关于免疫荧光技术的基本内容
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。 免疫荧光(immunofluorescence technic) Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯......阅读全文
免疫荧光技术的合适荧光素的选择
1)具有与蛋白质形成共价键的化学基团。荧光素-N=C +NH-蛋白质 荧光素-N-C-N-蛋白质‖ ︱ ︱‖ ︱S H H SH2)荧光效率高,标记后下降不明显。3)荧光色泽与背景色泽对比鲜明。4)标记后能保持生物学活性和免疫活性5)标记方法简单、快速。6)安全无毒
免疫荧光技术的标本的制作过程
免疫荧光技术在实际应用上主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。免疫荧光直接法可清楚地观察抗原并用于定位标记观察。间接法是在检测样品上滴加已知的细菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的第二抗体。如研制成的抗沙门氏菌荧光抗体
免疫荧光技术基本原理
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法将标记的特异性
什么时候使用免疫荧光技术
检测水平不一样 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。免疫电镜的应用,使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的
什么是时间分辨免疫荧光技术
什么是时间分辨免时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。疫荧光技术
免疫荧光技术应用食品检测的原理
将抗体球蛋白稀释成2mg/mL,和2%绵羊红细胞1∶1混合(混合后血球成1%),再加依文斯兰2滴(0.1%)。这样的悬液里和血球表面带有沙门氏菌的抗体,加上增菌液,在湿的环境下使抗原和抗体结合,其余的杂质和非特异的物质不与抗体结合,不易固定在玻片上,易被水冲击。因此,有特异性的抗原就能滞留在玻璃片上
免疫荧光技术的实验方法及其分类
一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好,线性范围宽,具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例,首先将特异性抗
免疫荧光技术的实验方法及其分类
一、免疫标记法及其分类1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮,检测产物发出的荧光,荧光强度与Mb浓度呈正比,可在8min内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好,线性范围宽,具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例,首先将特异性抗
免疫荧光技术的常见荧光剂有哪些?
1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它
细胞融合技术的基本内容介绍
有性繁殖时发生的精卵结合是正常的细胞融合,即由两个配子融合形成一个新的二倍体。而细胞融合为在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。其中人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也能产生种间细胞的
关于真核细胞的基本内容介绍
真核细胞 eukaryotic cell 指含有真核(被核膜包围的核)的细胞。其染色体数在一个以上,能进行有丝分裂。还能进行原生质流动和变形运动。而光合作用和氧化磷酸化作用则分别由叶绿体和线粒体进行。除细菌和蓝藻的细胞以外,所有的动物细胞以及植物细胞都属于真核细胞。由真核细胞构成的生物称为真核生
关于糖耐量实验的基本内容介绍
临床上常用糖耐量试验来诊断病人有无糖代谢异常,常用口服的糖耐量试验,被试者清晨空腹静脉采血测定血糖浓度,然后一次服用75克无水葡萄糖,服糖后的1/2、1、2小时(必要时可在3小时)各测血糖一次,以测定血糖的时间为横坐标(空腹时为0时),血糖浓度为纵坐标,绘制糖耐量曲线,正常人服糖后1/2-1小时
关于体液免疫的基本内容介绍
1.参与的细胞:吞噬细胞、T细胞、B细胞、记忆细胞、浆细胞 2.免疫过程(如图《体液免疫的过程》所示) 感应阶段:抗原进入机体后,除少数可以直接作用于B细胞外,大多数抗原都要经过吞噬细胞的摄取和处理将其内部隐藏的抗原决定簇暴露出来。然后,吞噬细胞将抗原呈递给T细胞,刺激T细胞产生淋巴因子。这
关于衣原体的基本内容介绍
衣原体是介于细菌和病毒之间的微生物。它寄生于人体细胞内,含脱氧核糖核酸和核糖核酸。在其生活周期中,有原体和始体两种形态。原体体积较小(直径为200 ~ 300nm),细胞质致密,具有高度传染性。它进入敏感细胞后,体积变大(直径可达800^1 200nm),成为始体,细胞浆变得疏松或呈网状,因而始
关于农杆菌的基本内容介绍
农杆菌是指生活在植物根表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。农杆菌主要有两种:根癌农杆菌和发根农杆菌。根癌农杆菌能在自然条件下趋化性地感染140多种双子叶植物或裸子植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤。引发冠瘿瘤的原因是,Ti质粒上的T-DNA上有8个左右的基
关于抗体的基本内容简介
抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特
关于DNA探针的基本内容介绍
DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以
关于糖脂相连的基本内容介绍
糖基酰基甘油的分子中,糖基和甘油的一个羟基以糖苷键相连,甘油的其他两个羟基各与一个脂肪酸相连;这类糖脂在动植物组织中均有发现。植物中还曾发现极少量的固醇糖苷。细菌中,除大分子脂多糖外,常产生各种结构的糖脂。包括:糖基甘油──糖和脂肪酸形成的脂类,其糖基部分多为D-甘露糖和D-葡萄糖;含糖磷脂──
关于ATP酶的基本内容介绍
ATP酶又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。 ATP是三磷酸腺苷的英文缩写符号,它是各种活细胞内普遍
关于空气检测的基本内容介绍
广义的空气检测是指对空气的组成成分的检测。狭义的空气检测,主要是从应用的角度,重点研究的是室内空气检测。它是指室内指装饰材料、家具等含有的对人体有害的物质,释放到家居、办公环境中造成的装修污染,来检测空气质量。国家2006年颁布实施的《民用建筑工程室内环境污染控制规范》列出五种主要污染物:甲醛、
关于癌基因的基本内容介绍
基因是指携带有遗传信息的DNA序列,是控制性状的基本遗传单位。癌基因是基因的一类,指人类或其他动物细胞(以及致癌病毒)固有的基因,又称转化基因,激活后可促使正常细胞癌变、侵袭及转移。癌基因激活的方式包括点突变、基因扩增、染色体重排、病毒感染等。癌基因激活的结果是其数目增多或功能增强,使细胞过度增
关于酶蛋白的基本内容介绍
酶蛋白是指酶的纯蛋白部分,是相对于辅酶因子而言,又称为脱辅基酶蛋白,其单独存在时不具有催化活性,与辅酶因子结合形成全酶后才显示催化活性。酶蛋白主要的用与饲养业。酶蛋白以植物蛋白为原料,酵母菌为主菌,辅以产酶、产维生素的7种菌进行复合发酵,改善植物蛋白结构,富含消化酶系、菌体蛋白、维生素制作的饲料
关于显性标记的基本内容介绍
分子标记中,显性和共显性,对等位基因而言,即指所扩增的PCR产物(DNA片段)。像RAPD、ISSR等显性标记,PCR产物无法确切确定,因而无法区分杂合体(heterozygosity),只能按有带无带进行分析,记录为0/1;而SSR等共显性标记,则能区分杂合体,即二倍体及多倍体染色体DNA上的
关于体液免疫应答的基本内容
机体的特异性体液免疫应答主要由B细胞介导。B细胞应答的第一步是BCR对抗原的特异识别及两者的结合,启动B细胞激活信号。此信号被传导入胞内,在协同刺激分子产生的第二信号的作用下诱导细胞激活、增殖、并分化成浆细胞或记忆细胞。 免疫应答是机体对抗原性异物所发生的一系列生理反应, 包括抗原呈递细胞对抗
关于生态监测的基本内容介绍
生态监测是指利用物理、化学、生化、生态学等技术手段,对生态环境中的各个要素、生物与环境之间的相互关系、生态系统结构和功能进行监控和测试。对人类活动影响下自然环境变化的监测.通过不断监视自然和人工生态系统及生物圈其他组成部分(外部大气圈、地下水等)的状况.确定改变的方向和速度,并查明多种形式的人类
关于原核生物的基本内容
细菌和古细菌通常具有单个环状染色体,但染色体大小存在显著变异。大多数细菌染色体的大小从13万个碱基对到 1400 万个碱基对不等 。疏螺旋体属的螺旋体是个例外,仅含有单一线性染色体。 序列结构 与真核生物相比,原核染色体含有更少的基于序列的结构。细菌通常具有一个复制起点,而一些古菌含有多个复
关于结构域的基本内容
结构域(domain)是位于超二级结构和三级结构间的一个层次。结构域是在蛋白质的三级结构内的独立折叠单元,通常都是几个超二级结构单元的组合。在较大的蛋白质分子中,由于多肽链上相邻的超二级结构紧密联系,进一步折叠形成一个或多个相对独立的致密三维实体,即结构域。结构域与分子整体以共价键相连,一般难以
关于宫颈活检的基本内容介绍
宫颈活检就是子宫颈的活体组织检查,亦即从宫颈上取一小块或几块组织作病理检查,以确定诊断。多用于宫颈可疑癌变或是宫颈刮片有可疑的细胞等。宫颈活检可以明确诊断,确定治疗方法。宫颈活检是确诊宫颈癌最可靠的依据。无论是早期或晚期宫颈癌,都必须通过本项检查以确定癌肿的病理类型和细胞分化程度。 方法:宫颈
关于红细胞的更新基本内容
红细胞不断进行新生和破坏,根据同位素的实验证明其寿命为100—120天,比要白血球长。所以红十字会都会建议成年男子每隔三个月献血一次,女子每隔四个月献血一次。 由于红细胞没有细胞核以及细胞器,无法自行制造自己的结构,也无法使自己的结构维持长久。身体内每天红细胞破坏量约1%,需加以补充。照这样计
关于肾脏切片的基本内容介绍
肾脏切片是现代肾脏医学最重要的领域之一,它对於诊断肾脏疾病,预测疾病病程,以及选择适当的治疗有相当的重要性。 正常值:切片后没有出现莫名头晕、腰痛及出现血尿、盗汗、腹痛、腰痛、心悸的情况。 相关症状:弯腰时腰痛,肾源性水肿,高血压,血尿。