基因测定的方法同线法
同线法如果一个细胞得到或丢失一条染色体则将同时得到或失去这条染色体上的全部基因。如果其中某些基因是已知的，而另一连锁关系未知的基因恰恰和上述基因同时得到或失去，便可以判定后一基因和前一基因属于同一连锁群（表2)。这一原理曾广泛应用于人的基因定位。仙台病毒或聚乙二醇能促使人的体细胞和啮齿类动物的体细胞相融合（见体细胞遗传学），融合细胞在有丝分裂过程中随机地丢失人的染色体。通过细胞学观察，特别是应用显带染色（见核型）方法，可以选出具有某个或某几个人染色体的融合细胞株，再经组织培养并测定其中是否出现待测基因的表型就可以判断待测基因所属的染色体。假定有五个人－鼠融合细胞株 A、B、C、D、E，它们分别保留有人染色体1、2、3中的这一个或那一个，例如细胞株A保留染色体2，细胞株D保留1、2、3这三个染色体等。分别测定甲、乙、丙、丁四种表型，如某种酶的活性或某种抗原的存在与否等。已经知道这些特性都是小鼠细胞所没有的，从表2的结果可以看到任何......阅读全文
华法林钠的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液对照品溶液取华法林钠对照品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,
PH值的测定方法介绍电极法
空气中CO2溶解于降水和从降水中逸出达到动态平衡时的pH约有5.60,因此通常称pH
吸光光度法的测定方法
1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c（S）、被测试液c（X），在相同条件下显色、定容后，测其相应的吸光度为A和A（X），根据朗伯一比耳定律：A（S）=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质，用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)
还原糖的测定方法——高锰酸钾法
1．原理，还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜，在酸性条件下，氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁，再用KMNO4溶液滴定硫酸亚铁，即可标出还原糖的量。 2. 操作方法 （1）样品处理 a. 乳糖：包括乳制品以及含蛋白质的冷食类 称样2-5g（液体样25~50ml）→于250ml容量瓶→
HLA基因分型方法：RFLP法
RFLP法1）常规制备DNA盐析法1．用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2．每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次，再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3．加50μl 10％ SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质，37℃过夜或55℃ 3h。4．加0.25体积饱和醋酸钠溶液，剧烈摇动1
基因定位方法介绍连锁群法
利用近着丝粒距离基因的定位法 如果某一染色体上有一个离着丝粒距离较近的已知基因，另外有一个基因同样离着丝粒很近，可是不知道它是否属于同一染色体。把这样两个突变型品系进行杂交，如果这两个基因属于同一染色体，它们之间的重组频率不应超过两者的着丝粒距离之和；如果它们不属于同一染色体，那么它们的重组频率应
基因定位方法介绍假连锁法
相互易位杂合体只有在减数分裂过程中通过交互离开所形成的平衡配子才能够存活，并使非同源染色体上的基因显示假连锁现象（见染色体畸变)。所以把带有属于已知染色体的标记基因的相互易位品系作为测交品系和一个突变型品系杂交，如果发现这一突变基因经常和标记基因的野生型等位基因相连锁，就可以判定突变基因一定在相互易
蛋白测定方法之Folin—酚试剂法（Lowry法）
（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产
蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法（Lowry法）
（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产
蛋白的生物活性测定方法（结晶紫法和MTT法）
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞，用0.25%胰酶（以无钙镁离子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培养基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素，pH7.2）吹打细胞，使形成细胞悬液。进行细胞计数，使细胞数为2~2.5×105个
色谱法外标法进行含量测定的方法介绍
外标法是《中国药典》(2010版)采用色谱法进行含量测定时最常用的方法。按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:【例1】HPLC外标法测定阿司匹林泡腾片含量。色谱条件与系统适用
蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法（Lowry法）操作方法
1.标准曲线的测定：取16支大试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分成两组，分别加入0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升标准蛋白质溶液（浓度为250mg/ml）。用水补足到1.0毫升，然后每支试管加入5毫升试剂甲，在旋涡混合器上迅速混合，于室温（20～25℃）放置10分钟。
叶片水势测定方法小叶流法
Ⅰ、小液流法一、目的通过实验，掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。二、原理水势代表水的能量水平，水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定，水势越高，植物组织的吸水能力越差，而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后，如果植物组织水势
氯气测定方法介绍碘量法
一、原理氯被氢氧化钠溶液吸收,生成次氯酸钠,用盐酸酸化,释放出游离氯。反应式如下: 游离氯再氧化碘化钾生成碘,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算出氯的量。测定范围:35mg/m3以上。二、仪器①多孔玻板吸收瓶:125ml。②碘量瓶:250ml。③棕色酸式滴定管:10或25ml。④烟气采样器。三、试剂①吸
缺失定位法进行基因定位的方法介绍
一个细胞中的两个同源染色体中的一个上有一个突变基因，另一染色体上有一小段已知范围的缺失，如果这一突变基因的位置在缺失范围内，便不可能通过重组而得到野生型重组体；如果突变基因不在缺失范围内，那么就可以得到野生型重组体。利用一系列已知缺失位置和范围的缺失突变型，便能测定突变型基因的位置。
分子杂交法进行基因定位的方法介绍
分子杂交和体细胞遗传学相结合的方法也可以用来测定人的基因的绝对位置。用体细胞遗传学方法，可以得到只含有某一条人类染色体的人－仓鼠杂种细胞的克隆。然后可以进一步取得这一人类染色体发生各种缺失的克隆。把从这一系列缺失克隆中提取出来的 DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上。再把人的基因文库中的各个基因的 DNA片
转录定位法进行基因定位的方法介绍
许多 RNA病毒的整个基因组往往作为一个单位转录。随着转录的进行，由基因组上各个基因所编码的蛋白质也依序在寄主细胞中出现。当寄主细胞被紫外线照射使本身的蛋白质合成受到抑制时，病毒蛋白的出现更为明显。紫外线照射也起着抑制病毒基因组的转录的作用。紫外线在 RNA分子的某一部位造成损伤后，损伤的部位和它后
石油产品残炭测定仪测定方法微量法
石油产品残炭测定仪测定方法微量法 石油产品的残炭值是指将油品放入残炭测定仪中，在不通入空气的条件下，加热至特定温度条件下，使其蒸发及热解后，排出燃烧的气体，所剩余的焦黑色残余物占油品的质量百分数。 残炭值可以间接表明基础油的精制程度。深度精制的基础油，重芳香烃和胶质的含量较低，残炭值也低。人
华法林钠片的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于华法林钠5mg),置100ml量瓶中,加流动相适量,振摇使华法林钠溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液。对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见华法林钠含量测定项下。
盐酸法舒地尔的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约15mg,精密称定,置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液取盐酸法舒地尔对照品约15mg,精密称定,置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5ml,置50m
氯法齐明软胶囊的含量测定方法
含量测定取本品20粒的内容物与洗涤胶囊壳的三氯甲烷液,置100ml量瓶中,加三氯甲烷稀释至刻度,摇匀,精密量取25ml,照电位滴定法(通则0701),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1mh高氯酸滴定液(0.1mo/L)相当于47.34mg的C2H2Cl2N4a
盐酸文拉法辛的含量测定方法
取本品约0.2g,精密称定,加冰醋酸10ml与醋酐30ml溶解后,照电位滴定法(通则0701),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mo/L)相当于31.39mg的C17H27NO2·HCl。
阿法骨化醇片的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品20片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于阿法骨化醇1g),置具塞离心管中,精密加流动相-二氯甲烷(1:1)2ml,旋涡振荡和超声处理交叉进行4分钟,使阿法骨化醇溶解,高速离心,取上清液对照品溶液取阿法骨化醇对照品适量,精密称定,加流动相溶解
吸光光度法的测定方法介绍
1、单一组分的测定 ①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c（S）、被测试液c（X），在相同条件下显色、定容后，测其相应的吸光度为A和A（X），根据朗伯一比耳定律： A（S）=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X) 由于同一物质，用同一波长及相同厚度的吸
糖的测定方法——－铁氰化钾法
对于糖的测定方法有很多，大致可分为三类 1.物理法，（1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,） 2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法, 3.光度法, 4.色谱法) 3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法. 4.铁氰化钾法. 5.蒽铜比色法. 6.咔唑比色法)
土壤全氮的测定方法－（开氏法－）
土壤是作物氮素营养的主要来源，土壤中的氮素包括无机态氮和有机态氮两大类， 其中95%以上为有机态氮，主要包括腐殖质、蛋白质、氨基酸等。小分子的氨基酸可直接被植物吸收，有机态氮必须经过矿化作用转化为铵，才能被作物吸收，属于缓效氮。开氏法 近百年来，许多科学工作者对全氮的测定方法不断改进，提出了许多新方
溶出度测定法第三法（小杯法）测定方法
测定方法:测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部(15±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过1%(当品种项下规定需要使用沉降装置时,可将片剂或胶囊剂先装入规定的沉降装置内)。以下操作同第二法。取样位置应在桨叶顶端至液面的
基因定位方法介绍单元化定位法
在构窠曲霉这一类真菌的准性生殖过程中，杂合二倍体细胞在有丝分裂时常随机地丢失它的染色体。染色体在多次有丝分裂过程中逐条丢失而使二倍体细胞终于转变为单倍体细胞的过程称为单元化。如果一对染色体中带有显性的野生型基因的染色体丢失了，那么同源染色体上隐性基因的性状便得以表现。此外，通过体细胞交换也可以从杂合
寻找差异表达基因方法——简化SSH法
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官，或者是从正常的组织突变为肿瘤组织，都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因，因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法，抑制消减杂交（SSH）是比较有效的一种方法
基因定位方法介绍直接观察法
易位（见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系，所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的，那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变，同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位，那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的对应关系。