答:色谱柱技术包括填料技术和装柱技术,填料技术自不待言,填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。国内和国外想比