简述单克隆抗体技术的基本原理

哺乳类细胞DNA合成可分为两条途径,①从头(de novo)合成途径,利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶,可被氨基蝶呤(A)阻断;②补救(salvag-e)合成途径,在次黄嘌呤磷酸核糖转化酶( HGPRT)存在下利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)。 单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故可在HAT选择培养基中存活和增殖。......阅读全文

单克隆抗体技术的类型小分子抗体简介

  小分子抗体顾名思义是分子量较小的抗体片段,它的抗体分子的抗原结合部位仅仅局限于重链和轻链的可变区。虽然分子很小但它既保持了亲本单抗的亲和力具有亲本单抗一样的特异性。种类主要包括:抗原结合片(Fab)抗体、Fv抗体、单链抗体、单域抗体与最小识别单位。  1.Fab抗体  Fab抗体为仅含Fab分子

关于单克隆抗体技术的重要意义介绍

  单克隆抗体(monoclonal antibody,Mab)技术是20世纪免疫学技术的一项里程碑式突破。该技术将免疫小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合生成杂交瘤细胞,这种杂交瘤细胞核内含有双亲细胞的染色体,继承了亲代细胞的特征。它既具有瘤细胞在体外培养中迅速增殖的能力,又具备免疫脾细胞合成和分

叶绿素测定仪的基本原理简述

  根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。各

简述异淀粉酶的基本原理

  其实早在1940年由酵母抽提物中即发现了异淀粉酶,但对异淀粉酶的酶学特性认识却经历了一段不算太短的时间.\表淀粉酶分类常用名作用的键主要生成物来辑0一淀粉酶1.4葡萄糖动物(睡液.胰脏)期精细曹,霉菌麦芽糖植糟(麦芽)淀粉酶1.4麦芽糖大豆.山芋,鲴膏糖化蘸1.41.6葡萄糖动物.霉曹.细曹.群

简述64排螺旋CT的基本原理

  64排螺旋CT突破传统CT的设计,采用滑环技术,将电源电缆和一些信号线与固定机架内不同金属环相连运动的X射线管和探测器滑动电刷与金属环导联。球管和探测器不受电缆长度限制,沿人体长轴连续匀速旋转,扫描床同步匀速递进(传统CT扫描床在扫描时静止不动),扫描轨迹呈螺旋状前进,可快速、不间断地完成容积扫

简述分子筛层析的基本原理

  凝胶是一种多孔性的不带表面电荷的物质,当带有多种成分的样品溶液在凝胶内运动时,由于它们的分子量不同而表现出速度的快慢,在缓冲液洗脱时,分子量大的物质不能进入凝胶孔内,而在凝胶间几乎是垂直的向下运动,而分子量小的物质则进入凝胶孔内进行“绕道”运行,这样就可以按分子量的大小,先后流出凝胶柱,达到分离

简述紫外检测器的基本原理

  物理上测得物质的透光率,然后取负对数得到吸收度。  大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团,因而有较强的紫外或可见光吸收能力,因此UVD既有较高的灵敏度,也有很广泛的应用范围,是液相色谱中应用最广泛的检测器。  为得到高的灵敏度,常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长,

简述化学镀镍的基本原理

  在催化剂Fe的催化作用下,溶液中的次磷酸根在催化表面催化脱氢,形成活性氢化物,并被氧化成亚磷酸根;活性氢化物与溶液中的镍离子进行还原反应而沉积镍,其本身氧化成氢气。即:  2H2PO2-+2H2O+Ni2+→Ni0+H2↑+4H++2HPO32-。  与此同时,溶液中的部分次磷酸根被氢化物还原成

简述经颅超声多普勒的基本原理

  一、TCD 频谱上可以提供血流参考资料,包括:  血流瞬时速度;  辨别血流方向,一般“+”号表示朝着探头,“-”号表示远离探头;  可以求得动脉射血时间长短,血流速度上升的快慢,以反映动脉壁的情况。  二、主要的检查方法为经颞窗及经枕骨大孔窗测定。检查时必须注意探头放置的位置和超声束投射的方向

简述液态锂电池的基本原理

  目前主流的电池是锂离子电池,也可以叫做液态电池,它的原理很简单,就是通过锂离子在正极和负极之间的电解液中来回移动来实现充放电的过程,但是这些电解液存在固有的缺陷,那就是高温下比较易燃,电池在反复充放电过程中,锂金属可能会在电解液中生成锂枝晶,如果这些锂枝晶疯狂生长,刺破隔膜,就会造成漏液接着引发

简述X射线荧光分析的基本原理

  荧光,顾名思义就是在光的照射下发出的光。X射线荧光就是被分析样品在X射线照射下发出的X射线,它包含了被分析样品化学组成的信息,通过对上述X射线荧光的分析确定被测样品中各组份含量的仪器就是X射线荧光分析仪。  从原子物理学的知识我们知道,对每一种化学元素的原子来说,都有其特定的能级结构,其核外电子

简述心阻抗血流图的基本原理

  心阻抗血流图的基本原理是基于生物体变化时引起电阻抗的变化。胸腔组织是导电体,在其两端安放电极,经过电极联线向胸部输入高频低幅恒量电流,由于心脏收缩与舒张周期性活动。引起胸腔血液流动发生周期性变化,造成胸腔电阻呈周期性改变,用多导生理记录仪描记出来,就是心阻抗血流图或称阻抗血流图(△z)。血液是良

简述离子交换层析的基本原理

  离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有负电荷的称之阳离子交换树脂;而带有正电荷的称之阴离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后

关于单克隆抗体技术的细胞融合的介绍

  首先制备细胞培养基、 氨基喋呤(A)贮存液、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷(HT)贮存液等各种细胞生长所需的营养物质。然后制备髓瘤细胞和脾淋巴细胞,之后进行细胞融合。在细胞融合后选择性培养过程中,由于大量骨髓瘤细胞和脾细胞相继死亡,此时单个或少数分散的杂交瘤细胞多半不易存活,通常必须加入其他活细胞使之繁

基因诊断技术的基本原理

 基因诊断技术的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,

电泳技术的基本原理

生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。如果把生物大分子的胶体溶液放在一个没有干扰的电场中,使

电泳技术的基本原理

生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。如果把生物大分子的胶体溶液放在一个没有干扰的电场中,使

基因捕获技术的基本原理

基因捕获的方法酷似以报告基因为诱饵来捕获基因。其基本过程是将一含报告基因的DNA 载体随机插入基因组,从而产生内源基因失活突变,并通过报告基因的表达激活提示插入突变的存在,及突变内源基因表达特点。通过筛选得到的插入突变的ES 细胞克隆经囊胚注射转化为基因突变动物模型,进而分析表型来研究突变基因功能。

基因捕获技术的基本原理

基因捕获的方法酷似以报告基因为诱饵来捕获基因。其基本过程是将一含报告基因的DNA 载体随机插入基因组,从而产生内源基因失活突变,并通过报告基因的表达激活提示插入突变的存在,及突变内源基因表达特点。通过筛选得到的插入突变的ES 细胞克隆经囊胚注射转化为基因突变动物模型,进而分析表型来研究突变基因功能。

层析技术的基本原理

层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这

多重PCR技术的基本原理

多重PCR基本原理与常规PCR相同,区别是在同一个反应体系中加入一对以上的引物,如果存在与各对引物互补的模板,则它们分别结合在模板相对应的部位,同时在同一反应体系中扩增出一条以上的目的DNA片段。多重PCR反应体系的组成和PCR循环的条件需要经过优化以确保同时扩增几个片段。理论上只要PCR扩增的条件

反渗透技术的基本原理

把相同体积的稀溶液(如淡水)和浓液(如海水或盐水)分别置于一容器的两侧,中间用半透膜阻隔,稀溶液中的溶剂将自然的穿过半透膜,向浓溶液侧流动,浓溶液侧的液面会比稀溶液的液面高出一定高度,形成一个压力差,达到渗透平衡状态,此种压力差即为渗透压,渗透压的大小决定于浓液的种类,浓度和温度,与半透膜的性质无关

简述单克隆抗体在蛋白质提纯方面应用

  单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质(如Speharose 2B、4B、6B等)上,并制备成层析柱。当样品流经层析柱时,待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合,其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后,改变洗脱液的离子强度或pH,欲分离的抗原与抗体解离,

单克隆抗体技术人源性抗体简介

  从最初的鼠源单抗技术到人源化技术,单克隆抗体在几十年的岁月中取得了突飞猛进的发展。人源化的问世使单克隆抗体基本解决了人抗鼠源性问题。但有用人源化的抗体基因均来自杂交瘤细胞。杂交瘤的这个操作过程很复杂且耗时加之利用杂交瘤技术难以制备自身抗原抗体和全人源抗体,这两大缺点成为基因工程抗体应用的绊脚石。

超声波清洗基本原理简述

  超声波换能器根据槽壁向盛在槽中的清洁液辐射源声波频率,因为超声波空蚀的结构力学效用使浸在液體中的零配件的表层的油渍快速脱离被去除。超音波清洗的特性是更快、品质高,便于保持自动化技术,非常融入于表层样子繁杂的细腻清理。在一些状况下,能够 自来水替代油或有机化学水溶液开展清理。针对必须用酸或碱开展清

单克隆抗体技术对肿瘤的诊断有何意义

1、肿瘤的病例诊断和鉴别诊断:如进行性坏疽性逼尿肌和致死性中线肉芽肿患者,组织病理学和超微结构特征与T细胞淋巴瘤有些相似,随后用单克隆抗体进行免疫组化研究,发现后者的DNA合成显着受到抑制,因此被诊断为来自免疫调节诱导T细胞的T细胞淋巴瘤。据报道,一名淋巴母细胞淋巴瘤患者后来发展成髓母细胞瘤白血病。

单克隆抗体技术动物免疫的操作过程

  (1) 抗原制备。制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应 根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说,抗原的来源有限,或性质不稳定,提纯时易变性,或其免疫原性很强,或所需单抗是用于抗原不

详述单克隆抗体技术的类型人源化抗体

  1.改形抗体  1986年,Jones等人成功构建了第一个改形抗体,又称CDR移植抗体和人源化抗体,指将鼠单抗可变区中互补决定区(CDR)序列取代人源抗体相应CDR序列,重组构成既具有鼠源性单抗特异性,又保持人抗体亲和力的CDR移植抗体。迄今为止,已有100多种鼠单抗通过CDR移植得到了人源化。

关于单克隆抗体技术的类型人鼠嵌合抗体

  为了克服鼠源性单克隆抗体存在的问题,科学家利用基因工程方法使小鼠的抗体人源化。通过构建人一鼠嵌合抗体,在一定程度上减弱了人抗鼠抗体。1984年Morrison等人成功地构建了第一个人鼠单克隆抗体即嵌合抗体。嵌合抗体指的是鼠单克隆抗体的恒定区基因被人抗体的恒定区基因通过基因重组技术所替换而编码并在

单克隆抗体技术的方法如何鉴定单抗特性?

鉴定单抗特性⑴ 单克隆性的确定 包括杂交瘤细胞的染色体分析、单抗免疫球蛋白重链和轻链类型的鉴定和单抗纯度鉴定等。⑵ 单抗理化特性的鉴定。从实用意义上说,单抗对温度和PH变化的敏感性以及单抗的亲合力都是理化特性鉴定的主要项目,它们可为单抗的使用和保存提供重要依据。⑶ 单抗与相应抗原的反应性测定。单抗与