聚丙烯酰氨凝胶电泳的原理

1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或加核黄素后用紫外光(波长253.7毫微米)引发聚合。3、聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。4、聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白时,采用的丙烯酰胺总浓度为6.5%,内含单体96%,双体4.5%。5、聚合物分子中含有很多酰胺基,所以凝胶具有良好的亲水性,能在水中溶胀但不溶解。......阅读全文

琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理

聚丙烯酰胺凝胶电泳,普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA段。琼脂糖通常用水平装置在强度和

酰氨咪唑的禁忌证

  1.心脏房室传导阻滞者。  2.血小板、血常规及血清铁严重异常者。  3.有骨髓抑制病史者。  4.心、肝、肾功能不全者。  5.孕妇和哺乳期妇女。  6.对酰氨咪唑及三环类抗抑郁药过敏者。

酰氨咪唑的不良反应

  1.常见视力模糊、复视、眼球震颤、嗜睡。酰氨咪唑还可能激发潜在的精神病、引起老年人精神错乱或激动不安,不良反应发生率随血药浓度的增高而增高。罕见中枢神经毒性反应,表现为说话困难、口齿不清、抑郁、心神不定、强直以及难以解释的幻听、不能控制的躯体运动、幻视等。  2.消化系统:常见口渴、恶心、呕吐;

酰氨咪唑的药理作用

  1.抗惊厥作用:可能是通过增强钠通道的灭活效能,限制突触后神经元高频动作电位的发放,以及通过阻断突触前钠通道和动作电位发放,阻断神经递质的释放,从而调节神经兴奋性,产生抗惊厥作用。  2.抗外周神经痛作用:可能是通过作用于γ-氨基丁酸(GABA)B受体而产生镇痛效应,并与调节Ca2+通道有关。 

氨酰tRNA的基本信息

中文名称氨酰tRNA英文名称aminoacyl tRNA定  义转移核糖核酸的3′端通过酯键与氨基酸连接生成,进入核糖体的A位参与蛋白质生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA与活化氨基酸(即氨酰AMP)反应得到。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。

细胞化学词汇氨酰位

中文名称:氨酰位英文名称:aminoacyl site;A site定  义:核糖体中氨酰tRNA进入并停留的部位。在蛋白质合成过程中,氨酰位上的氨酰tRNA转为肽酰tRNA,并移动至肽酰位,即P位。空的氨酰位再接纳新的氨酰tRNA进入,如此循环。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基

细胞化学词汇氨酰tRNA

中文名称:氨酰tRNA英文名称:aminoacyl tRNA定  义:转移核糖核酸的3′端通过酯键与氨基酸连接生成,进入核糖体的A位参与蛋白质生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA与活化氨基酸(即氨酰AMP)反应得到。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理及应用

丙烯酰胺聚合成网状结构。蛋白与SDS形成聚合体,消除了蛋白本身的电荷,统一带负电,那么在电泳中它的泳动速度只跟分子量大小有关。从而能达到分离不同分子量蛋白的目的。主要用在检定蛋白混合物中的目的蛋白含量,或是电泳后用于WB分析。

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义和原理

变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是根据寡核苷酸的大小来分离,因此可将全长产物与不完整的短分子分开。电泳时通常每一泳道至少加1mg合成的寡核苷酸,电泳后在紫外灯下定位寡核苷酸条带,将长度正确的寡核苷酸从凝胶上切下。原理:蛋白质或多肽与SDS结合,经热变性和二硫键的还原,形成所带负电荷相对一致的非折叠

二维聚丙烯酰胺凝胶电泳原理介绍

二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离).这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析 蛋白质最有效的一种电泳手段.通常第一维电泳是等电聚焦,在细管中(φ1~3 mm)中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子

关于酰氨咪唑的注意事项

  1.(1)酒精中毒者;(2)心脏疾病患者(包括器质性心脏病和充血性心脏病);(3)冠状动脉病患者;(4)糖尿病患者;(5)青光眼患者;(6)对其他药物有血液方面不良反应史者(酰氨咪唑诱发骨髓抑制的危险性增加);(7)尿潴留者。  2.药物对老人的影响:老年患者对酰氨咪唑较敏感,可引起精神错乱、激

酰氨咪唑的药物相互作用

  1.酰氨咪唑与氯磺丙脲、氯贝丁酯(安妥明)、去氨加压素、赖氨加压素、垂体后叶素、加压素等合用时,可加强抗利尿作用。  2.洛沙平、马普替林、噻吨类、三环类抗抑郁药、红霉素、竹桃霉素、异烟肼、维拉帕米、地尔硫,右丙氧芬、维洛沙嗪、氟西汀、西咪替丁、乙酰唑胺、达那唑、地昔帕明等药可提高酰氨咪唑的血药

酰氨咪唑的药物相互作用

  1.酰氨咪唑与氯磺丙脲、氯贝丁酯(安妥明)、去氨加压素、赖氨加压素、垂体后叶素、加压素等合用时,可加强抗利尿作用。  2.洛沙平、马普替林、噻吨类、三环类抗抑郁药、红霉素、竹桃霉素、异烟肼、维拉帕米、地尔硫,右丙氧芬、维洛沙嗪、氟西汀、西咪替丁、乙酰唑胺、达那唑、地昔帕明等药可提高酰氨咪唑的血药

酰氨咪唑的适应证及禁忌

  适应证  1.癫痫复杂部分性发作(精神运动性发作或颞叶癫痫)、全身强直阵挛性发作、上述两种混合性发作或其他部分性或全身性发作。  2.缓解三叉神经痛、舌咽神经痛、脊髓痨的闪电样痛、糖尿病周围神经痛、患肢痛、外伤后神经痛和某些疱疹后神经痛等神经源性疼痛。  3.预防或治疗躁狂抑郁症;治疗情感性精神

氨酰酯酶的基本信息

中文名称氨酰酯酶英文名称aminoacyl esterase定  义一种羧酸酯键水解酶,催化氨酰酯键的水解。如α氨基酸酯氨酰水解酶(α-amino-acid-ester aminoacylhydrolase,编号:EC 3.1.1.43)水解α氨基酸酯,产生α氨基酸和醇;氨酰tRNA氨酰水解酶(am

氨酰酯酶的基本信息

中文名称氨酰酯酶英文名称aminoacyl esterase定  义一种羧酸酯键水解酶,催化氨酰酯键的水解。如α氨基酸酯氨酰水解酶(α-amino-acid-ester aminoacylhydrolase,编号:EC 3.1.1.43)水解α氨基酸酯,产生α氨基酸和醇;氨酰tRNA氨酰水解酶(am

氨酰tRNA合成酶的概念

氨酰-tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthases )是一类参与将氨基酸结合到其对应的tRNA上的过程的酶 [1]  。氨酰-tRNA合成酶参与的合成分两步进行。第一步是氨酰-tRNA合成酶识别它所催化的氨基酸以及另一底物ATP,在氨酰-tRNA合成酶的催化下,氨基酸的羧基与AM

氨酰tRNA的结构和功能特点

中文名称氨酰tRNA英文名称aminoacyl tRNA定  义转移核糖核酸的3′端通过酯键与氨基酸连接生成,进入核糖体的A位参与蛋白质生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA与活化氨基酸(即氨酰AMP)反应得到。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验原理介绍

  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和巯基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理

2006年生化考研题目,简答第五题。蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理 聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺单体(Acr)和少量的交联剂N,Nˊ-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂(过硫酸胺或核黄素)和加速剂(N, N,NˊNˊ-四甲基乙二胺)的作用下聚合交联成的三维网状结构的凝胶。以此凝胶为支持物的电泳称聚丙

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法对样品的分离作用,不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少,也与分子的大小有关。其次,聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应,即在电泳开始阶段,由于不连续pH 梯度的作用,将样品压缩成一条狭窄区带

聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)的基本原理

  SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)是一种用于根据蛋白质混合物的大小分离其成分的分析方法。  该技术基于这样的原理,即带电分子将在电场中朝具有相反符号的电极迁移。常规电泳技术不能用于确定生物分子的分子量,因为物质在凝胶中的迁移率取决于电荷和大小。  为了克服这个问题,需要对生物样品进行处理,以

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义和原理

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理和操作步骤

实验目的:测定蛋白质亚基的分子量及纯度 实验原理:在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的点泳迁移率主要取决于亚及分子量的大小,而电荷因素可以被忽略。当蛋白质的分子量在15KD到200KD之间时,电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系,可以用来测定蛋白质亚基的分子量。

SDS与聚丙烯酰胺凝胶电泳原理上有何不同

最大的不同是聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理。SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附。使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。聚丙烯酰氨(PAGE)凝胶电泳用于蛋白质与寡

SDS聚丙烯酰胺与聚丙烯酰胺凝胶电泳原理上有何不同

最大的不同是聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理。SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附。使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。聚丙烯酰氨(PAGE)凝胶电泳用于蛋白质与寡

甘氨酰谷氨酰胺的杂质类型

质ⅡOH C5H7NO3129.11 焦谷氨酸

酰氨咪唑的药代动力学

  酰氨咪唑口服吸收缓慢,且因人而异。口服酰氨咪唑400mg后4~5h血药浓度达峰值8~10μg/ml,但个体间差异很大,可在0.5~25μg/ml之间变动。酰氨咪唑抗癫痫作用的起效时间相差很大,约经8~72h可缓解三叉神经痛。达到稳态血药浓度的时间为40h(8~55h),成人的治疗性血药浓度为4~

丙氨酰谷氨酰胺的检查方法

酸度取本品1.0g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~6.0。溶液的澄清度与颜色取本品1.0g,加水5ml使溶解,溶液应澄清无色。如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,与黄色1号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。氯化物取本