高效液相色谱分析法—离子交换色谱的介绍

这个方法是用填料的固定相的离子交换基团和样品的离子基团之间的离子交换来分离样品组分的,按照所交换的离子分成阳离子交换和阴离子交换。 离子交换色谱使用于能溶于水的离子型物质。在离子交换色谱中,流动相的盐的浓度、PH及盐的种类等都对保留值有很大的影响。在高效液相色谱的离子交换中所用的盐有磷酸盐、醋酸盐和硼酸盐。因为氯化物会腐蚀不锈钢仪器,在高效液相色谱中不能使用NaCl或其他的氯化物盐类。根据测量波长有些盐也不能使用,例如,醋酸吸收大约在210nm,当检测处在短波端的时候,用醋酸作流动相是不合适的。......阅读全文

离子交换色谱

实验方法原理离子交换色谱是将离子交换基因(CM、SP、Q、DEAE等)键合于一定的惰性载体(纤维素、交联葡聚糖,交联琼脂糖等)之上,并以此作为固定相,依据样品所带电荷的不同,从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病毒

离子交换色谱

离子交换色谱             实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因(CM、SP、Q、DEAE等)键合于一定的惰性载体(纤维素、交联葡聚糖,交联琼脂糖等)之上,并以此作

离子交换色谱

洗脱方式的选择,离子交换色谱洗脱方式有三种:一是改变缓冲液pH,使蛋白质从吸附状态变为解吸附状态。如在阴离子交换色谱中,通过降低流动相pH使吸附在柱子上的带负电荷的蛋白质带正电,从而达到解吸附,在阳离子交换色谱中则是通过升高流动相pH的方法达到解吸附;二是增加缓冲液的离子强度,将吸附强的分子从离子交

离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量

离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量是指离子交换树脂能提供交换离子的量,是表征离子交换树脂活性基团数量或交换能力的重要参数。一般情况下,交联度越低,活性基团数量越多,交换容量越大。通常以每毫克或每毫升树脂中含有可解离基团的毫克当量数(meq/mg或meq/mL)表示。一、理论交换容量:理论交换容量是

离子交换色谱概述

  离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH 或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同,

高效离子交换色谱

  应用离子交换的原理,采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子,这在离子色谱中应用最广泛,其主要填料类型为有机离子交换树脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架,在苯环上引入磺酸基,形成强酸型阳离子交换树脂,引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂,此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型的物理结构,以便于

离子交换色谱(二)

其他 一、离子交换剂的选择 1.  剂型的选择 在决定选择离子交换剂的类别之前,先要了解所研究的生物大分子保持生物活性和可溶解性的pH范围,然后根据其等电点以及其在上述pH范围内的电泳行为观察大分子的带电情况,再据此选择合适的离子交换剂。具体方法是;在流动相pH条件下进行电泳,向阳极泳动的蛋白质,可

离子交换色谱(一)

实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因(CM、SP、Q、DEAE等)键合于一定的惰性载体(纤维素、交联葡聚糖,交联琼脂糖等)之上,并以此作为固定相,依据样品所带电荷的不同,从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病

离子交换色谱仪离子交换介质

离子交换色谱仪离子交换介质由基质、活性基团和可交换离子组成,按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂(树脂)和亲水性离子交换剂。一、疏水性离子交换剂(树脂):疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的

高效离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量

  高效离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量是指离子交换树脂能提供交换离子的量,是表征离子交换树脂活性基团数量或交换能力的重要参数。一般情况下,交联度越低,活性基团数量越多,交换容量越大。通常以每毫克或每毫升树脂中含有可解离基团的毫克当量数(meq/mg或meq/mL)表示。一、理论交换容量:   

离子交换色谱仪离子交换树脂类型

在离子交换色谱仪离子交换树脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子,二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体,在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。按电荷基团酸性强弱可分为

离子交换色谱仪酸性离子交换树脂

离子交换色谱仪酸性离子交换树脂有强酸性离子交换树脂、弱酸性离子交换树脂和中等酸性离子交换树脂。一、强酸性离子交换树脂:强酸性离子交换树脂一般是以磺酸基(-SO3H)为活性基团的阳离子交换树脂。含磺酸基的强酸性离子交换树脂是以苯乙烯为母体,以二乙烯苯为交联剂共聚后再经磺化引入磺酸基制成的。常用R-S

离子交换色谱仪离子交换剂(二)

4、两性树脂:两性树脂是同时含有酸、碱两种基团的离子交换树脂,相反电荷的活性基团可以在同一条分子链上,也可以在两条相接近的大分子链上。有强碱-弱酸型和弱酸-弱碱型。两性树脂再生是当温度自25℃升至高85℃时,水的解离度增加,使H+和OHˉ的浓度增大30倍。可作为再生剂。二、按基质结构分类:合成疏水性

离子交换色谱仪阴离子交换树脂

离子交换色谱仪阴离子交换树脂是在基质骨架上引入季胺基[-N(CH3)3]、叔胺基[-N(CH3)2]、仲胺基[-NHCH3]和伯胺基[-NH2]制成的。阴离子交换树脂按胺基碱性强弱可分为强碱性、弱碱性和中等碱性阴离子交换树脂。一、强碱性阴离子交换树脂:强碱性阴离子交换树脂是以季胺基为交换基团的离子交

离子交换色谱仪离子交换树脂类型

在离子交换色谱仪离子交换树脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子,二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体,在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂:        阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。    

离子交换色谱仪离子交换剂(三)

第二节 亲水性离子交换剂 亲水性离子交换剂(多糖基离子交换剂)与水亲和力较大,有纤维素离子交换剂、葡聚糖离子交换剂和琼脂糖离子交换剂等。一、纤维素离子交换剂:又称离子交换纤维素,是以微晶纤维素为基质,引入电荷基团而制成。微晶纤维素(纤维素胶或结晶纤维素)是将纤维性植物材料与无机酸捣成浆状,经处理使之

离子交换色谱仪离子交换剂类型

离子交换色谱仪离子交换剂有离子交换树脂、多糖基离子交换剂和离子交换键合相等类型。一、离子交换树脂:1、凝胶型离子交换树脂:溶胀空隙。(1)强酸性阳离子交换树脂:1)活性基团:-SO3H。2)典型交换反应:RSO3H + NaCl = SO3Na + HCl3)特点:使用时不受pH值限制。(2)弱酸性

离子交换色谱仪离子交换树脂简介

离子交换色谱仪离子交换树脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的网状结构,不溶于水和有机溶剂,性质稳定。一、离子交换树脂的类型:1、阳离子交换树脂:可交换的离子为阳离子。应注意PH值范围,否则交换容量急剧下降。2、阴离子交换树脂:可交换的离子为阴离子。三、离子交换树脂的特性:1、交联度:表示交联剂在树脂中

高效离子交换色谱仪离子交换剂

高效离子交换色谱仪离子交换剂由基质、活性基团和可交换离子(反离子)组成,按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂和亲水性离子交换剂。第一节 疏水性离子交换剂疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。

离子交换色谱仪离子交换剂(一)

第一节 疏水性离子交换剂 疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。一、按引入电荷基团的性质分类:1、阳离子交换树脂:阳离子交换树脂的电荷基团带负电,反离子带正电,可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物

离子交换色谱仪离子交换树脂分类

离子交换色谱仪离子交换树脂由基质、活性基团和可交换离子组成,是一种与水亲和力较小的人工合成树脂,zui常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成的聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团。离子交换树脂含有大量的活性基团,交换容量大,流速快,机械强度大,主要用于无机离子、有机酸、核苷酸和氨基酸等小

离子交换色谱的分类

离子交换剂分为两大类,即阳离子交换剂和阴离子交换剂。各类交换剂根据其解离性大小,还可分为强、弱两种,即 强酸剂 阳离子交换剂  弱酸剂 强碱型 阴离子交换剂 弱碱型 。阳离子交换剂阳离子交换剂中的可解离基因是磺酸(-SO3H)、磷酸(-PO3H2)、 羧酸(COOH)和酚羟基(-OH)等酸性基。某些

离子交换色谱的原理

离子交换色谱的原理离子交换是利用一种不溶性高分子化合物,它的分子中具有解离性基团(交换基),在水溶液中能与溶液中的其他阳离子或阴离子起交换作用。此种交换反应都是可逆的,一般也都是遵循化学平衡的规律。虽然交换反应都是平衡反应,但在色谱柱上进行时,由于连续添加新的交换溶液,平衡不断按正反应方向进行,直至

离子交换色谱的应用

  离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离,在生物化学领域得到了广泛的应用。

离子交换色谱的原理

  离子交换是利用一种不溶性高分子化合物,它的分子中具有解离性基团(交换基),在水溶液中能与溶液中的其他阳离子或阴离子起交换作用。此种交换反应都是可逆的,一般也都是遵循化学平衡的规律。虽然交换反应都是平衡反应,但在色谱柱上进行时,由于连续添加新的交换溶液,平衡不断按正反应方向进行,直至完全,因此可以

离子交换色谱的种类

  1 前言  离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH 或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质

离子交换色谱法

  一. 原理   离子交换色谱的固定相是交换剂,根据交换剂性质可分为:  阳离子交换剂和阴离子交换剂。   交换剂由固定的离子基团和可交换的平衡离子组成。当流动相带着组分离子通过离子交换柱时,组分离子与交换剂上可交换的平衡离子进行可逆交换,最后达到交换平衡,阴阳离子的交换平衡可表示为:   阳离子

离子交换色谱法

离子交换色谱法:利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法,利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分

离子交换色谱法

以离子交换树脂或化学键合离子交换剂为固定相,利用被分离组分离子交换能力的差别或选择性系数的差别而实现分离的色谱方法称为离子交换色谱法。按照可交换离子所带电荷符号的不同又可分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。

高效离子交换色谱简介

  高效离子交换色谱,应用离子交换的原理,采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子,这在离子色谱中应用最广泛,其主要填料类型为有机离子交换树脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架,在苯环上引入磺酸基,形成强酸型阳离子交换树脂,引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂,此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型