荧光光谱仪单分子荧光检测方法分析
单分子荧光检测。单分子荧光分析是实现单分子检测最灵敏的光分析技术。单分子荧光检测的关键在于确保被照射的体积中只有一个分子与激光发生作用以及消除杂质荧光的背景干扰。单分子荧光检测可提供单分子水平上生物分子反应的动力学信息,分子构象以及构象随时间的变化,因此尤其在生命科学领域中具有广阔的应用前景,为生命科学提供了新的研究手段。......阅读全文
单分子荧光检测法实现生物膜界面的精密物理测量
膜蛋白在细胞代谢中起着至关重要的作用。研究膜蛋白特定区域在生物膜上的位置,尤其是沿垂直于膜方向的位置及其动态变化,对于理解膜蛋白的功能及相关的分子机制有重要意义。一些传统的生物物理技术如核磁共振(NMR)等可以给出时间和系综平均的数据,但如何实时追踪单个膜蛋白在约4纳米厚的膜内或膜表面几纳米范围
什么是单波长X射线荧光光谱仪
通常的X射线荧光光谱仪分为能量色散X射线荧光光谱仪(ED XRF)和波长色散X射线荧光光谱仪(WD XRF),其以X射线管出射谱照射样品后产生的元素荧光射线是以能量色散型探测器直接探测(ED XRF)或是经分光晶体分光后探测器探测(WD XRF)为主要区别。单波长X射线荧光光谱仪是在X射线照射样品前
什么是单波长X射线荧光光谱仪
通常的X射线荧光光谱仪分为能量色散X射线荧光光谱仪(ED XRF)和波长色散X射线荧光光谱仪(WD XRF),其以X射线管出射谱照射样品后产生的元素荧光射线是以能量色散型探测器直接探测(ED XRF)或是经分光晶体分光后探测器探测(WD XRF)为主要区别。单波长X射线荧光光谱仪是在X射线照射样品前
荧光光谱仪中的单光子计数技术
单光子计数技术是利用在弱光下PMT输出信号自然离散化的特点,采用放大技术和精密的脉冲幅度甄别技术以及数字计数技术,可把淹没在北京噪声中的荧光信号提取出来。当荧光到达PMT的光电子阴极时,每个入射光子以一定的概率(即量子效率)使光阴极发射一个电子。这个光电子经倍增系统的倍增最后在阳极回路中形成一个电流
X射线荧光光谱仪的分析方法介绍
X射线荧光光谱仪具有重现性好,测量速度快,灵敏度高的特点,分为波长色散、能量色散、非色散X荧光、全反射X荧光。分析对象适用于炼钢、有色金属、水泥、陶瓷、石油、玻璃等行业样品。X射线荧光光谱法有如下特点: 分析的元素范围广,从4Be到92U均可测定;荧光X射线谱线简单,相互干扰少,样品不必分离,分析方
X射线荧光光谱仪的分析方法介绍
X射线荧光光谱仪具有重现性好,测量速度快,灵敏度高的特点,分为波长色散、能量色散、非色散X荧光、全反射X荧光。分析对象适用于炼钢、有色金属、水泥、陶瓷、石油、玻璃等行业样品。X射线荧光光谱法有如下特点: 分析的元素范围广,从4Be到92U均可测定;荧光X射线谱线简单,相互干扰少,样品不必分离,分析方
分子荧光寿命
荧光寿命(lifetime):去掉激发光后,分子的荧光强度降到激发时最大荧光强度的1/e(备注:e为自然对数的底数,其值约为2.718)所需要的时间,称为荧光寿命.荧光分子处于S1激发态的平均寿命,可用下式表示:τ f = 1 /(kf + ΣK)(典型的荧光寿命在10-8~10-10s) kf表
分子荧光光谱仪的缺点有哪些?
分子荧光光谱仪劣势 在经典分析中,影响谱线强度的因素较多,尤其是试样组份带来的光谱重叠等,所以对标准参比的组份要求较高。 难于作绝对定量分析,需要精确的标样做比较。含量(浓度)较大时,准确度较差。 对样品化合物有共轭性要求,应用不广泛.
分子荧光光谱仪的优劣势
分子荧光光谱仪优势 制样简单,试样多数不需经过化学处理就可分析,且固体、液体试样均可直接分析。 分析速度快。虽然测定用时与测定精密度有关,但一般都很短,2~5分钟就可以测完样品中的全部待测元素。 多元素同时检出能力。可同时检测一个样品中的多种元素。一个样品一经激发,样品中各元素都各自发射出
分子荧光分析法的应用
1:特点 荧光分子所处的外部化学环境对荧光强度有直接影响.选择合适的条件不但可以使荧光加强.提高测定的灵敏度.同时.还可以控制干扰物质的荧光产生.改善分析的选择性。分了荧光分析法具有如下特点: (l)灵敏度高.山于是在黑背景下测定荧光发射强度一般而言,分子荧光分析法的灵敏度比紫外一
分子荧光光谱分析
分子荧光光谱分析编辑molecular fluorescence analysis当物质分子吸收了特征频率的光子,就由原来的基态能级跃迁至电子激发态的各个不同振动能级。激发态分子经与周围分子撞击而消耗了部分能量,迅速下降至第一电子激发态的最低振动能级,并停留约10-9秒(10的负9次方秒)之后,直接
分子荧光分析法的应用
1.特点荧光分子所处的外部化学环境对荧光强度有直接影响.选择合适的条件不但可以使荧光加强.提高测定的灵敏度.同时.还可以控制干扰物质的荧光产生.改善分析的选择性。分了荧光分析法具有如下特点:(l)灵敏度高.山于是在黑背景下测定荧光发射强度一般而言,分子荧光分析法的灵敏度比紫外一可见吸收光洪分析法高2
荧光光谱仪三维荧光分析的相关介绍
三维荧光分析。普通荧光分析所得的光谱是二维谱图,而描述荧光强度同时随激发和发射波长变化的关系谱图,就是三维荧光光谱。它可以提供比常规荧光光谱和同步荧光光谱更为完整的光谱信息,是很有价值的光谱指纹技术。三维荧光光谱可以作为光谱指纹技术在环境监测(溶解有机质的分布等)、临床化学(根据癌细胞荧光代谢产
荧光光谱仪的分子荧光光谱关键技术指标介绍
荧光光谱仪的光谱分辨率。光谱分辨率是指把光谱特征、谱带分解成为分离成分的能力。高级的荧光光谱仪分辨率可达0.5~1nm。 荧光光谱仪的频谱范围。高级的荧光光谱仪可覆盖200nm~1500nm。 荧光光谱仪中的波长准确度和波长重复性。波长准确度,是指波长的实际测定值与理论值(真值)的差,高端仪
分子荧光和分子磷光
分子和原子一样,也有它的特征分子能级,分子内部的运动可分为价电子运动、分子内原子在平衡位置附近的振动和分子绕其重心的转动。因此分子具有电子能级、振动能级和转动能级。 分子从外界吸收能量后,就能引起分子能级的跃迁,即从基态跃迁到激发态,分子吸收能量同样具有量子化的特征,即分子只能吸收等于二个能级
荧光显微技术检测方法
(一)直接法:用特异荧光抗体直接滴加于标本上,使之与抗原发生特异性结合。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,且每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。(二)间接法:可用于检测抗原和抗体。本法有两种抗体相继作用,第一抗体为针对抗原的特异抗体,第二抗体(荧光抗体)为针对第一抗
各种荧光检测方法简介
1、流式,优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样品只被检测一次,因此无法对同一个样品进行连续观察。例如,做膜蛋白定位时会得到这么一个结果——用流式可以检测出信号,但
各种荧光检测方法简介
1、流式: 优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。 缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样品只被检测一次,因此无法对同一个样品进行连续观察。例如,做膜蛋白定位时会得到这么一个结果——用流式可以
各种荧光检测方法介绍
1、流式: 优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。 缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样品只被检测一次,因此无法对同一个样品进行连续观察。例如,做膜蛋白定位时会得到这么一个结果——用流式可以检测出
各种荧光检测方法简介
1、流式: 优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。 缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样品只被检测一次,因此无法对同一个样品进行连续观察。例如,做膜蛋白定位时会得到这么一个结果——用流式可以检测出信号
荧光定量PCR检测方法
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法: 在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信
单波长X射线荧光光谱仪原理与应用
一、 概述 单波长X射线荧光光谱仪(Monochromatic Excitation X-ray Fluorescence Spectrometer: ME XRF),也可称为单色化激发X射线荧光光谱仪,其通过单色化光学器件将X射线管出射谱某单一波长(对应单一能量)衍射取出并照射样品,由于消除
概述荧光分析的分析方法
直接测定法 利用物质自身发射的荧光进行测定分析。 间接测定法 不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标
X荧光光谱仪制样方法
一、X荧光光谱仪分析方法是一个相对分析方法,任何制样过程和步骤必须有非常好的重复操作可能性,所以用于制作标准曲线的标准样品和分析样品必须经过同样的制样处理过程。 X 射线荧光实际上又是一个表面分析方法,激发只发生在试样的浅表面,必须注意分析面相对于整个样品是否有代表性。此外,样品的平均粒度和粒度
X荧光光谱仪测试方法
1、 X荧光光谱仪样品制备 进行x射线荧光光谱分析的样品,可以是固态,也可以是水溶液。无论什么样品,样品制备的情况对测定误差影响很大。对金属样品要注意成份偏析产生的误筹;化学组成相同,热处理过程不同的样品,得到的计数率也不同;成份不均匀的金属试样要重熔,快速冷却后车成圆片;对表面不平的样品要
关于原子荧光光谱仪的分析方法介绍
物质吸收电磁辐射后受到激发,受激原子或分子以辐射去活化,再发射波长与激发辐射波长相同或不同的辐射。当激发光源停止辐照试样之后,再发射过程立即停止,这种再发射的光称为荧光;若激发光源停止辐照试样之后,再发射过程还延续一段时间,这种再发射的光称为磷光。荧光和磷光都是光致发光。 原子荧光光谱分析法具
X射线荧光光谱仪无标样分析方法
对于以固体进样为主的X射线荧光分析技术,要获得一套高质量的固体标准样品有一定难度,限制了X射线荧光分析的应用范围。 而X射线荧光光谱无标样分析技术是20世纪90年代推出的新技术,其目的是不用标准样品也可以分析各种样品。它的基本思路是:由仪器制造商测量标准样品,储存强度和工作曲线,然后将这些数据
分子荧光和原子荧光的区别
分子荧光和原子荧光都是光致发光,二者都是价电子跃迁,但因为前者会伴随有振动能级和转动能级的跃迁,所以是连续发射,而后者是分立的线发射;前者分析物一般是处于溶液状态,后者需要转化成气态原子;前者测定的主要是含有共轭不饱和体系的化合物,而后者测定的主要是金属元素的含量;前者采用的主要是氙灯或高压汞灯,而
荧光PCR的分析方法
对荧光定量PCR结果的分析方法我们分为两种:绝对定量分析法和相对定量分析法。1、绝对定量分析方法,起始浓度的对数跟循环数的线性关系,标准曲线由已知拷贝数的标准品绘制,根据样品的Ct值,可求样品的模板量。(1)标准品的制备:1V的样品原液(i)+9V稀释缓冲液,得到ii;1V的ii +9V稀释缓冲液,
原子荧光分析方法
物质吸收电磁辐射后受到激发,受激原子或分子以辐射去活化,再发射波长与激发辐射波长相同或不同的辐射。当激发光源停止辐照试样之后,再发射过程立即停止,这种再发射的光称为荧光;若激发光源停止辐照试样之后,再发射过程还延续一段时间,这种再发射的光称为磷光。荧光和磷光都是光致发光。原子荧光光谱分析法具有很高的