基因测定的方法假连锁法

假连锁法相互易位杂合体只有在减数分裂过程中通过交互离开所形成的平衡配子才能够存活,并使非同源染色体上的基因显示假连锁现象(见染色体畸变)。所以把带有属于已知染色体的标记基因的相互易位品系作为测交品系和一个突变型品系杂交,如果发现这一突变基因经常和标记基因的野生型等位基因相连锁,就可以判定突变基因一定在相互易位的两个染色体中的一个上面。例如在粗糙脉孢菌中有一个品系(图1),它的第 Ⅰ染色体上带有白色分生孢子基因(albino,al),第Ⅳ 染色体上带有温度敏感的蔓延菌落基因(colonial temperature sensitive,cot),第Ⅵ染色体上带有黄色分生孢子基因(yellow conidia,ylo),同时它还是染色体Ⅰ-Ⅱ、Ⅳ-Ⅴ和Ⅲ-Ⅵ相互易位品系。用它作为测试菌株和任何一个突变型菌株进行杂交,就可以通过一次杂交大致上测得这一突变型所属的染色体。例如具有这一突变性状的杂交子代菌株总是菌丝蔓延的,就知道它的突变基......阅读全文

基因测定方法四分体分析法

由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里,所以判断两个基因是否连锁,只需计算出各种类型的四分体数(即子囊数)。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道,便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。表一四分体有三种,即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁的,即P

什么是基因连锁不平衡?

连锁不平衡 (linkage disequilibrium)是指分属两个或两个以上基因座位的等位基因同时出现在一条染色体上的几率,高于随机出现的频率。HLA 不同基因座位的各等位基因在人群中以一定的频率出现。简单地说,只要两个基因不是完全独立地遗传,就会表现出某种程度的连锁。这种情况就叫连锁不平衡。

脂肪的测定方法罗兹法

1、原理:(1)在牛奶中加入氨水(浓氨水)破坏牛奶中蛋白质的胶体性质,使乳中酪蛋白钙盐生成可溶性的氨盐。(2)加入95%乙醇使乳中脂类与非脂类分离。(3)加入乙醚抽取脂类。(4)加入石油醚除去乙醚中包容的水分。(5)到出醚层,挥发除去乙醚、石油醚;剩下的脂肪即为牛奶中的脂肪。2、检测步骤:(1)用电

花叶假连翘的繁殖方法

  花叶假连翘主要采取扦插繁殖和嫁接繁殖,前者用一二年生枝条扦插效果好,热带地区全年都可扦插,枝条插后约20天即可生根,生根率高。嫁接以假连翘为砧木,以枝接为主。嫁接后可用塑料袋套上,避免日晒雨淋以增加成活率。

氯法齐明的含量测定方法

含量测定取本品约0.3g,精密称定,加冰醋酸25ml溶解后,照电位滴定法(通则0701),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mo/L)相当于47.34mg的C2rH2Cl2N4。

酸值的测定方法介绍试纸法

该法的原理是利用食用油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸上的药剂发生显色反应,然后根据试纸的颜色变化情况与标准的比色块比较,从而确定食用油样品酸败的程度 。杨漓等开发了一种试纸比色快速法测定食用油酸价,该法利用食用油脂酸败所产生的游离脂肪酸与试纸中的pH试剂发生显色反应,试纸的颜色变化反映了食用油的酸价变

脂肪的测定方法盖勃法

吸收10ml硫酸(90%),注入盖勃氏乳脂汁内,用1lml的特别牛乳吸管吸取牛乳样品至刻度并注入乳脂汁内,再加入1ml异戊醇,塞紧橡皮塞,充分摇动,使牛乳凝块溶解。将乳脂计放入65~70℃的水浴锅中5min,再以1000r/min旋转5min后,放置65~70℃水浴锅中;5min后取出擦干,按脂肪柱

基因定位方法介绍同线法

如果一个细胞得到或丢失一条染色体则将同时得到或失去这条染色体上的全部基因。如果其中某些基因是已知的,而另一连锁关系未知的基因恰恰和上述基因同时得到或失去,便可以判定后一基因和前一基因属于同一连锁群(表2)。这一原理曾广泛应用于人的基因定位。仙台病毒或聚乙二醇能促使人的体细胞和啮齿类动物的体细胞相融合

基因转移的物理方法转移法介绍

  包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。

连锁图谱的定义

又称连锁图谱(linkage map),它是以具有遗传多态性(在一个遗传位点上具有一个以上的等位基因,在群体中的出现频率皆高于1%)的遗传标记为“路标”,以遗传学距离(在减数分裂事件中两个位点之间进行交换、重组的百分率,1%的重组率称为1cM)为图距的基因组图。遗传图谱的建立为基因识别和完成基因定位

溶出度测定法第一法(篮法)测定方法

测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使转篮底部距溶出杯的内底部(25±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过±1%,待溶出介质温度恒定在(37±0.5)℃后,取供试品6片(粒、袋),分别投入6个干燥的转篮内,将转篮降入溶出杯中,注意供试品表面上不

溶出度测定法第二法(浆法)测定方法

测定方法:测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部(25±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过±1%。待溶出介质温度恒定在(37±0.5)℃,取供试品6片(袋、粒),分别投入6个溶出杯内。当品种项下规定需要使用沉降篮或其他

酸值的测定方法介绍色谱法

该法首先利用乙醇等溶剂分析油脂中的游离脂肪酸,由于脂肪酸一般极性较强,挥发性低,热稳定性差,所以一般先用KOH/甲醇将其转化成相应的衍生物脂肪酸甲酯,从而降低其极性,增加其热稳定性,然后用Agilent 4890D气相色谱仪进行分析,使用FID检测器,其回收率在89%一109%。该法试剂用量少,适合

吸光光度法的测定方法

1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)

吸光光度法的测定方法

1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)

阿法骨化醇的含量测定方法

照髙效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1g的溶液对照品溶液取阿法骨化醇对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1pg的溶液。系统适用性溶液(1)、系统适用性溶液(2)、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下

吸光光度法的测定方法

1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)

PH值的测定方法介绍电极法

空气中CO2溶解于降水和从降水中逸出达到动态平衡时的pH约有5.60,因此通常称pH

华法林钠的含量测定方法

照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液对照品溶液取华法林钠对照品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,

还原糖的测定方法——高锰酸钾法

  1.原理,还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜,在酸性条件下,氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁,再用KMNO4溶液滴定硫酸亚铁,即可标出还原糖的量。  2. 操作方法  (1)样品处理  a. 乳糖:包括乳制品以及含蛋白质的冷食类   称样2-5g(液体样25~50ml)→于250ml容量瓶→

基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因

出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个

HLA基因分型方法:RFLP法

RFLP法1)常规制备DNA盐析法1.用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2.每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次,再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3.加50μl 10% SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质,37℃过夜或55℃ 3h。4.加0.25体积饱和醋酸钠溶液,剧烈摇动1

酶免法检测HBeAg假阳性原因分析

我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时,发现有时会出现单项HBeAg(+)或HBeAg(+)、抗-HBs(+)等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检 HBeAg, 结果为阴性。为此我们特做如下实验。取10份 HBeAg 阴性的献血员的不抗凝血液,每份分两管,一管静置0.5h、1h、2h;另

蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法(Lowry法)

(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产

蛋白测定方法之Folin—酚试剂法(Lowry法)

(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产

色谱法外标法进行含量测定的方法介绍

外标法是《中国药典》(2010版)采用色谱法进行含量测定时最常用的方法。按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:【例1】HPLC外标法测定阿司匹林泡腾片含量。色谱条件与系统适用

蛋白的生物活性测定方法(结晶紫法和MTT法)

结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5×105个

蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法(Lowry法)操作方法

1.标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。

叶片水势测定方法小叶流法

Ⅰ、小液流法一、目的通过实验,掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。二、原理水势代表水的能量水平,水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定,水势越高,植物组织的吸水能力越差,而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后,如果植物组织水势

氯气测定方法介绍碘量法

一、原理氯被氢氧化钠溶液吸收,生成次氯酸钠,用盐酸酸化,释放出游离氯。反应式如下: 游离氯再氧化碘化钾生成碘,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算出氯的量。测定范围:35mg/m3以上。二、仪器①多孔玻板吸收瓶:125ml。②碘量瓶:250ml。③棕色酸式滴定管:10或25ml。④烟气采样器。三、试剂①吸