关于微生物培养的实验常用培养基的制备、灭菌与消毒
一、实验目的 了解培养基的配制原理;掌握配制培养基的一般方法和步骤;了解常见灭菌、清毒基本原理及方法;掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊......阅读全文
微生物实验室培养用品的清洗与消毒!
目前我国细胞培养器皿主要仍使用能反复使用的玻璃器皿,清洗的主要目的为清除杂质和微生物,使在器皿内不残留任何影响细胞生长的成份。因而在组织细胞培养中清洗和消毒是一项极为重要的环节。 (一) 清洗 在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分
合成培养基配制实验——无血清培养基的制备
实验材料ECM试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材滤膜实验步骤1. 选择适宜的培养基质(ECM),先制备成贮存干液;2. 使用前,贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液;3. 使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌;4. 用吸管吸取使用液,均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器
酿酒酵母培养基的制备实验
试剂、试剂盒 酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材 锥形瓶实验步骤 1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水
马丁氏培养基的制备实验
实验方法原理马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、MgS04·7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成,其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,K2HPO4、MgS04·7H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷、镁离子。
血液琼脂培养基的制备实验
实验方法原理血液培养基是一种含有脱纤维动物血(一般用兔血或羊血)的牛肉膏蛋白胨培养基,因此除培养细菌所需要的各种营养外,还能提供辅酶(如V因子),血红素(X因子)等特殊生长因子。 因此血液培养基常用于培养,分离和保存对营养要求苛刻的某些病原微生物。此外,这种培养基还可用来测定细菌的溶血作用。实验材料
血液琼脂培养基的制备实验
实验方法原理 血液培养基是一种含有脱纤维动物血(一般用兔血或羊血)的牛肉膏蛋白胨培养基,因此除培养细菌所需要的各种营养外,还能提供辅酶(如V因子),血红素(X因子)等特殊生长因子。 因此血液培养基常用于培养,分离和保存对营养要求苛刻的某些病原微生物。此外,这种培养基还可用来测定细菌的溶血作用。实
酿酒酵母培养基的制备实验
YPAD培养基的制备 SC培养基 SC选择培养基混合物的制备 用于检测酵母中β-半乳糖苷酶活性的培养 用于筛选针对URA3表型的培养基
酿酒酵母培养基的制备实验
YPAD培养基的制备 SC培养基 SC选择培养基混合物的制备 用于检测酵母中β-半乳糖苷酶活性的培养 用于筛选针对URA3表型的培养基
常用微生物培养基配方汇总
(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和酵母菌的生长。(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌
培养基的湿热灭菌
灭菌原理培养基在制备后的24h内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸气不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,
培养基的灭菌流程
原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定
谈谈几种微生物检测中常用灭菌和消毒方法
消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用,其实它们的含义是有所不同的。消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法,而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物,使之呈无菌状态。 物理方法 温度: 利用温度进行灭菌、消毒或防腐,是最常用而又方便有效的方法。高温可使
移液器的消毒与灭菌
消毒与灭菌消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。因此,灭菌的处理要求高于消毒:1.化学消毒简单说来,就是用酒精等擦拭移液器外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是可以做到的,否则其外壳材质较差!2.紫外线消毒用紫外线照射移液器的表面,通过
适用于实验的培养基灭菌方法
其实是一个简单的道理,培养基灭菌方法的选择也一样如此。采取的实验方法不同,效果也是不同的,所以我们要根据自身的条件选择*合适的方法。上海劲马技术员针对培养基系列产品整理出了一些方法,那么这些实验室培养基灭菌的方法您会选哪种呢?一、湿热灭菌原理在发酵工业中,对培养基和发酵设备的灭菌,广泛使用湿热灭菌法
常用的微生物培养基及配制方法
1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养) 牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7
关于液体培养基的灭菌处理的介绍
为了避免杂菌污染,获得微生物纯培养物,培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0. IMPa (121℃)维持15 ~ 30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培养基常用0.05MPa (110℃) 灭菌20 ~
酿酒酵母培养基的制备实验——SC选择培养基混合物的制备
试剂、试剂盒硫酸腺嘌呤盐酸精氨酸谷氨酸盐酸组氨酸肌醇异亮氨酸仪器、耗材玻璃珠塑料瓶实验步骤1. 配制下述试剂:2. 将单独不加尿嘧啶、色氨酸、亮氨酸或组氨酸的粉状成分合在一起,装入一个干净的塑料瓶中。3. 加入 3 或 4 个干净的玻璃珠,剧烈震荡以混匀。展开
微生物鉴定之培养基的制备程序
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。 (一)配料 按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。 (二)溶化
培养箱消毒灭菌的方法
HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响,无法去除病毒和一些微小细菌,也有其局限性;相比较而言,高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法,高温消毒又分为两类,一是传统的高温干热消毒,另一种是先进的高温湿热灭菌。
微生物实验市培养基的制备和质量控制要点
微生物实验市培养基的制备和质量控制要点 使用脱水培养基和培养基组分来制备培养基时要准确称量。使用己校正的具有适合的称量范围的天平。使用清洁的容器和工具,防止配方中带入外来物质,改变培养基的zui终组成。科恩电子天平称量也应该记录。 脱水培养基先在水中分散,并完
培养基的制备
目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。 操作步骤 一、培养基的制备原则和要求 培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要
化学消毒灭菌实验
1、来苏:通过损伤细胞膜、灭活酶类、使蛋白质变性等机制发挥杀菌作用。配方为甲酚500g,植物油173g,氢氧化钠27g,加水至1000ml。消毒浓度为2%,用于对地面、器具表面、皮肤等消毒。可有效杀灭细菌繁殖体、真菌、结核杆菌和灭活大部分病毒,但不能杀灭细菌芽孢,对乙肝病毒的灭活效果不肯定。2、新洁
化学消毒灭菌实验
实验步骤1、来苏:通过损伤细胞膜、灭活酶类、使蛋白质变性等机制发挥杀菌作用。配方为甲酚500g,植物油173g,氢氧化钠27g,加水至1000ml。消毒浓度为2%,用于对地面、器具表面、皮肤等消毒。可有效杀灭细菌繁殖体、真菌、结核杆菌和灭活大部分病毒,但不能杀灭细菌芽孢,对乙肝病毒的灭活效果不肯定。
详解实验室培养基的制备
1 玻璃器皿的清洗 1 新购的玻璃器皿 除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1~2%的工业盐酸中数小时,使游离的碱性物质除去,再以流水冲净。对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有盐酸,数分钟后倾去
简介微生物培养基常见的灭菌方法有哪些
(一)化学物质灭菌 原理:药物与微生物细胞中的成分反应,使蛋白质变性酶失活。使用范围:器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌,不能用于培养基灭菌。 常用的灭菌剂:甲醛 37% 戊二醛 2% 高锰酸钾 0.1%-0.25% 苯酚 0.1%-0.15% 漂白粉 5% 过氧乙酸 0.02%
细胞培养常用设备及实验技巧(四)配制与消毒
器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶、青霉素、链霉素、纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤: 一. 水的制备:细胞培养用水**非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 。二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1
常用培养基
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1