常用的质粒载体有哪些
载体种类:质粒、噬菌体、腺病毒载体、逆转录病毒载体质粒特点:存在于细菌染色体外的小型环状DNA分子。具有自我复制功能。带有抗性基因及表型识别等遗传性标记物。经改造后具有多克隆位点。举例:pMD-18T质粒、pUCl9质粒、pBR322质粒等......阅读全文
筛选质粒载体构建表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 氯仿 裂解缓冲液 检测抗原-抗体复合物所用试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液
酵母质粒载体具备的条件有哪些?
一个理想的基因载体应该具有以下几个基本条件: ①能在宿主细胞进行独立和稳定的DNA自我复制,并在其DNA中插入外源基因后,仍然保持着稳定的复制状态和遗传特性; ②易于从宿主细胞中分离,并进行纯化; ③在其DNA序列中,具有适当的限制性内切酶位点(最好是单一酶切位点)。这些位点位于DNA复制
筛选质粒载体构建表达文库实验
检测结合抗体的方法有以下 3 种:放射化学筛选,生色反应筛选及化学发光反应筛选。3 种方法的优缺点在本章导言中有所论述。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒封闭缓冲液氯仿裂解缓冲液检测抗原-抗体复合物所用试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓
pTrcHis2-B载体载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis2 B载体载体基本信息载体名称pTrcHis2 B载体抗性Ampicillin载体长度4404 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis2 B载体质粒图
LITMUS38i载体载体的基本信息和质粒图谱
LITMUS38i载体载体基本信息载体名称LITMUS38i载体抗性Ampicillin载体长度2814 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Evans PD, Cook SN, Riggs PD, Noren CJ.拷贝数High copy number克隆方法Enzym
pInvRecA载体的基本信息和质粒图谱
pInvRecA载体载体基本信息载体名称pInvRecA载体抗性Ampicillin载体长度7354 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Sektas M, Gregorowicz M, Szybalski W.拷贝数Low copy numberpInvRecA载体质粒图
pMiniT载体的基本信息和质粒图谱
pMiniT载体载体基本信息载体名称pMiniT载体抗性Ampicillin载体长度2525 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源New England Biolabs拷贝数High copy numberpMiniT载体质粒图谱
BlueScribe载体的基本信息和质粒图谱
载体基本信息载体名称BlueScribe载体抗性Ampicillin载体长度2746 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High copy number启动子T3克隆方法Enzyme
在质粒载体中进行定向克隆实验
在质粒载体中进行定向克隆实验 实验方法原理 大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司
在质粒载体中进行定向克隆实验
大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46 个之多,而且还可以设计含有更多克隆位点的多聚接头(Brosius 1992 ) ],因此一般来说总是能够找到一个带有与某一特定外源 DNA 片段
在质粒载体中进行定向克隆实验
实验方法原理 大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46 个之多,而且还可以设计含有更多克隆位点的多聚接头(Brosius 1992 ) ],因此一般来说总是能够找到一个带有与某一
pUAST载体的基本信息和质粒图谱
pUAST载体载体基本信息载体名称pUAST载体抗性Ampicillin载体长度8897 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Brand AH, Perrimon N.拷贝数High copy numberpUAST载体质粒图谱
pTrcHis-A载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis A载体载体基本信息载体名称pTrcHis A载体抗性Ampicillin载体长度4414 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis A载体质粒图谱
pBS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS(+)载体载体基本信息载体名称pBS(+)载体抗性Ampicillin载体长度3204 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS(+)载体质粒图谱
质粒克隆载体的设计和构建的原则
①选择合适的出发质粒出发质粒也叫亲本质粒,它应含有质粒克隆载体必备的元件,如复制起始位点、选择标记基因、克隆位点、启动子和终止子等。②正确获得构建质粒克隆载体的元件一般采用限制性核酸内切酶切割出质粒DNA分子,获得含有某种元件的DNA片段,还可以采用PCR技术从靶DNA中扩增出含某种元件的特异性DN
pDD载体的基本信息和质粒图谱
pDD载体载体基本信息载体名称pDD载体抗性Ampicillin载体长度3040 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Clontech拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpDD载体质粒图谱
pBR322与-pUC质粒载体相比优点
(1)具有更小的分子量和更高的拷贝数如pUC8为2 750bp,pUCl8为2 686bp,控制质粒复制rop基因的缺失,平均每个细胞即可达500~700个拷贝(2)适用于组织化学法检测重组体通过a-互补作用,利用菌落颜色筛选重组子。(3)具有多克隆位点区段(MCS)可以定向克隆防止载体自我连接。
pRSET-A载体的基本信息和质粒图谱
pRSET A载体载体基本信息载体名称pRSET A载体抗性Ampicillin载体长度2897 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET A载体质粒图谱
pBS()载体的基本信息和质粒图谱
pBS(-)载体载体基本信息载体名称pBS(-)载体抗性Ampicillin载体长度3204 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS(-)载体质粒图谱
pBS-KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS KS(+)载体载体基本信息载体名称pBS KS(+)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS KS(+)载体质粒图谱
pBS-SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBS SK(-)载体载体基本信息载体名称pBS SK(-)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS SK(-)载体质粒图谱
pEZSeq™Amp载体的基本信息和质粒图谱
pEZSeq™-Amp载体载体基本信息载体名称pEZSeq™-Amp载体抗性Ampicillin载体长度2056 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpEZSeq™-Amp载体质粒图谱
pRSET-C载体的基本信息和质粒图谱
pRSET C载体载体基本信息载体名称pRSET C载体抗性Ampicillin载体长度2895 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET C载体质粒图谱
pTrcHis-C载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis C载体载体基本信息载体名称pTrcHis C载体抗性Ampicillin载体长度4412 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis C载体质粒图谱
pBC-KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBC KS(-)载体载体基本信息载体名称pBC KS(-)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pBC-SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBC SK(-)载体载体基本信息载体名称pBC SK(-)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pOSIPTO载体的基本信息和质粒图谱
pOSIP-TO载体载体基本信息载体名称pOSIP-TO载体抗性Tetracycline载体长度6919 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源St-Pierre F, Cui L, Priest DG, Endy D, Dodd IB, Shearwin KE.拷贝数Hig
在质粒载体中进行平末端片段的克隆
1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3.分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp相当于660 D
pEZSeq™Kan载体的基本信息和质粒图谱
pEZSeq™-Kan载体载体基本信息载体名称pEZSeq™-Kan载体抗性Kanamycin载体长度2008 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpEZSeq™-Kan载体质粒图谱
pTrcHis-B载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis B载体载体基本信息载体名称pTrcHis B载体抗性Ampicillin载体长度4404 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis B载体质粒图谱