离子交换色谱实验的基本流程介绍

预处理和装柱 1. 将超纯水与沉降胶按1:3 比例悬浮,轻轻搅匀; 2. 将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm 高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡; 3. 通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器; 4. 将柱出口端与色谱设备连接,以0.2MPa 恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,松开适配器,降低适配器至胶面下2mm 处,继续装填,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至柱上标记柱床位置下2mm。固定适配器,继续装填2~3 柱体积; 5. 确定柱体积,测量柱高,计算柱体积及记录装柱时的最大流速; 6. 选择最佳线速,用0.5mol/L NaOH 冲洗柱,冲洗3~5 体积; 7. 接着用超纯水冲柱,冲洗1......阅读全文

离子交换色谱仪流动相选择的基本原则

离子交换色谱仪流动相是用去离子水溶解淋洗剂配制而成,淋洗剂为电解质(含阳离子、阴离子),其中对分离起实际作用的离子称为淋洗离子。如以Na2CO3水溶液为流动相,分离无机阴离子时,Na2CO3是淋洗剂,CO32ˉ是淋洗离子。一、理论上选择流动相的原则:淋洗离子与树脂的亲和力应接近或稍高于被测离子。二、

实验室乳化机的基本操作及流程

  各项准备工作完毕以后,接通电源,便可按规定要求进行工作。运转部件有主锅搅拌系统、主锅均质系统,主锅升降系统,副锅搅拌系统,真空泵系统。控制通过面板上的按钮进行,可控制照明灯的照明与熄灭,控制主锅搅拌的运转,控制主锅均质的运转,控制副锅搅拌的运转,控制真空泵的运转以及主副锅的加热。  ①打开电源→

实验室乳化机的基本操作及流程

  各项准备工作完毕以后,接通电源,便可按规定要求进行工作。运转部件有主锅搅拌系统、主锅均质系统,主锅升降系统,副锅搅拌系统,真空泵系统。控制通过面板上的按钮进行,可控制照明灯的照明与熄灭,控制主锅搅拌的运转,控制主锅均质的运转,控制副锅搅拌的运转,控制真空泵的运转以及主副锅的加热。  ①打开电源→

关于高效液相色谱的离子交换的原理介绍

  (Ion-exchange Chromatography)  IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流  动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:X-(溶剂中) (树脂

离子交换色谱的保存方法

离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同,其与离

离子交换色谱介质的选择

  离子交换介质首先要考虑目的分子的大小,因为目的分子会影响其接近介质上的带电功能集团,因此也会影响介质对目的分子的动力载量,从而影响其分离。对于大多数纯化步骤来说,建议从开始的阶段使用强离子交换柱,可在摸索方法的过程中有一个宽的pH 范围。对于已知等电点的蛋白质,可根据其等电点来选择。而未知等电点

简介离子交换色谱的原理

  离子交换是利用一种不溶性高分子化合物,它的分子中具有解离性基团(交换基),在水溶液中能与溶液中的其他阳离子或阴离子起交换作用。此种交换反应都是可逆的,一般也都是遵循化学平衡的规律。虽然交换反应都是平衡反应,但在色谱柱上进行时,由于连续添加新的交换溶液,平衡不断按正反应方向进行,直至完全,因此可以

离子交换色谱的应用方向

离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离,在生物化学领域得到了广泛的应用。

高效液相色谱分析法—离子交换色谱的介绍

  这个方法是用填料的固定相的离子交换基团和样品的离子基团之间的离子交换来分离样品组分的,按照所交换的离子分成阳离子交换和阴离子交换。  离子交换色谱使用于能溶于水的离子型物质。在离子交换色谱中,流动相的盐的浓度、PH及盐的种类等都对保留值有很大的影响。在高效液相色谱的离子交换中所用的盐有磷酸盐、醋

离子色谱仪基本构造及工作流程

和一般的HP LC 仪器一样, 现在的离子色谱仪一般也是先做成一个个单元组件, 然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来。zui基本的组件是流动相容器、高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统。此外,可根据需要配置流动相在线脱气装置、自动进样系统、流动相抑制系统、柱后反应系统和全自动控制系统

离子交换层析的基本概述

  离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后

分子诊断的基本流程

多年来,大部分分子诊断实验室的核心技术都主要集中在检测特异性、相对较短的DNA或RNA片段上。该技术能诊断传染性疾病、鉴别影响药物代谢的特殊基因变异型或检测与疾病有关的基因,如与癌症有关的基因。这些检测的核心是实时定量聚合酶链反应(PCR)、转录调节扩增(TMA)、靶向扩增和信号扩增等类似技术的应用

离子交换色谱仪离子交换剂(二)

4、两性树脂:两性树脂是同时含有酸、碱两种基团的离子交换树脂,相反电荷的活性基团可以在同一条分子链上,也可以在两条相接近的大分子链上。有强碱-弱酸型和弱酸-弱碱型。两性树脂再生是当温度自25℃升至高85℃时,水的解离度增加,使H+和OHˉ的浓度增大30倍。可作为再生剂。二、按基质结构分类:合成疏水性

离子交换色谱仪离子交换剂(三)

第二节 亲水性离子交换剂 亲水性离子交换剂(多糖基离子交换剂)与水亲和力较大,有纤维素离子交换剂、葡聚糖离子交换剂和琼脂糖离子交换剂等。一、纤维素离子交换剂:又称离子交换纤维素,是以微晶纤维素为基质,引入电荷基团而制成。微晶纤维素(纤维素胶或结晶纤维素)是将纤维性植物材料与无机酸捣成浆状,经处理使之

高效离子交换色谱仪离子交换剂

高效离子交换色谱仪离子交换剂由基质、活性基团和可交换离子(反离子)组成,按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂和亲水性离子交换剂。第一节 疏水性离子交换剂疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。

离子交换色谱仪离子交换树脂类型

在离子交换色谱仪离子交换树脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子,二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体,在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。按电荷基团酸性强弱可分为

离子交换色谱仪离子交换剂类型

离子交换色谱仪离子交换剂有离子交换树脂、多糖基离子交换剂和离子交换键合相等类型。一、离子交换树脂:1、凝胶型离子交换树脂:溶胀空隙。(1)强酸性阳离子交换树脂:1)活性基团:-SO3H。2)典型交换反应:RSO3H + NaCl = SO3Na + HCl3)特点:使用时不受pH值限制。(2)弱酸性

离子交换色谱仪酸性离子交换树脂

离子交换色谱仪酸性离子交换树脂有强酸性离子交换树脂、弱酸性离子交换树脂和中等酸性离子交换树脂。一、强酸性离子交换树脂:强酸性离子交换树脂一般是以磺酸基(-SO3H)为活性基团的阳离子交换树脂。含磺酸基的强酸性离子交换树脂是以苯乙烯为母体,以二乙烯苯为交联剂共聚后再经磺化引入磺酸基制成的。常用R-S

离子交换色谱仪离子交换树脂简介

离子交换色谱仪离子交换树脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的网状结构,不溶于水和有机溶剂,性质稳定。一、离子交换树脂的类型:1、阳离子交换树脂:可交换的离子为阳离子。应注意PH值范围,否则交换容量急剧下降。2、阴离子交换树脂:可交换的离子为阴离子。三、离子交换树脂的特性:1、交联度:表示交联剂在树脂中

离子交换色谱仪离子交换树脂分类

离子交换色谱仪离子交换树脂由基质、活性基团和可交换离子组成,是一种与水亲和力较小的人工合成树脂,zui常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成的聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团。离子交换树脂含有大量的活性基团,交换容量大,流速快,机械强度大,主要用于无机离子、有机酸、核苷酸和氨基酸等小

离子交换色谱仪离子交换剂(一)

第一节 疏水性离子交换剂 疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。一、按引入电荷基团的性质分类:1、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物

离子交换色谱仪阴离子交换树脂

离子交换色谱仪阴离子交换树脂是在基质骨架上引入季胺基[-N(CH3)3]、叔胺基[-N(CH3)2]、仲胺基[-NHCH3]和伯胺基[-NH2]制成的。阴离子交换树脂按胺基碱性强弱可分为强碱性、弱碱性和中等碱性阴离子交换树脂。一、强碱性阴离子交换树脂:强碱性阴离子交换树脂是以季胺基为交换基团的离子交

离子交换色谱仪离子交换树脂类型

在离子交换色谱仪离子交换树脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子,二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体,在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂:        阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。    

离子色谱的分离方式—高效离子交换色谱

  HPIC 的分离机理主要是离子交换,是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的离子之间进行的可逆交换。依据不同离子对交换剂的不同亲合力而被逐渐分离。它是离子色谱的主要分离方式,用于亲水性阴、阳离子的分离。如以 NaOH 为淋洗液分析水体中阴离子时,先用淋洗液平衡阴离子交换分离柱,再

离子交换色谱仪的色谱泵系统

离子交换色谱仪的色谱泵系统的作用是将淋洗液以稳定的流速输送到色谱柱。一、材质:离子交换色谱的淋洗液为酸、碱溶液,与金属接触会对其产生化学腐蚀。如果选择不锈钢泵头,腐蚀会导致色谱泵漏液、流量稳定性差和色谱柱寿命缩短等。泵头应选择全PEEK材质(色谱柱正常使用压力一般小于20MPa)。二、泵类型:1、单

离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量

离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量是指离子交换树脂能提供交换离子的量,是表征离子交换树脂活性基团数量或交换能力的重要参数。一般情况下,交联度越低,活性基团数量越多,交换容量越大。通常以每毫克或每毫升树脂中含有可解离基团的毫克当量数(meq/mg或meq/mL)表示。一、理论交换容量:理论交换容量是

关于胡萝卜素的实验流程介绍

  1、原料加工:取500g新鲜胡萝卜,清水清洗,沥干、粉碎、烘干。  2、原料装填:将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。  3、加热萃取:安装萃取回流装置,沸水浴加热萃取30min。  4、过滤:将萃取物过滤,除去固体物,得到萃取液。  5、浓缩:安装水蒸气蒸馏装置,加热萃取液,萃取剂挥发,得

凝胶色谱法实验技术—层析柱的基本介绍

  层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高

关于阳离子交换剂的基本信息介绍

  阳离子交换剂是具有阳离子交换功能的物质,可分为无机和有机离子交换剂。例如由第Ⅳ族元素的氧化物与V族元素或Ⅵ族元素的氧化物结合而成的无机离子交换剂(高岭土、方沸石)和离子交换树脂;多糖类的纤维素、泥煤、腐植上等有机离子交换剂等。  主要用于水处理(水软化、高压锅炉用水处理,制取无离子水及海水淡化等

离子交换器的分类及典型工艺流程

  分类  离子交换器内装设的交换剂在交换过程中处于固定位置,此类离子交换器称为固定床,并且原水的交换处理和树脂失效后再生是在同一交换器内、不同时间里分别进行的。固定床离子交换器根据交换器内树脂的种类可分为单床、双床和混床。装填单一树脂的为单床;装填强、弱两种树脂的为双床;装填阴、阳两类树脂的为混床