免疫酶技术介绍

免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。标记酶有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶等,它们与抗原或抗体结合后活性不受影响。底物一般是邻苯二胺和对硝基苯磷酸酯。它具有敏感性高、特异性强,既可定性又可定量的特点。......阅读全文

免疫电镜相关技术实验——酶标记免疫电镜技术

实验方法原理该技术是以酶为抗原—抗体反应的标记物,在不改变抗原抗体的免疫反应特异性,亦不降低酶活性条件下,与相应底物作用后形成不溶性的反应物。在电镜下形成为电子散射力强的终末产物。用于免疫电镜标记的酶有辣根过氧化物酶 (HRP)碱性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的

免疫酶标技术的技术特点

中文名称免疫酶标技术英文名称immunoenzymatic technique定  义以酶标记抗体(或抗原),通过相应底物被酶解后的显色反应,对细胞和组织标本中的抗原-抗体复合体进行定位、定性分析和鉴定的方法。也可根据酶催化底物显色的深浅程度,定量测定体液标本中待测抗原或抗体的含量。应用学科细胞生物

免疫酶技术的技术原理简介

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),

细胞免疫化学:免疫酶标技术

1) 直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色

酶免疫技术抗体的酶标记方法

用于酶免疫技术的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。目前酶免疫技术检测中常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。由于辣根过氧化

酶免疫技术使用的方法

  ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。  其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对

关于酶免疫技术的简介

  酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法,是标记免疫技术的一种。近年来标记免疫技术飞速发展,应用不同标记物,根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷,而方法的创建者往往给同类的方法以不同的名称。因此确知某一方法属于哪一类型,对该方法的正确理解有着重要意义。本节先叙述各种标记免疫技

酶免疫电泳技术

一,酶免疫电泳技术的原理抗原与抗体在琼脂糖凝胶中电泳时,在碱性缓冲液的条件下,抗原带负电,向正极移动。不同分子量或还不同电荷的抗原,在相同条件下,移动距离不等。这些在不同部位的抗原,再与相关抗体经扩散形成免疫沉淀线。酶免疫电泳技术中的抗原与抗体就是酶和它的相应抗体球蛋白。酶抗原与酶抗体形成的免疫复合

免疫酶技术的操作步骤

(1) 用微量移液器分别加待检血清、阳性对照、阴性对照各100μl于1、2、3孔中,370C水浴箱温育30min。(2) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干。(3) 每孔加入酶结合物2滴,370C水浴箱温育30min。(4) 用PBS液洗板3次,每次3min,甩干(5) 每孔分别加入显色A液、B

酶免疫电泳技术

实验方法原理抗原与抗体在琼脂糖凝胶中电泳时,在碱性缓冲液的条件下,抗原带负电,向正极移动。不同分子量或还不同电荷的抗原,在相同条件下,移动距离不等。这些在不同部位的抗原,再与相关抗体经扩散形成免疫沉淀线。酶免疫电泳技术中的抗原与抗体就是酶和它的相应抗体球蛋白。酶抗原与酶抗体形成的免疫复合物是用底物显

免疫酶细胞化学实验技术

免疫酶细胞化学免疫酶细胞化学是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下,借助于酶细胞化学的手段,检测某种物质(抗原/抗体)在组织细胞内存在部位的一门新技术:即预先将抗体与酶连结,再使其与组织内特异抗原反应,经细胞化学染色

关于免疫酶技术的简介

  免疫酶技术(immunoenzymatic technique) 最早应用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色,即用标记的抗体与标本中的抗原发生特异性结合,当加入酶的底物时,在酶的作用下经一系列生化反应产生有色物质,借助光镜作出定位判断。目前,应用最广泛的是酶联免疫吸附试验(enzyme linke

概述免疫酶技术的原理

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),

免疫酶标技术——直接法

实验方法原理先将酶与抗体结合形成酶标抗体,然后和相应的抗原反应,使抗原抗体复合物上带有酶分子,再与酶的底物H2O2—DAB(3’3—二胺荃联苯胺)发生显色反应,在显微镜下观察,根据颜色产物检测相应抗原。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1.  标本固定;2.  PBS

关于免疫酶技术的简介

  免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。标记酶有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱

免疫酶标技术——间接法

实验方法原理将酶标记在第二抗体上,再与已形成的抗原抗体复合物中的第一抗体反应。目前广泛应用的PAP法、ABC法是在间接法的原理和技术的基础上发展起来的。实验材料抗体试剂、试剂盒PBSH2O2血清仪器、耗材显微镜实验步骤1.  标本固定;2.  PBS洗涤2×3 分钟;3.  1 %H2O2(或1 %

酶免疫电泳技术

一,酶免疫电泳技术的原理抗原与抗体在琼脂糖凝胶中电泳时,在碱性缓冲液的条件下,抗原带负电,向正极移动。不同分子量或还不同电荷的抗原,在相同条件下,移动距离不等。这些在不同部位的抗原,再与相关抗体经扩散形成免疫沉淀线。酶免疫电泳技术中的抗原与抗体就是酶和它的相应抗体球蛋白。酶抗原与酶抗体形成的免疫复合

酶免疫技术的技术原理是什么?

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  为了检测抗原可用夹心法。将特异性抗体吸附在固相载体(聚苯乙

酶免疫技术的技术原理是什么?

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  为了检测抗原可用夹心法。将特异性抗体吸附在固相载体(聚苯乙

免疫学检验中的酶免疫技术

 目前,免疫学检验中的标记技术主要包括酶免疫技术、荧光免疫技术、放射免疫技术、金免疫技术、化学发光免疫技术等。其中酶免疫技术是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一,酶免疫技术在检验医学中得到广

免疫学检验中的酶免疫技术

  20世纪中期,以放射免疫技术为代表的标记免疫技术相继问世,它将某种可微量或超微量测定的物质(如放射性核素、荧光素、酶、化学发光剂等)标记于抗原(抗体)上制成标记物,加入到抗原抗体的反应体系中与相应的抗体(抗原)反应,以检测标记物的有无及含量间接反映被测物的存在与多少。这些将标记技术与抗原抗体反应

免疫酶技术中常用的酶底物系统

各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性

临床化学检查方法介绍固相酶免疫测定技术介绍

固相酶免疫测定技术介绍:  固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应;用

免疫酶技术的技术特点和应用范围

免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。标记酶有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷

免疫酶技术的具体步骤

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加

免疫酶组织化学技术

免疫酶组织化学技术 1.酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上,创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2.PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上,建立了非标记抗体法,先将HRP免

酶免疫技术的分类有几种?

  酶免疫组织化学技术:用于组织切片或其他标本中抗原的定位。  酶免疫测定技术(EIA):用于液体标本中抗原或抗体的定性和定量。根据抗原抗体反应后是否需将结合和游离的酶标志物分离,EIA一般可分为均相和异相两种类型。

免疫酶细胞化学实验技术4

三、ICC在细胞功能研究中的应用  形态学研究目的之一是揭示组织细胞结构特征及其功能意义。利用ICC显示给与细胞增殖标记物,是组织细胞学研究中形态和功能相结合的重要手段之一。目前常用的细胞增殖标记物有4种,Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase

酶免疫测定的技术原理

免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗

免疫酶技术的具体步骤

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加