转化酶的提取方法
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤,离心,再洗涤,重复数次,直到菌体呈白色,倾出上清液,将不含杂质的干净的酵母保存待用。粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶解,在pH值为5.5、50℃水浴中加热12 h后取出,4℃、10 000 r/min离心20 min.上清液即为粗制酶液。4℃保存。葡萄糖标准曲线的制定以葡萄糖含量为横坐标。以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。蛋白质标准曲线的制定以蛋白质含量为横坐标。以吸光度为纵坐标。绘制标准曲线.蔗糖酶活性的测定稀释酶液0.5 mL.加入0.3 mL pH值为4.6、0.1 mol/L的NaAc—HAc缓冲液.0.2 mL 0.1 mol/L的蔗糖溶液.37℃准确反应15rain后.加0.125 mL l mol/L的NaOH溶液中止反应。用DNS法在540 nm波长下测定形成......阅读全文
转化酶的提取方法
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤,离心,再洗涤,重复数次,直到菌体呈白色,倾出上清液,将不含杂质的干净的酵母保存待用。粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶解,在pH值为5.5、50
转化酶的分类
根据植物中蔗糖酶所处亚细胞位置,蔗糖酶可分为液胞型蔗糖酶、细胞质型蔗糖酶和细胞壁型蔗糖酶。前两者又统称为胞内蔗糖酶,细胞壁型蔗糖酶又被称为胞外蔗糖酶。不同的蔗糖酶进行反应所需的最适pH 值也有所不同,由此蔗糖酶又可分为酸性蔗糖酶和中性/碱性蔗糖酶。液胞型蔗糖酶和细胞壁型蔗糖酶在pH4 .5 至5 .
DNA提取方法-影响提取质量的因素-提高提取质量的方法
一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚
转化酶的作用介绍
蔗糖在蔗糖酶的催化下.水解为D-葡萄糖和D-果糖两种还原糖。蔗糖酶在植物的运输贮藏、碳水化合物代谢中发挥主要作用.并在渗透调节、抗逆性生长繁殖、以及信号传导方面也发挥着重要的作用。
DNA的提取方法
一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,
组织破碎提取法的提取方法比较
提取方法优点缺点煎煮法经济、安全、易行选择性差、成分易破坏、后期处理困难回流法选择性好、收率高受热长、效率低、成分易破坏浸泡法简单、投资小、安全效率低、耗时长、易变质蒸馏法选择性强、处理方便适用范围窄、需要专用设备渗漉法室温、简单、节能费时、有污染连续回流法省溶剂、效率高受热长、规模小、成分易破坏超
常用的溶剂提取样品提取方法
同一溶剂中,不同物质具有不同的溶解度。利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分分离的过程称为萃取,也称提取。 常用方法有以下几种: 1.浸提法: 浸提法又称浸泡法。用于从固体混合物或有机体中提取某种物质,所采用的提取剂,应既能大量溶解被提取的物质,又要不破坏被提取物质的性质。为
什么是转化酶?
蔗糖酶又称“转化酶”。糖苷酶之一,蔗糖酶(invertase)(β-D-呋喃果糖苷水解酶)(fructofuranoside fructohydrolase)(EC.3.2.1.26)特异地催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解,具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,也能催化棉子糖水
临床化学检查方法介绍血管紧张素转化酶
血管紧张素转化酶介绍: ACE可催化血管紧张素Ⅰ(十肽)水解成八肽的血管紧张素Ⅱ,使血管进一步收缩,血压升高。也可作用于肾上腺皮质,促进醛固酮的分泌。因此,ACE是肾素-血管紧张素-醛固酮的重要成分。ACE还催化具有降压作用的缓激肽水解而失去活性。ACE广泛分布于人体各组织,以附睾、睾丸及肺的含量
关于香菇多糖的提取的提取方法介绍
香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键
转化酶的定义和历史
糖苷酶之一。催化蔗糖水解成为果糖和葡萄糖的一种酶,广泛存在于动植物和微生物中,主要从酵母中得到。自1860 年Bertholet 从啤酒酵母Sacchacomyces Cerevisiae 中发现了蔗糖酶以来, 它已被广泛地进行了研究。蔗糖酶(β -D-呋喃果糖苷果糖水解酶,fructofurano
提取叶绿素方法
(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水
RBSDV-提取方法
实验概要从植物中提取RBSDV病毒。主要试剂提取缓冲液Ⅰ(GMT)[ 详细信息: Glycine 0.3mol/l MgCl2 0.03mol/l Tris-HCl 0.05mol/l (pH 7.5) ] 提取缓冲
茶多酚提取设备应用的提取方法有那些
从茶叶中制备茶多酚的传统方法主要分为以下三类。溶剂提取法 将茶叶用极性溶剂浸渍,然后把浸取液进行液—液萃取分离,最后浓缩得到产品。目前工业化生产主要采用此法。产品收率5%~10%,产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、已烷及三氯甲烷等。该法生产成本高,且易造成污染。离子沉淀法 用金属
微波提取法提取叶黄素的方法介绍
微波是一种瞬时穿透式加热方式,在微波场的作用下破碎植物细胞壁,从而加快了萃取速率和有效地提高了产品得率。微波提取技术在天然色素提取方面也取得了良好的效果。其优点是既降低了设备投资和运行成本,又符合环保要求 。
提取胡萝卜素提取的方法介绍
一、胡萝卜素的萃取法提取: 1、原理:胡萝卜素易溶于有机溶剂。 2、萃取剂的选择:萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。最佳萃取剂为石油醚。 3、影响萃取的因素 二、主要因素:萃取剂的性质和使用量。 三、次要因素:原材料颗粒的大小、紧密程度、含
热水提取法提取胶原蛋白的方法介绍
热水提取法是将原料经过除杂蛋白等前处理之后,在一定条件下直接用热水浸提已经变性了的胶原蛋白或胶原蛋白水解物,使用的温度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃
临床化学检查方法介绍磷酸甘油转化酶介绍
磷酸甘油转化酶介绍: 磷酸甘油转化酶是血液红细胞的一种转化酶。 红细胞酶在调节红细胞代谢中起重要作用。酶缺乏导致能量供应减少,红细胞寿命缩短引起溶血性贫血。过去这些疾病被称为先天性非球形红细胞溶血性贫血。mpgm缺乏目前还尚在研究探索之中。磷酸甘油转化酶正常值: (1)习惯单位:24.9±
单萜的-提取分离方法
环烯醚萜苷的提取,一般采用溶剂法,提取时常在植物材料中拌入碳酸钙或氢氧化钡以抑制酶的活性和中和植物酸,常用水、甲醇、乙醇、稀丙酮溶液、正丁醇、乙酸乙酯等作为提取溶剂。可采用冷渗液法和热回流提取法。在同一植物中,往往含有多种结构相似的环烯醚萜苷,欲进一步分离单一成分,可采用硅胶、氧化铝等制备性薄层或柱
香菇多糖的提取方法
香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键断裂
蔗糖酶的提取方法
酵母提纯酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤,离心,再洗涤,重复数次,直到菌体呈白色,倾出上清液,将不含杂质的干净的酵母保存待用。 [1] 粗酶液的制备准确称取离心分离后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶解,在pH值为5
细胞RNA的提取方法
(一)细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15 s。3、室温静置
核蛋白的提取方法
柱式法 Minute TM 胞质胞核分离试剂盒操作方法:A. 悬浮细胞样品(包括植物,细菌,酵母和真菌制备的原生质体)1.500Xg,3 分钟低速离心收集细胞,用预冷的 PBS 清洗一次2. 将细胞转移到 1.5 ml 离心管中,3000 rpm 离心 1-5 分钟,弃去上清。3. 按表格 1 加入
茶多酚提取方法的原理
目前从茶叶中制备茶多酚常用的方法主要分三类:溶剂提取法,离子沉淀法和柱分离制备法。溶剂提取法溶剂提取法是用极性溶剂从茶叶中浸取,然后把浸取液进行液-液萃取分离,最后浓缩并得到产品。目前工业化生产茶多酚主要采用此法。产品收率为5%~10%,产品的纯度约为80%~98%,咖啡因4%~7%。所用有机溶剂如
棉酚的提取方法
冷浸法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,密封,冷浸12h,抽滤,滤渣再冷浸1h,用溶剂10ml,二次抽滤,合并滤液,减压浓缩至10ml。回流法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,回流提取4h,抽滤,减压浓缩至10ml。先冷浸后超声法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,先冷浸
中药提取的传统方法
中药治疗的传统提取方法包括水煎煮法、浸渍法、渗漉法、改良明胶法、回流法、溶剂提取法、水蒸气蒸馏法和升华法等。其中水煎煮法是最常用的方法。 溶剂提取法 溶剂提取法是应用最广泛的方法,它是根据中草药中各种有效成分溶解度的性质,选用对需要成分溶解度大而对其他成分溶解度小的溶剂,将所需要的活性成分从
果胶的基本提取方法
果胶是一种天然的复合多糖类高分子化合物,在食品、医药和日用化学行业具有广泛的用途。现将西瓜皮提取果胶技术的具体操作方法介绍如下:1.蒸煮压榨。选用新鲜无毒无腐的西瓜皮,清洗除去泥土后放在蒸笼中,等上汽后蒸30-40分钟,以西瓜皮蒸透变软、有水析出并滴下为宜(以杀灭活细胞中的果胶酶)。然后将其放于包装
活性肽的提取方法
肽类的提取方法主要有两种,一种是化学法提取,一种是物理法提取。二者各有利弊,“化学提取法”主要是“化学酶反应提取法”。其反应快,生产量大,但缺点是提取出来的肽类活性较低,该法是市面上肽类产品的主要来源;“物理提取法”主要指“介质电容法活性肽提取技术”,其特点是反应慢,生产量小,但是生产出来的肽类
几种常见的提取方法
在化学分析中,一般分析仪器的要求都是溶液状态,所以把固体和半固体中待测物质提取到溶液中是几乎所有方法都要遇到的过程。其实在我们日常生活中,也无时无刻都在发生着提取的过程,比如泡茶、煮鸡汤就是一个提取的过程。今天的科普讲座就与大家聊聊常见的几种提取方法。索氏提取法 索氏提取法是一种经典萃取方法,在
酵母蛋白的提取方法
1 准备SD/-Leu或是YPD 培养基20ml,酵母过夜培养,30℃,230rpm。2 测OD600 约1.0。3 100ml过夜培养物,1000g,离心,5min,4℃。4 弃上清,重悬于80ul抽提buffer:0.1M Tris-Cl(PH7.5),0.2M NaCl,0.01Mβ-ME,2