高效液相层析的概述
70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。用直径约3~10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1~2微米的二氧化硅,经硫酰氯反应生成Si—Cl,进一步连接疏水的烷基,如Si—C18H37,或阳离子交换基团—Si(CH2)n—C6H4SO3H,或阴离子交换基团—Si(CH2)nNH2。这种支持物能承受很高的压力,化学性能稳定。用不同类型支持物的HPLC,可做吸附层析、离子交换层析和凝胶过滤层析。其分析微量化可达10-10克水平。但用于制备,可以纯化上克的样品。展层时间短,一般需几分钟到10余分钟。其分析速度、精确度可与气相层析媲美。HPLC适于分析分离不挥发和极性物质。而气相层析只适用于挥发性物质,两者互为补充,都是最为理想的层析法。HPLC配有程序控制洗脱溶剂的梯度混合仪,数据处理的积分仪和记录仪等电子系统,成为一种先进的分析仪器,在......阅读全文
离子交换高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材 交换柱实验步骤 1. 在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IE
离子交换高效液相层析实验
阴离子交换HPLC 阳离子交换HPLC 实验材料 蛋白质 试剂、
高效液相层析的操作注意事项
1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。3). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4). 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,
关于高效液相层析的适应范围介绍
气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子
关于高效液相层析法的基本介绍
高效液相层析法(HPLC)是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。由于HPLC分离能力强、测定灵敏度高,可在室温下进行,应用范围极广,无论是极性还是非极性,小分子还是大分子,热稳定还是不稳定的化合物均可用此法测定。对蛋
反相高效液相层析的基本概念
中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学
高效液相层析的基本定义和特点
高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而
反相高效液相层析的概念和应用
中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学
简述高效液相层析的操作注意要点
1)首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。 2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直
高效液相层析的分离系统相关介绍
该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(
纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点
纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
反相高效液相色谱概述
结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2~20 氨基酸组成的肽中,可减少在柱上
全自动液相层析系统概述
全自动液相层析系统是一种用于生物学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2010年6月25日启用。 技术指标 尺寸:长=860mm,宽=710mm,高=660mm;重量:116kg;功率:1100w; 内置压力感应器:系统泵,样品泵,柱前、柱后各一个; 内置气泡感应器:样品入口、A泵、B泵
关于高效液相层析的基本信息介绍
高效液相层析(又名高压液相色谱),70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达3.5万KPa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填
关于高效液相层析的注意事项介绍
1)流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。 2)柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。 3)所有过柱子的液体均需严格的过滤。 4)压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 . 5)因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱
高效液相层析的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
关于高效液相层析法的主要类型介绍
⑴ 液-固吸附层析:固定相是具有吸附活性的吸附剂,常用的有硅胶、氧化铝、高分子有机酸或聚酰胺凝胶等。液-固吸附层析中的流动相依其所起的作用不同,分为 “底剂”和洗脱剂两类,底剂起决定基本色谱的分离作用,洗脱剂起调节试样组份的滞留时间长短,并对试样中某几个组份具有选择性作用。流动相中底剂与洗脱剂成
高效液相层析的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
关于高效液相层析法使用仪器的介绍
典型的高效液相层析仪包括输液系统、层析柱与检测系统三部分。流动相用一高压泵输入。这种高压泵应满足以下条件: ①流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围。 ②能抗溶剂腐蚀。 ③有较高的输出压力,一般要达到15~300kg/c,也有的高达800kg/c。 ④泵的死体积要小。梯度洗脱装置必须具备两
高效液相层析法的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
高效液相层析技术的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间
液相层析的定义
中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定 义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
高效液相和超高效液相的区别
超高效液相系统耐压更高,可以以更高的流速进行分析,并且在高流速下仍能保持很好的理论塔板数。高效指的就是效率更高,即在同样的时间内可以分析更多的样品。高效液相色谱是相对经典液相色谱来说的,高效液相色谱具有更细的流动相传输管路,内径更细的色谱柱,从而使死体积变小,理论塔板数更高,分析时间更短。超高效就是
高效液相层析的应用特点和常用支持物介绍
其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。用直径约3~10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1~2微米的二氧化硅,经硫酰氯反应生成Si—Cl,进一步连接疏水的烷基,如Si—C18H37,或阳离子交换基团—Si(CH2)n—C6H4
反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15
液相层析的基本定义
中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定 义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
什么是液相层析?
中文名称液相层析英文名称liquid chromatography;LC定 义以液体作为流动相的一种层析法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
关于气相层析的信息概述
属于分配层析或吸附层析,仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物(如磨细的耐火砖)上覆盖一层高沸点液体,如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。 外涂层约为支持物重量的20%。分析时操作温度范围,一般从室温到200℃。特殊的层析柱能达到500℃。流动相常用氦、氩或氮为展层
藻类多糖的结构与生物活性研究实验_高效液相层析法
实验材料大型藻类试剂、试剂盒NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤(1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧杯,边搅拌边加入
离子交换高效液相层析实验_阴离子交换HPLC
实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材交换柱实验步骤1. 在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IEX柱,对4