凝胶色谱法的原理

凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。 根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,凝胶色谱又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。 分离原理: 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动:垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内......阅读全文

凝胶色谱法实验技术—凝胶的选择介绍

  凝胶色谱法实验技术根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。 一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例如Sephadex G-20的吸水量为20,1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验

凝胶色谱法原理相关介绍

  凝胶色谱法又称体积排阻色谱法,使用水溶液流动相的称为凝胶过滤色谱,使用有机溶剂流动相的称为凝胶渗透色谱。凝胶色谱的固定相是多孔物质,如多孔凝胶、交联聚苯乙烯、多孔玻璃及多孔硅胶等。试样是按照其中各组分分子大小的不同而分离的。大于填料微孔的分子,由于不能进入填料微孔,而直接通过柱子,Z先流出柱外,

凝胶色谱法GPC工作原理

凝胶色谱法GPC分析原理:样品通过凝胶柱时,按分子的流体力学体积不同进行分离,大分子先流出谱图的表示方法:柱后流出物浓度随保留值的变化提供的信息:高聚物的平均分子量及其分布根据所用凝胶的性质,可以分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法(GFC)和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法(GPC)。

凝胶色谱法主要应用方向

凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。

凝胶色谱法的实验技术

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,

凝胶色谱法的应用介绍

凝胶色谱仪采用国际先进技术及关键部件的基础上结合自主创新,产品性能国内,该设备主要用于水性和油性高分子聚合物的分子量大小及分子量分布检测,以及糖类、醇、脂肪酸、脂类的定性定量分析。凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂

生物样品分离技术凝胶色谱法

利用分子大小不同的物质在流过凝胶固定相时的保留时间不同,大分子首先流出,小分子最后流出,可将待测小分子化合物与大分子蛋白质分离。这时待测小分子化合物的浓度被流动相所稀释,必要时还要进行浓缩后再用色谱分析。

凝胶色谱法的基本理论

凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。基本理论(一) 分子筛效益一个

关于凝胶色谱法的分类介绍

  凝胶色谱法根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。  1、凝胶过滤色谱  凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。  2、凝胶渗透色谱  凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可

凝胶色谱法分子筛效益

分子筛效益两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙,即使它们的大小有差别,也不会有好的分离效果。因此,一定的分子筛有它一定的使用范围。综上所述,在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进入分子筛全部的内孔隙;

凝胶色谱法的重要参数介绍

⑴柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,因此柱体积又称“床”体积,常用Vt 表示。⑵外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,这部分体积称外水体积,亦称间隙体积,常用Vo表示。⑶内水体积:因为凝胶为三维网状结构,颗粒内部仍有空间,液体可进入颗粒内部,

关于凝胶色谱法的基本介绍

  凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂

关于凝胶渗透色谱法的简介

  又称为尺寸排阻色谱法 。1959年首先用于生物化学领域。以溶剂为流动相,多孔填料(如多孔硅胶、多孔玻璃)或多孔交联高分子凝胶为分离介质的液相色谱法。当混合物溶液入凝胶色谱柱后,流经多孔凝胶时,体积比多孔凝胶孔隙大的分子不能渗透到凝胶孔隙里去而从凝胶颗粒间隙中流过,较早地被冲洗出柱外,而小分子可渗

关于凝胶色谱法的研究动向介绍

  凝胶色谱的大量研究工作仍是多方面的,其中仪器、填料、联用技术、色谱理论等方面的进展是和整个液体色谱的进展相关的。但是下面四个研究动向意义较大,值得注意。通过与其他仪器联用,解决凝胶色谱法测定高聚物分子量分布从相对法向绝对法过渡。测定高聚物分子量分布是凝胶色谱最重要的应用。试样先根据分子体积(即分

关于凝胶色谱法的重要参数介绍

  ⑴ 凝胶色谱法— 柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,因此柱体积又称“床”体积,常用Vt 表示。  ⑵ 凝胶色谱法—外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,这部分体积称外水体积,亦称间隙体积,常用Vo表示。  ⑶ 凝胶色谱法—内水体积:因为凝

关于凝胶色谱法的填料合成介绍

  凝胶色谱法填料合成技术的进展主要在下面四个方面:填料的微球化、窄粒度分布多孔硅微球的合成成功、小孔径多孔硅微球合成成功以及新的硅微球表面化学改性的发展。近年来在这方面有较多的新产品,中国也有许多单位在研制和生产。高效凝胶色谱正在迅速改变凝胶色谱的应用面。  高效色谱柱除了对填料的粒度有要求外,对

凝胶色谱法的原理和重要参数

  凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。 GFC一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。凝胶渗透色谱法主要用于有

关于凝胶排阻色谱法的基本介绍

  排阻色谱法也称空间排阻色谱或凝胶渗透色谱法,是一种根据试样分子的尺寸进行分离的色谱技术。排阻色谱的色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出入。

凝胶渗透色谱法(GPC)分离原理是什么?

  GPC的分离原理就是体积排阻理论。色谱柱中,所填装的多孔性填料表面和内部有各种各样、大小不一的空的通道,当高分子溶液试样随溶剂进入柱子后,由于存在浓度差(推动力),所有溶质分子都力图向填料内部孔洞渗透。较小分子除了能进入较大的孔,停留时间适当短些;而最大的分子,只能从填料颗粒之间的空隙中通过,所

凝胶色谱法分析(GPC分析)原理是什么?

  凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,又称分子排阻色谱法,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等。  根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物

关于凝胶排阻色谱法的选择介绍

  要正确地选择色谱分离方法,首先必须尽可能多的了解样品的有关性质,其次必须熟悉各种色谱方法的主要特点及其应用范围。选择色谱分离方法的主要根据是样品的相对分子质量的大小,在水中和有机溶剂中的溶解度,极性和稳定程度以及化学结构等物理、化学性质。  一、相对分子质量  对于相对分子质量较低(一般在200

关于凝胶渗透柱色谱法的基本介绍

  凝胶渗透柱色谱法是利用交联、聚合而形成的表面惰性的多孔物质凝胶,经泡胀后具有一定孔径的三维网状结构,其网孔可使一定大小的分子渗透入内,较大的分子不能进入网孔,可不受阻滞地通过色谱柱,从而达到分离不同大小分子一种方法,又称为凝胶过滤色谱法(gel filtration chromatography

凝胶色谱法的分子筛效益理论介绍

  凝胶色谱法的分子筛效益理论:两种全排阻的分子即使大小不同,也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙,即使它们的大小有差别,也不会有好的分离效果。因此,一定的分子筛有它一定的使用范围。综上所述,在凝胶色谱中会有三种情况,一是分子很小,能进

实验室分析方法凝胶色谱法原理

凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分分子体积的大小进行分离的。小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰。全部在死体积前出峰;可对相对分子质量在100-10

凝胶色谱法实验技术—样品溶液处理的介绍

  凝胶色谱法实验技术—样品溶液处理:样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去,如含脂类可高速离心或通过Sephadex G-15短柱除去。样品的粘度不可大,含蛋白为超过4%,粘度高影响分离效果。上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%(一般约0.5-2ml),进

凝胶渗透色谱法进行样品预处理方法介绍

动、植物中农药残留检测分析具有基质复杂多样,测定干扰严重,待测成分种类繁多,含量低,多为微量、痕量组分等特点,其中样品预处理技术具有十分重要的作用,直接决定了分析结果的精确性。固相萃取和基质固相分散萃取技术常用于果蔬等农残检测。固相微萃取技术多用于分析环境样品如水、土壤等。微波辅助萃取广泛应用于分析

凝胶渗透色谱法进行样品预处理方法原理

GPC 是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离分子量不同的物质,并可分析分子体积不同、化学性质相同的高分子同系物。GPC 的柱填料为凝胶,是一种表面惰性物质,具有三维网状结构,含有许多不同尺寸的孔穴,不具有吸附、分配和离子交换作用。当含有多种分子的样品溶液缓慢流经凝胶色谱柱时

关于凝胶渗透色谱法的基本信息介绍

  凝胶渗透色谱法又称为尺寸排阻色谱法。1959年首先用于生物化学领域。以溶剂为流动相,多孔填料(如多孔硅胶、多孔玻璃)或多孔交联高分子凝胶为分离介质的液相色谱法。当混合物溶液入凝胶色谱柱后,流经多孔凝胶时,体积比多孔凝胶孔隙大的分子不能渗透到凝胶孔隙里去而从凝胶颗粒间隙中流过,较早地被冲洗出柱外,

凝胶色谱法中磷酸缓冲液的作用

缓冲液是保护,洗脱液极性一般很大,用了洗脱液洗脱后,长期不用缓冲液则会损坏。之前不是有洗涤血红蛋白那些步骤吗 是那里残留的影响ph的物质 5ml一管的是收集到的血红蛋白 书上都有按步骤写的 回归教材加缓存液是为了洗涤平衡,使凝胶装填均匀紧密。洗涤平衡是为了尽量减少除样品本身特性因素外其他因素的影响,

关于凝胶排阻色谱法的基本要求介绍

  1、凝胶排阻色谱法— 掌握色谱法的分类,色谱流出曲线及有关术语;  2、凝胶排阻色谱法— 掌握色谱法的基本理论,了解柱效的影响因素;  3、凝胶排阻色谱法— 掌握分离度与柱效、选择因子、容量因子、分析时间之间关系;  4、凝胶排阻色谱法— 了解定性、定量分析方法;  5、凝胶排阻色谱法— 掌握气