聚丙烯酰氨凝胶电泳的原理
1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或加核黄素后用紫外光(波长253.7毫微米)引发聚合。3、聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。4、聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白时,采用的丙烯酰胺总浓度为6.5%,内含单体96%,双体4.5%。5、聚合物分子中含有很多酰胺基,所以凝胶具有良好的亲水性,能在水中溶胀但不溶解。......阅读全文
聚丙烯酰氨凝胶电泳凝胶异常的原因分析和处理办法
出现拖尾现象的原因主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。此外可能是灌胶时分离胶过多导致浓缩胶很少,不能起到浓缩作用,没有把样品压成一条线。处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度;灌胶时分离胶不要过多。出现纹理现象的原因主要是样
聚丙烯酰氨凝胶电泳凝胶出现纹理的原因分析和处理办法
出现纹理现象的原因主要是样品不溶性颗粒引起的。处理办法:加样前离心;加适量样品促溶剂。
聚丙烯酰氨凝胶电泳出现鬼带的原因分析和处理办法
“鬼带”就是在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时,常会出现在泳道顶端(有时在浓缩胶中)的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀,主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性,致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合,聚合成大分子,其分子量要比目标条带大,有时不能进入分离胶。但它却于目标条带有相
聚丙烯酰氨凝胶电泳条带异常的原因分析和处理办法
电泳中条带很粗是常见的事,主要是未浓缩好的原因。处理办法:适当增加浓缩胶的长度;保证浓缩胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压;
聚丙烯酰氨凝胶电泳凝胶拖尾的原因分析和处理办法
出现拖尾现象的原因主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。此外可能是灌胶时分离胶过多导致浓缩胶很少,不能起到浓缩作用,没有把样品压成一条线。处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度;灌胶时分离胶不要过多。
聚丙烯酰氨凝胶电泳提高SDSPAGE电泳分辨率的途径
聚丙烯酰胺的充分聚合,可提高凝胶的分辨率。待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置,前者易导致凝固不充分,后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天,SDS可水解聚丙烯酰胺。一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料,不同染料又各自不同的染色方法。
聚丙烯酰氨凝胶电泳提高SDSPAGE电泳分辨率的途径
提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径聚丙烯酰胺的充分聚合,可提高凝胶的分辨率。待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置,前者易导致凝固不充分,后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天,SDS可水解聚丙烯酰胺。一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料,不同
聚丙烯凝胶电泳的原理及优点
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,
聚丙烯凝胶电泳的原理及优点
1967年,Shapiro等发现阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS)具有这种作用:当向蛋白质溶液中加入足够量SDS和巯基乙醇,SDS可使蛋白质分子中的二硫键还原(在一定条件下,大多数蛋白质与SDS的结合比为1.4gSDS/1g蛋白质)。由于十二烷基硫酸根带负电,使各种蛋白质-SDS复合物都带上相
聚丙烯凝胶电泳的原理及优点
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,
氨酰位
中文名称氨酰位英文名称aminoacyl site;A site定 义核糖体中氨酰tRNA进入并停留的部位。在蛋白质合成过程中,氨酰位上的氨酰tRNA转为肽酰tRNA,并移动至肽酰位,即P位。空的氨酰位再接纳新的氨酰tRNA进入,如此循环。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
氨酰tRNA
中文名称氨酰tRNA英文名称aminoacyl tRNA定 义转移核糖核酸的3′端通过酯键与氨基酸连接生成,进入核糖体的A位参与蛋白质生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA与活化氨基酸(即氨酰AMP)反应得到。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
氨酰磷脂酰甘油的结构信息
中文名称氨酰磷脂酰甘油英文名称aminoacyl phosphatidylglycerol定 义在磷脂酰甘油中,甘油的C-1和C-2位羟基与两分子脂肪酸的羧基缩合成酯,其C-3位羟基则以酯键与一分子磷酸相连。另有一分子氨基酸的羧基再与C-3磷酸的另一端羟基形成磷酯键,此即氨酰磷脂酰甘油。应用学科生
氨酰位的定义
中文名称氨酰位英文名称aminoacyl site;A site定 义核糖体中氨酰tRNA进入并停留的部位。在蛋白质合成过程中,氨酰位上的氨酰tRNA转为肽酰tRNA,并移动至肽酰位,即P位。空的氨酰位再接纳新的氨酰tRNA进入,如此循环。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
氨酰磷脂酰甘油的基本信息
中文名称氨酰磷脂酰甘油英文名称aminoacyl phosphatidylglycerol定 义在磷脂酰甘油中,甘油的C-1和C-2位羟基与两分子脂肪酸的羧基缩合成酯,其C-3位羟基则以酯键与一分子磷酸相连。另有一分子氨基酸的羧基再与C-3磷酸的另一端羟基形成磷酯键,此即氨酰磷脂酰甘油。应用学科生
聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
1.聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。 2.制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)o在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;
聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gelelectrophoresis,简称PAGE) 作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEME
聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。具体如下:1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需
聚丙烯酰胺凝胶电泳的作用原理
作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理简介
1.聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。 2.制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)o在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamidegelelectrophoresis,简称page)作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称acr)和交联剂n,n’一亚甲基双丙烯酰胺(简称bis)在催化剂过硫酸铵(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamidegelelectrophoresis,简称page)作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称acr)和交联剂n,n’一亚甲基双丙烯酰胺(简称bis)在催化剂过硫酸铵(ap),n,n,n’,n’四甲基乙二胺(temed)作用
聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的原理
1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或
氨酰tRNA的基本信息
中文名称氨酰tRNA英文名称aminoacyl tRNA定 义转移核糖核酸的3′端通过酯键与氨基酸连接生成,进入核糖体的A位参与蛋白质生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA与活化氨基酸(即氨酰AMP)反应得到。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇氨酰位
中文名称:氨酰位英文名称:aminoacyl site;A site定 义:核糖体中氨酰tRNA进入并停留的部位。在蛋白质合成过程中,氨酰位上的氨酰tRNA转为肽酰tRNA,并移动至肽酰位,即P位。空的氨酰位再接纳新的氨酰tRNA进入,如此循环。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基
琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳,普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA段。琼脂糖通常用水平装置在强度和
聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理
聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
氨酰酯酶的基本信息
中文名称氨酰酯酶英文名称aminoacyl esterase定 义一种羧酸酯键水解酶,催化氨酰酯键的水解。如α氨基酸酯氨酰水解酶(α-amino-acid-ester aminoacylhydrolase,编号:EC 3.1.1.43)水解α氨基酸酯,产生α氨基酸和醇;氨酰tRNA氨酰水解酶(am